表达猪生长激素基因的重组腺病毒的构建及对猪生长的促进效果观察

利用复制缺陷型重组腺病毒作为基因表达载体,将猪生长激素（pGH）基因直接转导到猪体内细胞,研究猪生长激素基因在猪体内的促生长作用.用同源重组的方法,构建含pGH基因的重组腺病毒（Ad-pGH）.将其感染293细胞和PK-15细胞,均可检测到pGH.用1 mL此重组腺病毒（1010TCID50）一次性肌肉注射60日龄的杂交长白猪.结果表明,试验组的猪平均增重比对照组的猪增加37%（注射后第4周）和19%（注射后第6周）;饲料报酬提高28%（注射后第4周）和18%（注射后第6周）.试验结果证明,由重组腺病毒表达的pGH具有生物学活性,在猪体内起到明显的促进生长的作用.重组腺病毒介导的pGH基因在猪体内的表达可维持约4周.     

表达猪流感病毒血凝素基因的重组腺病毒的构建及免疫原性分析

通过细菌内同源重组的方法成功构建了表达H3N2亚型猪流感病毒血凝素的重组腺病毒。首先将血凝素基因亚克隆到穿梭载体质粒pAdeno Vator-CMV5-IRES-GFP上，与腺病毒基因组质粒pAdeno Vator△E1／E3共转化大肠杆菌BJ5183菌株，经细菌内同源重组产生重组腺病毒质粒pAd—HA—GFP。将该重组质粒转染293细胞以包装重组腺病毒。根据报告基因GFP的表达及Western-blot分析，证明获得了可正确表达猪流感病毒血凝素的重组腺病毒rAd—HA—GFP。重组腺病毒经一次性腹腔注射接种昆明鼠，2周后可检测到血凝抑制抗体，并且抗体至少可以持续12周，证实重组腺病毒介导表达的血凝素蛋白具有良好的免疫原性，可诱导小鼠产生高滴度的特异性抗体。     

鸡白细胞干扰素的研究

本研究采用鸡血细胞和鸡脾细胞诱生外源性干扰素。对不同种(株)的病毒、病毒剂量、营养液等因素对干扰素产生的影响进行了比较,测定了鸡白细胞干扰素的产生曲线和干扰素预处理鸡脾细胞后对干扰素产量的影响,也进行了干扰素提纯方法及其临床应用的研究。 试验结果表明,在I系新城疫病毒、F系新城疫病毒、鸡传染性支气管炎病毒、仙台病毒四种(株)病毒中,以F系新城疫病毒诱导干扰素的能力较强;病毒剂量对干扰素的产量影响不大;RPMIl640细胞培养液比0.5％水解乳旦Hanks液为好;鸡脾细胞在F系新城疫病毒作用后4小时即产生干扰素,12～20小时达到最高产量;干扰素预处理鸡脾细胞后,引起干扰素产量明显下降,采用硫酸铵盐析法将干扰素进行部份提纯,可提高纯度19.8倍,平均回收率为75.3％;干扰素能明显地减轻感染了传染性囊病的鸡的腔上囊的病变程度,看来对鸡传染性囊病会具有一定的防治作用。     

从猪组织中抽提黄曲霉素B_1

广东地处亚热带,高温多湿,饲料发霉的情况较严重,因此,黄曲霉毒素 B_1(AFTB_1)中毒症是我省较常见的中毒病之一,而 AFTB_1中毒症与猪的钩体病解剖症状相似,临床症状上较难区别。并且 AFTB_1又是一种强烈的致癌物质,因此对动物组织中 AFT的检验在人类的食品卫生方面无疑是非常必要的,而在兽医方面,也可以作为诊断动物AFT 中毒症的途径之一。动物食进含 AFT 的饲料后,在其肌肉、肝、肾血液等组织中     

干扰素

1957年,Isaacs和Lindenmann两位学者在研究病毒之间的干扰现象时,意外地发现一种可溶性的蛋白质,能干扰流感病毒在鸡胚绒毛尿囊膜组织中的繁殖,他们把这种物质称为干扰素(interferon).随后,经大量的研究,人们对干扰素有了更深一步的认识.一般认为,干扰素是自身产生的一种抵御外来病毒入侵、维持机体或细胞功能自我稳定的防御性物质.在病毒病和肿瘤的防治方面,干扰素是一种很有希望的生物制剂.因此,二十多年     

重组猪γ—干扰素在毕赤酵母中的表达及其生物学活性研究

采用RT-PCR从猪外周血液淋巴细胞中克隆出猪γ-干扰素基因cDNA,构建了重组酵母表达载体(pPICZα-PoIFN-γ),并在巴斯德毕赤酵母X33株中实现了高效分泌表达,经SDS-PAGE和Western-lot证实猪γ-干扰素分子量为18 kD,细胞培养试验结果表明,莺组猪γ-干扰素能抑制水泡性口炎病毒(VSV)对猪肾传代细胞(PK-15)的攻击;而在动物试验中,重组猪γ-干扰素可明显提高猪伪狂犬疫苗的免疫效果.