抗鸡传染性喉气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗同居感染试验

疫苗的接触传播是疫苗免疫接种需要考虑的重要因素,为了检测重组鸡痘病毒载体疫苗水平传播的能力,对隔离条件下饲养的SPF鸡用重组鸡痘病毒基因工程疫苗接种,同时设立非免疫对照鸡,饲养期间特意延长清粪时间以增加感染的机会,1个月之后攻击传染性喉气管炎WG株强毒和鸡痘102株强毒,疫苗免疫鸡全部获得保护,而非免疫鸡则全部发病.在试验动物饲养场的自然条件下,将免疫鸡和试验对照两组鸡饲养在同一个鸡舍内,让疫苗毒的传播更接近自然条件.在每个月的攻毒试验中,对照鸡都没有获得对鸡痘和传染性喉气管炎强毒的保护.在疫苗免疫期间进行连续5个月的跟踪检测,同居未免疫鸡没有检测到抗传染性喉气管炎病毒gB抗体.这些实验结果表明抗鸡传染性喉气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗不能通过接触传播.     

鸡传染性支气管炎病毒S1基因和鸡Ⅱ型干扰素基因在重组鸡痘病毒中的共表达

将鸡Ⅱ型干扰素（ChIFNγ）基因和鸡传染性支气管炎病毒S1基因同时插人到鸡痘病毒转移载体中，构建含有这2个基因的鸡痘病毒转移载体pSY—ChIFNγS1。采用脂质体法将该质粒转染鸡痘病毒感染的鸡胚成纤维细胞（CEF），经过8轮蓝斑筛选，得到纯化的能够同时表达鸡Ⅱ型干扰素和鸡传染性支气管炎病毒S1基因的重组鸡痘病毒rFPV—ChIFNγS1。rFPV—ChIFNγS1接种28日龄的SPF鸡1周后，可以检测到针对传染性支气管炎病毒S1基因的ELISA抗体，重组病毒接种鸡的CD4^＋、CD8^＋和γδTCR阳性T淋巴细胞的百分比含量显著高于非免疫对照鸡（P％0．05）；免疫4周后用传染性支气管炎LX4强毒株攻击，rFPV—ChIFNγS1免疫组仅有1只出现轻微的呼吸道症状（1／16），而非免疫对照组则有16只发病（16／16），并有2只出现死亡（2／16），表明rFPV—ChIFNγS1对接种鸡可以产生良好的保护效果。     

家禽抗病毒免疫

<正>目前对家禽生产的需求量在持续加大,随着集约化养殖的扩大,养鸡场更容易受到一些病原体比如细菌、病毒和一些寄生虫的袭击。现已采用多种方法比如改善饲养管理、调节饲料或使用疫苗来提高家禽的先天性和获得性免疫的能力,保护其不被感染,从而减少疫病造成的损失。其中疫苗免疫是提高家禽抵抗力的最好方法。本文对家禽抗病毒免疫的基本机理进行简述,为提高家禽的抗病毒免疫力提供借鉴。     

鸡源杭体制备技术

现在用于研究、诊断以及治疗的抗体主要是来源于哺乳动物的单克隆抗体或多克隆抗体,但多抗和单抗的制备技术技术都有优点及不足.在单抗制备的过程中存在的主要问题是有一些抗原对小鼠是弱免疫原或根本没有免疫原性.在多抗生产和纯化的过程中,多数情况下从哺乳动物血液中制备抗体的产量很低,而且步骤繁琐.另外制备过程中有一些步骤会导致动物产生应激.     

表达猪繁殖与呼吸综合征病毒CH-1a株核衣壳蛋白重组鸡痘病毒的构建

从含有猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）核衣壳蛋白（N）的质粒扩增出N基因，构建禽痘病毒转移载体。该载体含有禽痘病毒早晚期启动子LP2EP2控制之下的PRRSVN基因、P11启动下的报告基因lacZ以及用于同源重组的禽痘病毒基因组的片段。在转移载体转染亲本病毒S—FPV-017感染的鸡胚成纤维细胞（CEF）之后，采用蓝色表型筛选的方法，筛选到表达N基因的重组病毒，并对其进行了6轮蚀斑纯化。PCR方法鉴定证明重组病毒的基因组中含有完整PRRSVN基因，间接免疫荧光试验证明了PRRSVN蛋白在重组病毒感染的CEF细胞中获得表达，本研究为猪繁殖与呼吸综合征非复制型疫苗的研制打下了基础。     

不同免疫程序新城疫抗体消长规律分析

新城疫一直是严重危害我国养禽业的重要疾病,疫苗免疫是预防该病的主要手段[1].新城疫的免疫主要以体液免疫应答为主,疫苗主要有弱毒疫苗和灭活疫苗两种,应用中通过优化两种疫苗的免疫程序获得高水平而且持久的抗体来减少新城疫对家禽的危害.     

采用微粒运送系统诱导动物黏膜免疫

传染病现在仍是导致动物死亡,使畜牧业遭受损失的主要原因,疫苗免疫可以减少动物发病和死亡,对畜牧业生产的经济意义重大。但现在采用传统方法制备的疫苗在毒力、安全性和效力等方面不是最佳,因此需要开发新型疫苗以及替代免疫途径来     

采用腺病毒作为猪用疫苗的研究进展载体

疫苗是兽医学中最有效和最便宜的预防工具。现实的兽医领域不仅理想的疫苗很少,许多疫苗效力有限或有毒副效应,而且仍有一些严重疾病尚无有效疫苗。传统的疫苗包括灭活疫苗、弱毒疫苗和亚单位疫苗。近期已采用基因工程技     

3Rs在免疫制品的生产与质量控制中的应用

在生物医学研究中对实验动物使用的关注促进了替代方法的发展。一种替代可被定义为(1)采用非动物方法来替代动物模型;(2)减少用于特定目的实验动物的数量;或(3)优化操作程序的任何方法或策略。替代、减少和优化的3Rs原则从上世纪70年代开始引入到生物医学研究中,目前已经成为欧洲乃至全球实验动物法规都共同遵守的原则。免疫制品是由活的生物得到或生产的产品,其活性与抗原抗体的相互作用有关。与动物福利最相关的制品是多抗、单抗和疫苗。提到替代,多数人想到的是毒理学,其实,这些     

传染性喉气管炎病毒gB基因的主要免疫原片段在大肠杆菌中的表达

利用DNASIS等软件分析传染性喉气管炎病毒（ILTV）WG株的gB蛋白抗原性，筛选出一段抗原性较强的片段，该片段位于邸蛋白的403位至686位氨基酸残基之间。设计引物，引入双酶切位点EcoR Ⅰ，Sal Ⅰ，将目的片段t-gB插入原核表达载体pET30a（＋），得到重组表达质粒pET—tgB并转化到大肠杆菌BL21中，经IPTG诱导后，表达分子量为37ku的融合蛋白His—tgB，表达量占菌体蛋白的40．6％。Westemblot分析表明，His-tgB具有免疫反应性。重组蛋白免疫兔之后可以产生针对ILTVgB的特异性抗体。