西洋参DNA导入大豆实现遗传转化的研究Ⅱ.导入后代异黄酮类成分的含？…

用高效液相色谱法测定了西洋参 DNA导入大豆后代的异黄酮类成分、大豆苷 (daidzin)、大豆黄素(daidzein)、染料木苷 (genistin)、染料木素 (genistein)的含量 ,采用 U nisil Q C1 8柱 ,4.6 mm× 2 5 0 m m,流动相乙腈 - 0 .0 0 3mol/L 磷酸氢二钠 (17∶ 83) ,流速 1.0 m L/min,检测波长 2 5 4nm,结果表明 ,4种成分分离效果好 ,成分含量发生了广泛变异 ,从中可筛选出有效成分含量较高的新材料     

不同产地淫羊藿总多糖的理化性质比较

目的 研究和比较全国不同省份或地区淫羊藿药材总多糖的理化性质,为淫羊藿佐剂多糖的开发提供药材产地选择依据.方法 采用50℃条件进行水浸提、醇沉、透析和冷冻干燥获得总多糖.采用苯酚-硫酸法测定糖含量,间羟联苯法测定糖醛酸含量,凝胶渗透色谱法测定多糖相对分子质量分布,糖醇乙酸酯衍生-气相色谱法测定单糖组成.结果 不同产地的淫羊藿总多糖理化性质存在明显差异,其中陕西、湖南和吉林淫羊藿总多糖的得率较高,四川、湖南和吉林淫羊藿总多糖的糖含量较高,湖南、吉林和河南淫羊藿总多糖的糖醛酸含量较高,总多糖的相对分子质量分布相近,单糖组成差异较大,特别是半乳糖、甘露糖和阿拉伯糖的含量差异较大.结论 不同产地的淫羊藿药材的总多糖成分存在较大差异,可能与种属基因不同、生长环境不同有关.     

鹰嘴豆异黄酮提取物对糖尿病小鼠血糖和氧化一抗氧化态的效应

目的：通过观察鹰嘴豆异黄酮对糖尿病小鼠血糖及氧化-抗氧化效应的影响，探讨其降糖机制。方法：实验于2006—08／10在中国药科大学药理教研室动物实验中心完成。①选用清洁级昆明种小白鼠50只进行造模：小鼠以高糖高脂饲料喂养4周后，按25mg／kg剂量一次尾静脉注射链脲佐菌素，注射7d后血糖升高稳定、且随机血糖达16．7mmol／L以上者为造模成功。②随机将造模成功的小鼠50只均分为5组：高血糖模型对照组、二甲双胍治疗组、鹰嘴豆异黄酮提取物低、中、高剂量组，每组10只。在各组给予高糖高脂饲料的基础上，鹰嘴豆异黄酮提取物3个剂量组分别给予25mg／kg、50mg／kg、100mg，kg的受试物，高血糖模型对照组和二甲双胍治疗组分别给予150mg／kg的蒸馏水和二甲双胍，1次/d。连续4周。③给药2周末和4周末监测空腹血糖，实验结束时于空腹12h后将小鼠处死，取血和肝脏组织，测定血清及肝组织中丙二醛含量及超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶的活性。结果：纳入50只小鼠均进入结果分析。①空腹血糖：给予鹰嘴豆异黄酮提取物2周后，高剂量组与二甲双胍治疗组小鼠血糖值显著低于高血糖模型对照组（P〈0．05），且二者间差异无显著性；4周后，高、中剂量组均显著低于高血糖模型对照组（P〈0．05），二甲双胍治疗组极显著低于高血糖模型对照组（P〈0．01）；高、中剂量组与二甲双胍治疗组间差异无显著性。②丙二醛含量：与高血糖模型对照组相比，中剂量组和二甲双胍治疗组血清和肝脏中丙二醛含量均显著降低（P〈0．05），高剂量组呈极显著降低（P〈0．01），且高剂量组血清中丙二醛含量显著低于二甲双胍治疗组（P〈0．05）。③超氧化物歧化酶活性：中、高剂量组和二甲双胍治疗组血清和肝脏中超氧化物歧化酶活性均高于高血糖模型对照组（P〈0．05）。④过氧化氢酶活性：中、高剂量组血清和高剂量组肝脏中过氧化氢酶活性高于高血糖模型对照组（P〈0．05，P〈0．01，P〈0．05），高剂量组血清和肝脏中过氧化氢酶活性均显著高于二甲双胍治疗组（P〈0．05），而二甲双胍治疗组无论血清还是肝脏中过氧化氢酶活性与高血糖模型对照组相比差异无显著性（P〉0．05）。⑤谷胱甘肽过氧化物酶活性：中、高剂量组血清中谷胱甘肽过氧化物酶活性均高于高血糖模型对照组（P〈0．01）；各剂量组肝脏组织中谷胱甘肽过氧化物酶活性均高于高血糖模型对照组（P〈0．01）；二甲双胍治疗组血清和肝脏中谷胱甘肽过氧化物酶活性均显著高于高血糖模型对照组（P〈0．05），但肝脏中活性仍极显著低于3个剂量组（P〈0．01）。⑥给药后，模型鼠的血糖与血清超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性的相关系数分别为-0．9403、-0．9466和-0．9503；与肝脏超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性的相关系数分别为-0．9436、-0．9356和-0．9631。结论：①鹰嘴豆异黄酮提取物有显著的降血糖作用。（固鹰嘴豆异黄酮提取物降血糖作用的机制可能与其提高抗氧自由基酶类的活性，保护机体组织免遭过氧化损伤有关。②鹰嘴豆异黄酮提取物在降低过氧化产物丙二醛含量、增强机体抗氧化能力方面的功能优于治疗糖尿病的常用药物二甲双胍。     

茯苓多糖PCP-Ⅰ对乙肝疫苗抗原的佐剂活性

目的 研究茯苓多糖(PCP)-Ⅰ对乙肝疫苗抗原免疫小鼠免疫反应的影响.方法 采用60℃水提、醇沉、透析和冷冻干燥获得茯苓粗多糖PCP.PCP再经过DEAE-纤维素和Sephadex G-100柱色谱分离,获得相对分子质量均一多糖PCP-Ⅰ.凝胶过滤色谱法测定其峰高相对分子质量,毛细管电泳法测定其单糖组成.乙肝疫苗抗原(HBsAg,2μg/小鼠)分别与2个剂量PCP-Ⅰ(200μg/小鼠和50 μg/小鼠)联用,肌内注射途径免疫小鼠2次,分别于初次免疫后14d和第2次免疫后14、30、45、60和90 d,采用ELISA法测定小鼠血清特异性抗体IgG、IgM、IgA及IgG亚类抗体滴度水平.结果 PCP-Ⅰ为相对分子质量均一多糖,峰高相对分子质量约为3.0× 104,单糖摩尔比为岩藻糖∶甘露糖∶葡萄糖∶半乳糖=1.00∶1.81∶0.27∶7.27.佐剂活性结果表明,在第2次免疫后14～90 d期间,与单独抗原组相比,联用50或200μg PCP-Ⅰ均能显著提高受免小鼠血清特异性抗体滴度水平.单独抗原免疫产生的抗体类型主要为IgG1和IgM,而联用PCP-Ⅰ则还产生高滴度的IgG2a、IgG2b和IgG3.PCP-Ⅰ对乙肝抗原佐剂效果明显优于铝佐剂,而且随着时间的延长,抗体水平变化不明显.PCP-Ⅰ还能促进免疫小鼠脾T细胞和B细胞增殖,升高CD37CD19+的比值,降低CD4+/CD8+的比值.结论 茯苓多糖PCP-Ⅰ能显著提高乙肝抗原免疫小鼠体液免疫和细胞免疫能力,效果优于铝佐剂.     

西洋参DNA导入大豆实现遗传转化的研究Ⅱ.导入后代异黄酮类成分的含量测定

用高效液相色谱法测定了西洋参 DNA导入大豆后代的异黄酮类成分、大豆苷 (daidzin)、大豆黄素(daidzein)、染料木苷 (genistin)、染料木素 (genistein)的含量 ,采用 U nisil Q C1 8柱 ,4.6 mm× 2 5 0 m m,流动相乙腈 - 0 .0 0 3mol/L 磷酸氢二钠 (17∶ 83) ,流速 1.0 m L/min,检测波长 2 5 4nm,结果表明 ,4种成分分离效果好 ,成分含量发生了广泛变异 ,从中可筛选出有效成分含量较高的新材料     

将西洋参 DNA导入大豆实现遗传转化的研究Ⅰ.导入后代形态性状变异的分析

用西洋参作DNA的供体,用栽培大豆品种作为受体,利用分子育种导入技术之一的"浸种法"进行外源DNA导入,试图在继续保持大豆营养价值和具有的医疗保健作用的前提下,提高其已有的药用成分的含量和导入新的药用成分,培育出具更高药用价值或保健作用的栽培大豆新材料和新品系.目前导入后代在形态、品质和药物成分含量等性状方面产生了广泛的变异.本文报道了导入后代形态上的变异.     

鹰嘴豆异黄酮提取物对糖尿病小鼠血糖和氧化-抗氧化态的效应

目的:通过观察鹰嘴豆异黄酮对糖尿病小鼠血糖及氧化-抗氧化效应的影响,探讨其降糖机制。方法:实验于2006-08/10在中国药科大学药理教研室动物实验中心完成。①选用清洁级昆明种小白鼠50只进行造模:小鼠以高糖高脂饲料喂养4周后,按25mg/kg剂量一次尾静脉注射链脲佐菌素,注射7d后血糖升高稳定、且随机血糖达16.7mmol/L以上者为造模成功。②随机将造模成功的小鼠50只均分为5组:高血糖模型对照组、二甲双胍治疗组、鹰嘴豆异黄酮提取物低、中、高剂量组,每组10只。在各组给予高糖高脂饲料的基础上,鹰嘴豆异黄酮提取物3个剂量组分别给予25mg/kg、50mg/kg、100mg/kg的受试物,高血糖模型对照组和二甲双胍治疗组分别给予150mg/kg的蒸馏水和二甲双胍,1次/d,连续4周。③给药2周末和4周末监测空腹血糖,实验结束时于空腹12h后将小鼠处死,取血和肝脏组织,测定血清及肝组织中丙二醛含量及超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶的活性。结果:纳入50只小鼠均进入结果分析。①空腹血糖:给予鹰嘴豆异黄酮提取物2周后,高剂量组与二甲双胍治疗组小鼠血糖值显著低于高血糖模型对照组(P<0.05),且二者间差异无显著性;4周后,高、中剂量组均显著低于高血糖模型对照组(P<0.05),二甲双胍治疗组极显著低于高血糖模型对照组(P<0.01);高、中剂量组与二甲双胍治疗组间差异无显著性。②丙二醛含量:与高血糖模型对照组相比,中剂量组和二甲双胍治疗组血清和肝脏中丙二醛含量均显著降低(P<0.05),高剂量组呈极显著降低(P<0.01),且高剂量组血清中丙二醛含量显著低于二甲双胍治疗组(P<0.05)。③超氧化物歧化酶活性:中、高剂量组和二甲双胍治疗组血清和肝脏中超氧化物歧化酶活性均高于高血糖模型对照组(P<0.05)。④过氧化氢酶活性:中、高剂量组血清和高剂量组肝脏中过氧化氢酶活性高于高血糖模型对照组(P<0.05,P<0.01,P<0.05),高剂量组血清和肝脏中过氧化氢酶活性均显著高于二甲双胍治疗组(P<0.05),而二甲双胍治疗组无论血清还是肝脏中过氧化氢酶活性与高血糖模型对照组相比差异无显著性(P>0.05)。⑤谷胱甘肽过氧化物酶活性:中、高剂量组血清中谷胱甘肽过氧化物酶活性均高于高血糖模型对照组(P<0.01);各剂量组肝脏组织中谷胱甘肽过氧化物酶活性均高于高血糖模型对照组(P<0.01);二甲双胍治疗组血清和肝脏中谷胱甘肽过氧化物酶活性均显著高于高血糖模型对照组(P<0.05),但肝脏中活性仍极显著低于3个剂量组(P<0.01)。⑥给药后,模型鼠的血糖与血清超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性的相关系数分别为-0.9403、-0.9466和-0.9503;与肝脏超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性的相关系数分别为-0.9436、-0.9356和-0.9631。结论:①鹰嘴豆异黄酮提取物有显著的降血糖作用。②鹰嘴豆异黄酮提取物降血糖作用的机制可能与其提高抗氧自由基酶类的活性,保护机体组织免遭过氧化损伤有关。③鹰嘴豆异黄酮提取物在降低过氧化产物丙二醛含量、增强机体抗氧化能力方面的功能优于治疗糖尿病的常用药物二甲双胍。     

醋青皮水煎浸膏HPLC特征图谱及5个黄酮成分的含量测定

目的 建立醋青皮水煎浸膏高效液相色谱(HPLC)特征图谱,同时测定其中5种黄酮成分含量.方法 采用YMC-Pack ODS-A(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以乙腈和0.5％醋酸水溶液为流动相,梯度洗脱.柱温:30℃,流速:1.0 ml/min,进样量20μl.检测波长:280 nm(特征图谱)、283 ...