三氧化二砷抑制人肝癌细胞P27kip1 187位苏氨酸磷酸化

目的 探讨三氧化二砷(As2O3)对人肝癌SMMC-7721细胞的生长抑制与P27kipl第187位苏氨酸(P27Thr187)磷酸化的关系.方法 体外培养人肝癌细胞株SMMC-7721,2 μmol/L As2O3处理72 h,细胞计数法检测SMMC-7721生长,流式细胞仪检测细胞周期,核质分离、Western Blot及细胞免疫荧光技术检测P27、Thr187磷酸化的P27(p-P27T187)在SMMC-7721细胞中的表达及亚细胞定位.结果 2 ttmoVL As2O3明显抑制SMMC-7721的增殖,细胞周期阻滞在G2/M期.As2O3作用后P27蛋白总量增加,p-P27T187蛋白总量减少,并伴有Cdk2及cyclinE表达下降,同时P27发生从胞质向胞核的易位,p-P27T187核内表达减少.结论 As2O3可抑制P27T187的磷酸化,诱导P27在SMMCa721细胞核中的积聚.     

肝细胞癌患者肝组织中JAB1和P27kip1的表达变化及其临床意义

目的 研究肝细胞癌（HCC）组织中c-Jun激活域连接蛋白1（c-Jun activation domain binding protein 1，JAB1）的表达及与P27kip1(P27)间的关系，探讨JAB1与临床病理及预后的关系。方法 免疫组化检测HCC及 相应癌旁肝组织中JAB1和P27的表达。Western blot及免疫沉淀检测JAB1和P27的表达及相互作用。结果 HCC中，JAB1的表达高于癌旁肝组织，P27表达低于癌旁组织。JAB1的表达与组织分化程度、AFP值及转移相关（P<0.05）。HCC中JAB1与P27的表达呈负相关(r=－0.7077, P<0.001)，并且能免疫共沉淀。结论 JAB1的表达与P27负相关，JAB1作为P27的负性调控因子，可能与HCC的恶性进展及预后相关。     

Thr187磷酸化p27kip1、Skp2在肝细胞癌中的表达及其意义

本研究检测了Thr187磷酸化p27（P—p27Thr187）、Skp2及p27在HCC中的表达情况并结合临床资料进行分析，从p27分子磷酸化失活的新角度进一步研究HCC发病的分子机制，探讨其中的临床病理意义。     

肝细胞癌中磷酸化p27kip1的表达及意义

目的：探讨p27^kip1（p27）10号位丝氨酸（S10）和187号位苏氨酸（T187）磷酸化形式的蛋白在肝细胞癌（HCC）组织中的表达及临床病理意义。方法：免疫组化方法检测10例肝血管瘤旁肝组织、76例HCC及癌旁组织中T187、S10磷酸化p27（P-p27T187、P-p27S10）和p27蛋白的表达，Western blot检测两种磷酸化p27和p27在6例HCC及癌旁肝新鲜组织中的表达，并与增殖细胞核抗原（PCNA）的表达相比较。结果：Western blot显示，P-p27T187与P-p27S10在HCC组织中的表达高于对应的癌旁肝组织。免疫组化结果显示HCC中磷酸化p27、PCNA的表达显著高于癌旁组织和血管瘤旁肝组织（P〈0．001）。相关性分析表明HCC中两种磷酸化的p27与p27表达呈负相关，而与PCNA表达呈正相关（P〈0．001），P-p27T187和P-p27S10在HCC中的表达强度与肿瘤病理分级，血清AFP值及坏死之间相关（P〈0．05），此外，P-p27S10的表达还与转移相关：结论：P-p27T187、P-p27S10在HCC中高表达，与肝癌的恶性进展相关，在临床病理上具有潜在的应用价值。     

Skp2在三氧化二砷诱导的肝癌SMMC-7721细胞周期阻滞中的表达变化和意义

目的：探讨三氧化二砷（As2O3）对肝癌SMMC-7721细胞周期的影响,及其与细胞周期素依赖性激酶抑制因子（CDKI）p27^kip1和p27^kip1相关蛋白S期激酶相关蛋白2（S-phase kinase-associated protein2,Skp2）的关系,为临床应用提供依据。方法：体外培养人肝癌细胞株SMMC-7721,用2μmol/LAs2O3处理72h,流式细胞仪检测细胞周期变化,采用核浆分离、Western Blot技术及细胞免疫荧光技术检测该过程中p27^kip1、Skp2在SMMC-7721细胞中的表达变化及亚细胞定位情况。结果：与对照组比较,As2O3使SMMC-7721细胞周期阻滞在G2/M期。经As2O3作用的人肝癌细胞p27^kip1蛋白水平增加,Skp2蛋白水平降低,同时p27^kip1发生从胞浆到胞核的易位。结论：As2O3可下调Skp2的表达,从而促进SMMC-7721细胞中p27^kip1的积聚,干扰细胞周期的进程,抑制SMMC-7721细胞的增殖。     

三氧化二砷对人肝癌细胞株SMMC-7721中p27~(kip1)及其相关分子Skp2表达的影响

目的 通过检测三氧化二砷(As2O3)对肝癌SMMC-7721细胞周期素依赖性激酶抑制剂(CDKI)p27kip1及S期激酶相关蛋白2(Skp2)的影响,探讨其抗癌作用机制.方法 体外培养人肝癌细胞株SMMC-7721,用2μmol/L As2O3处理72h,流式细胞仪检测细胞周期变化及细胞凋亡率,应用Western blot方法检测p27kip1、Skp2及CDK2基因编码蛋白的表达.结果 与对照组比较,As2O3使SMMC-7721细胞周期阻滞在G2/M期.经As2O3作用的人肝癌细胞p27kip1基因编码蛋白表达增加,而p27kip1相关分子Skp2及CDK2的表达减少.结论 As2O3可干扰细胞周期的进程,抑制SMMC-7721细胞的增殖.其作用机制与上调p27kip1蛋白及下调Skp2、CDK2有关.     

联合检测HE4和CA125在卵巢肿瘤中的表达及其临床意义

目的:探讨HE4和CA125在卵巢癌中的浓度变化及其临床意义。方法:应用ELISA法检测血清HE4含量,同时应用电化学免疫发光方法检测CA125和CEA在实验对象血清中的浓度。结果:在卵巢恶性病变组中,HE4和CA125的阳性率分别为57.69%和60.25%,在HE4和CA125联合检测中阳性率为80.76%,且HE4和CA125的浓度均与患者腹水转移之间有统计学意义;CEA的浓度与临床病理特征均无统计学意义。结论:HE4在卵巢癌患者中高表达,与卵巢癌的恶性进展相关,可能成为与CA125作为卵巢癌监测的互补指标。     

全反式维甲酸对人白血病细胞系U937细胞生长的影响及其机制分析

目的 研究全反式维甲酸(ATRA)作用于人白血病细胞系U937细胞后,对细胞生长的影响及可能的机制.方法 收集1 μmol/L ATRA作用后的U937细胞,利用流式细胞术检测细胞周期分布,Western blot法检测细胞周期相关蛋白(cyclinA、p16、021、027及p27相关分子skp2)表达水平的变化,采用免疫沉淀方法检测U937细胞中027与Skp2的结合情况.结果 流式细胞术分析显示,在1μmol/L ATRA作用72 h后,72%的U937细胞被阻滞在G0/G1期.Western blot分析显示,ATRA能诱导cyclinA、Skp2表达下凋,p21、p27表达上调.免疫沉淀法检测结果显示在U937细胞中p27与skp2存在相互结合的情况.结论 ATRA可能主要通过诱导p27表达上调引起U937细胞生长阻滞,其过程是由p27相关分子Skp2所介导的.     

肝细胞癌中Thr157磷酸化p27^kip1的表达和意义

目的研究肝细胞肝癌（HCC）组织中157号位苏氨酸磷酸化的p27kip1（p-27kip1Thr157）和增殖细胞核抗原（PCNA、Ki67）的表达,探讨其间相互关系及与临床病理的关系,并分析其与临床预后的关系。方法免疫组化方法检测51例HCC及其癌旁组织、10例肝血管瘤旁肝组织中P-p27^kip1Thr157和Ki67蛋白的表达。免疫印迹技术检测8例HCC及其癌旁肝新鲜组织中P-p27^kip1Thr157和PCNA的表达情况。结果 （1）P-p27^kip1Thr157在HCC组织对应的癌旁组织和血管瘤旁肝组织低或缺失表达,PCNA在HCC中显著高表达（P〈0.001）。（2）在HCC中,P-p27^kip1Thr157的表达强度与肿瘤病理分级明显相关（P〈0.05）,Ki67的表达强度与HCC的分化程度、有无坏死和AFP值均明显相关（均P〈0.05）;HCC中P-p27^kip1Thr157与Ki67表达成显著正相关（r=0.604,P〈0.001）。（3）Kaplan-Meier和多因素COX回归分析,显示P-p27^kip1Thr157可作为HCC患者显著的一个独立的预后指标（P〈0.05）。结论 P-p27^kip1Thr157可能在HCC的发生发展中发挥重要的作用并有一定的预后评估价值。     

p27kip1和Spy1在肝癌细胞HuH7增殖过程中的表达变化及其相互关系

目的探讨p27kip1和Spy1在肝癌细胞HuH7增殖过程中的表达变化及相互关系。方法采用血清饥饿合并释放处理肝癌细胞株HuH7,通过流式细胞术检测该处理对HuH7细胞生长周期的影响;同时采用Western blot、免疫荧光技术检测不同生长状态的HuH7细胞中p27kip1和Spy1的表达及亚细胞定位情况;采用免疫沉淀方法检测HuH7细胞中p27kip1与Spy1的结合情况。结果血清饥饿造成HuH7细胞生长周期停滞,Spy1表达下降,p27kip1蛋白总量增加,差异有统计学意义（P〈0．05或〈0．01）。与此同时,p27kip1的阳性信号也由整个细胞分布转变为胞核高分布,而Spy1的阳性信号则由胞核高分布转变为胞浆高分布。血清释放后刺激细胞进入细胞周期,上述分子呈现相反的变化,且p27州的阳性信号在胞浆分布增强。结论Spy1可能通过与p27kip1结合来介导p27kip1的核内外分布并影响其表达,从而参与调控肝癌细胞的生长。