马兜铃酸Ⅰ对大鼠体内PI3K/Akt/NF-кB通路的影响к

目的探讨马兜铃酸Ⅰ(Aristolochic acidⅠ,AAⅠ)诱导的马兜铃酸肾病可能病变机制,分析其对PI3K/Akt/NFкB通路的影响。方法 SD雄性大鼠按随机数字表法分为空白对照组以及AAⅠ高、低剂量(9.0、2.25mg/kg)组,连续腹腔注射给药14d后,取血清检测肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、碱性磷酸酶(AKP),并用HE法染色观察肾脏病理组织学变化;用蛋白免疫印迹(Western blot)法分析PI3K、Akt、NFкB蛋白的表达,此外用免疫组织化学方法分析AAⅠ对肾脏组织IL-6和TNF-的表达变化。结果给药AAⅠ组与对照组比较,Cr、BUN、AKP水平显著升高(P0.05);肾脏病理学检查显示肾脏病变和炎症改变,IL-6、TNF-表达显著增多(P0.01);PI3K、Akt、NFкB及其磷酸化蛋白表达水平增高。结论 AAⅠ能导致肾脏毒性,并且可能通过激活PI3K/Akt/NFкB通路,诱发炎症,从而加重肾脏组织病理学改变。     

马兜铃酸I致大鼠肾损伤后血清miRNA差异表达的研究

目的筛选马兜铃酸I(AAI)致大鼠肾损伤后血清中差异表达的微小RNA(micro RNA,miRNAs),为阐明miRNAs调控马兜铃酸肾病的机制研究提供靶标并奠定研究基础。方法 SD雄性大鼠随机分为对照组及AAI(2.25 mg/kg)组,连续ip给药14 d造成肾损伤模型后,对大鼠肾脏进行HE染色观察肾损伤程度。利用miRNAs芯片技术寻找AAI组及对照组大鼠血清中差异表达的miRNAs,预测靶基因,采用实时定量PCR(qRT-PCR)验证芯片结果的可靠性,并对部分结果进行信号通路分析。结果 HE染色显示AAI组大鼠肾脏出现不同程度的病变;miRNAs芯片结果显示有5个miRNAs(miR-10a-3p、miR-207、miR-3594-3p、miR-874-3p、miR-9a-3p)表达明显上调,无明显下调的miRNAs,并预测Rhebl1、Usp10等16种基因为差异表达的miRNAs靶基因;qRT-PCR验证结果与芯片结果基本一致;信号通路分析结果显示MAPK信号通路等相关性较大。结论芯片分析得到的差异表达的miRNAs可能与AAI致肾毒性机制相关,为进一步深入研究特定miRNAs的调控机制提供新的靶点,并为后期生物信息学层次的研究提供有效依据。     

巨噬细胞在肾间质纤维化中的研究进展

肾间质纤维化(Renal interstitial fibrosis,RIF)是一种多病因的慢性肾脏疾病,其病程的持续发展最终导致终末期肾病。巨噬细胞作为肾间质纤维化发生过程中高度活跃的炎症性浸润细胞,近年来研究发现其能够以多种形式参与到纤维化的发展过程中,且呈现出错综复杂的作用机制,因此本文结合最新研究成果对巨噬细胞在肾间质纤维化中的功能作用进行综述。     

黄芪甲苷对“铁超载”所致小鼠肝损伤的保护作用

目的:研究黄芪甲苷对铁超载造成肝损伤保护的作用机制。方法:小鼠按体质量随机分为空白组,模型组、黄芪甲苷(As)低、中、高剂量组。连续给药45 d,取血清,检测血清Fe,总铁结合力(total iron binding capacity,TIBC),丙氨酸氨基转移酶(glutamic-pyruvic transaminase,ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(glutamic oxalacetic transaminase,AST),总胆红素(total bilirubin,T-BIL),丙二醛(malondialdehyde,MDA),谷胱甘肽(glutathione,GSH)水平;用苏木素-伊红(HE)染色观察肝脏病理组织学变化;用免疫组化法分析肝脏组织蛋白硝化的表达变化;用原位末端转移酶标记技术(TUNEL)染色法观察肝细胞凋亡的变化。结果:与空白组比较,模型组小鼠血清中血清Fe,ALT,AST,MDA,肝中铁和T-BIL含量显著增加(P0.01),而TIBC和GSH含量显著降低(P0.05,P0.01);与模型组比较,黄芪甲苷组小鼠血清中血清Fe,ALT,AST,MDA水平,及肝中Fe和TBIL含量显著降低(P0.05,P0.01),肝中TIBC和GSH含量显著增高(P0.05,P0.01);HE结果显示,与空白组比较,铁超载组可见肝细胞水样变性、肝细胞脂肪变性和炎症细胞浸润等;不同浓度黄芪甲苷组的上述病理改变得以改善;免疫组化结果发现,与空白组比较,铁超载组血管周围细胞浆中3-硝基酪氨酸(3-NT)显著增加,而黄芪甲苷组血管膜周围的3-硝基酪氨酸则显著减少;TUNEL染色发现与空白组比较,模型组肝细胞凋亡显著增多;与模型组比较,黄芪甲苷组肝细胞凋亡显著减少。结论:黄芪甲苷对铁超载造成的肝损伤具有保护作用。     

补体C3a分子及其受体在马兜铃酸I肾损伤大鼠体内表达分析

摘要：目的 分析补体C3a(complement 3a)及其受体C3aR(complement 3a receptor)在马兜铃酸I肾损伤大鼠体内表达情况，初步探究其在马兜铃酸肾病中的作用。方法 SD大鼠按体重完全随机分为溶媒对照组，马兜铃酸I(Aristolochic acid I,AAI)低、高剂量(2.25、9.0mg·kg-1)组，连续腹腔注射给药14天，取血清，检测肌酐(serum creatinine, Scr)、尿素氮(blood urea nitrogen, BUN)、补体C3、C3a；用HE法染色观察肾脏病理组织学变化；用蛋白免疫印迹(Western blot)法分析肾脏组织C3aR蛋白的表达；用免疫组织化学方法分析肾脏组织C3aR的表达变化。结果 与对照组相比，给药AAI组Cr、BUN水平显著升高(P<0.05，P<0.01)；补体C3水平显著降低，而C3a水平显著升高(P<0.05，P<0.01)；肾脏病理学检查显示肾脏有明显病变；Western blot结果显示，与溶媒对照组相比，AAI低、高剂量组大鼠肾脏中C3aR蛋白表达水平明显升高，且呈剂量依赖关系(P<0.01)；免疫组化分析显示，溶媒对照组肾组织中可在肾小管上皮细胞见C3aR少量表达，AAI给药后不同剂量组的大鼠肾组织中C3aR主要表达在系膜细胞、肾小管上皮细胞等，且C3aR表达显著高于对照组，随病理损伤程度增加而增多。结论 C3aR在马兜铃酸I致肾损伤大鼠肾脏组织中有表达，通过与其配体结合可能引起肾组织的损伤。补体C3a及其受体在马兜铃酸肾病中发挥一定的作用。     

芪珠方对铁超载致小鼠肝损伤保护作用的研究

目的:研究芪珠方对铁超载引起小鼠肝损伤的保护作用。方法:小鼠随机分为7组,分别为正常对照组和模型对照(右旋糖酐铁)低、中、高剂量组及芪珠方低、中、高剂量组。模型对照组分别采用小鼠腹腔注射总剂量为150、300、500mg/kg的右旋糖苷铁复制铁超载致肝损伤模型,喂食正常饲料;芪珠方各剂量组小鼠腹腔注射总剂量为500mg/kg右旋糖苷铁,喂食分别含有0.3%、0.5%和1%芪珠方饲料;正常对照组腹腔注射等量生理盐水,喂食正常饲料。喂食45d后,用生化试剂盒测定各组小鼠血清中血清铁(Serum iron)、总铁结合力(TIBC)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(T-BIL)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)水平及肝组织中铁(Liver iron)含量水平;苏木精-伊红(HE)染色法检测肝损伤情况;免疫组织化学的方法检测小鼠肝脏组织中3-硝基酪氨酸(3-NT)水平;TUNEL染色法检测肝组织细胞的凋亡水平。结果:与正常对照组比较,各模型组小鼠血清中MDA、ALT、AST、T-BIL水平出现不同程度的升高,GSH、TIBC水平降低,肝脏中铁含量升高,以模型对照高剂量组改变最为明显;与模型对照高剂量组比较,芪珠方各剂量组MDA、ALT、AST、T-BIL水平不同程度降低,GSH、TIBC水平升高,肝脏铁含量降低,以芪珠方高剂量组改善最为明显。血清铁含量各模型对照组与芪珠方各剂量组均偏高。肝脏病理显示,芪珠方可显著改善由右旋糖酐铁引起的肝脏病理损伤,抑制铁超载引起的蛋白质硝化、肝细胞凋亡状况。结论:铁超载可引起肝细胞蛋白质硝化、凋亡等异常反应,造成肝损伤,芪珠方可有效地减轻铁超载引起的肝损伤。