电脉冲介导基因转移效率的实验研究

目的　研究电脉冲介导的基因转移效率及其最佳的基因转移的电脉冲参数。方法　用微量注射器将pcD2/LacZ质粒10μg,在昆明小鼠的股四头肌注射,1～2min内在注射部位给予不同参数的电脉冲刺激(不同的电脉冲参数每组10只小鼠),然后进行β-半乳糖苷酶活性的测定或酶组织化学染色。同时设空白对照组及单纯注射组。结果　电脉冲可明显增加LacZ基因的表达,电脉冲组的β-半乳糖苷酶活性（131.6U/mg±86.5U/mg蛋白）是单纯注射组（4.9U/mg±1.0U/mg蛋白）的30倍（P<0.05）。组织化学染色结果表明电脉冲组肌肉组织中β-半乳糖苷酶蓝色颗粒的数目和染色的程度均明显高于单纯肌肉注射组。当电脉冲参数电压200V/cm,波宽40ms,脉冲次数6次和频率1Hz时,可获得最高的基因表达效率。结论　在最佳的电脉冲参数条件下,电脉冲介导的基因转移可获得较高的基因表达。     

肌肉电脉冲转移入α2干扰素基因的表达和抗肿瘤作用(英文)

目的:研究肌肉电脉冲转移人α2干扰素基因的表达和抗肿瘤作用。方法:先将pcD_2/hIFN-α2注射到雌性BALB/c小鼠或荷瘤雌性BALB/c裸鼠的股四头肌内,然后在注射部位给予电脉冲刺激,以hIFN-α2 ELISA试剂盒研究最佳的电脉冲转移参数和转移效率;应用裸鼠移植HL-60瘤模型研究肌肉电脉冲转移人α干扰素基因的抗肿瘤作用。结果:当电脉冲参数为:电压200 V/cm,波宽40ms,脉冲次数6次和频率1Hz时,可获得最高的基因表达,此时,电脉冲组的IFN-α2水平(160μg/L±31μg/L)是直接注射组IFN- α2(3.6 μg/L±1.6 μg/L)水平的45倍(P<0.01),肌肉电脉冲转移100μg或200μg pcD_2/hIFN-α2明显抑制HL-60荷瘤裸鼠肿瘤细胞的生长和延长荷瘤裸鼠的生存时间。结论:肌肉电脉冲介导的基因转移是一种有效的基因转移方法,采用此方法转移pcD_2/hIFN-α2可有效治疗白血病。     

电脉冲介导红细胞生成素基因肌肉转移治疗大鼠肾性贫血

研究电脉冲介导的质粒红细胞生成素基因肌肉转移效率以及对肾性贫血的治疗作用。方法用腺嘌呤诱导大鼠慢性肾性贫血模型,以电脉冲介导质粒ＥＰＯ基因肌肉转移对６０只大鼠实施基因治疗,治疗期间监测血红蛋白、红细胞压积血清肌酐、血清尿素氮,并用ＥＰＯ酶联免疫试剂盒测定血清ＥＰＯ水平,