用显微注射法建立转bcl—x1基因小鼠

建立转bcl-x1基因小鼠，继而传代建系，用于缺血性脑血管疾病的研究。采用显微注射法，将人bcl-x1基因注入昆明小白鼠受精卵获得子代鼠,然后作PCR，Southern-blot,mRNA,Western-blot检测以获得阳性鼠。实验中注射受精卵1654枚，移植卵数1448枚，受体鼠49只，怀孕鼠7只，子代鼠13只，整合数4只并均有表达，植入受精卵的存活率83％，受精卵的总存活率0．78％，移植鼠的怀孕率14．3％，整合效率30．7％，总有效率为0．24％。初步获得了转bcl-x1基因小鼠。     

用显微注射法建立转bcl-x1基因小鼠

建立转bcl-x1基因小鼠,继而传代建系,用于缺血性脑血管疾病的研究.采用显微注射法,将人bcl-x1基因注入昆明小白鼠受精卵获得子代鼠,然后作PCR,Southern-blot,mRNA,Western-blot检测以获得阳性鼠.实验中注射受精卵l 654枚,移植卵数1 448枚,受体鼠49只,怀孕鼠7只,子代鼠13只,整合数4只并均有表达,植入受精卵的存活率83%,受精卵的总存活率0.78%,移植鼠的怀孕率14.3%,整合效率30.7%,总有效率为0.24%.初步获得了转bcl-x1基因小鼠.     

用显微注射法建立转bcl-x_l基因小鼠

建立转bcl xl基因小鼠 ,继而传代建系 ,用于缺血性脑血管疾病的研究。采用显微注射法 ,将人bcl xl基因注入昆明小白鼠受精卵获得子代鼠 ,然后作PCR ,Southern blot ,mRNA ,Western blot检测以获得阳性鼠。实验中注射受精卵 16 5 4枚 ,移植卵数 14 4 8枚 ,受体鼠 4 9只 ,怀孕鼠 7只 ,子代鼠 13只 ,整合数 4只并均有表达 ,植入受精卵的存活率 83% ,受精卵的总存活率 0 .78% ,移植鼠的怀孕率 14 .3% ,整合效率 30 .7% ,总有效率为 0 .2 4 %。初步获得了转bcl xl基因小鼠     

人bcl-xl转基因小鼠外源基因的复制及传代的稳定性观察

显微注射法建立转bcl-xl基因小鼠，将PCR及Southern-blot检测阳性的小鼠与正常鼠酱并传代，然后检测子代中外源基因的遗传 情况。结果发现：10号小鼠传代过程中PCR阳性率保持稳定，符合孟德尔遗传规律，外源基因能够稳定遗传 。6号小鼠PCR阳性率呈轻微下降趋势，但能够保持相对稳定遗传 。13号和5号小鼠PCR阳性率均呈现明显的下降趋势。该二小鼠存在外源基因遗传丢失现象。结果提示：获得了能够稳定遗传 的转基因鼠系。     

建立转bcl-xL基因小鼠的研究

目的 建立转bcl—xL基因小鼠，继而传代建系，用于缺血性脑血管疾病的研究。方法 采用显微注射法，将人bcl—xL基因注入民明小白鼠受精卵获得子代鼠，然后作PCR、Southern—blot、mRNA、Western—blot检测以获得阳性鼠。结果 实验中注射受精卵1654枚，移植卵数1448枚，受体鼠49只，怀孕鼠7只，子代鼠13只，整合4只并均有表达。注射受精卵的存活率87．54％，受精卵的总存活率0．78％，受体鼠的怀孕率14．28％，整合效率30．77％，总有效率为0．24％。结论 获得了转bcl—xL基因小鼠，但转基因的效率较低，表达不稳定。     

对武汉师范院校应届毕业生有关安乐死的伦理学调查与思考

通过随机抽样,对276名华中师范大学09届毕业生进行安乐死意愿调查。调查数据表明,安乐死在大学生中的认知程度不高,还有很多人不了解安乐死;在主动安乐死和被动安乐死的接受程度中,两者的接受程度都不超过50％,而被动安乐死的接受程度更是低于25％。但大学生们认为人有权选择安乐死,安乐死也符合人道主义原则,希望进行安乐死立法。大学生的专业、性别以及户口来源都对其对于安乐死的认识有所影响。因此,安乐死的立法还需要广泛深入的调查研究。     

人bcl-xl转基因小鼠外源基因的复制及其传代稳定性

背景:近年的研究表明,在脑缺血再灌注损伤机制中,bcl-xl基因可能起着抗神经细胞凋亡的脑保护作用。目的:观察转bcl-xl基因小鼠外源基因的复制及传代稳定性问题。设计:以基因为观察对象。单位:华中科技大学同济医学院附属同济医院神经科和湖北省农科院畜牧兽医研究所。材料:实验于1999-10/2001-04在华中科技大学同济医学院附属同济医院完成。选取昆明种小鼠4只。方法:通过显微注射法建立转人bcl-xl基因小鼠,将PCR及Southern-blot检测整合阳性的小鼠与正常鼠交配并传代,然后检测子代小鼠外源基因的表达情况。作Southern-blot检测,结果证实第10,13,5,6号小鼠为整合阳性小鼠。以4只整合阳性小鼠作为首建者,分别与正常的昆明白小鼠交配繁殖传代,所生子代记为F1代,各系列的F1～F4代均采用阳性转基因小鼠与正常的昆明白小鼠交配繁殖传代方法,保持其杂合子形式。主要观察指标:检测外源基因的复制和传代的稳定性。结果:10号小鼠传代过程中外源基因PCR检测阳性率保持稳定,符合孟德尔遗传规律,表明外源基因能够稳定遗传。6号小鼠PCR阳性率呈轻微下降趋势,但仍能够保持相对稳定遗传。13号和5号小鼠PCR阳性率均呈明显的下降趋势,表明这2只小鼠存在外源基因遗传丢失现象。结论:应用基因组DNA做目的基因,可获得能够稳定遗传的转基因鼠系。     

乙型肝炎病毒基因组转基因小鼠模型的制备与鉴定

目的 建立一种新的乙型肝炎病毒(HBV)基因组高效复制与表达转基因小鼠模型,以用于抗HBV药物筛选和乙型肝炎发病机制的研究。方法 以加长的ayw亚型HBV全基因组作为目的基因,采用显微注射技术,转导于小鼠受精卵细胞雄原核,然后将受精卵细胞移植于受体假孕母鼠输卵管内,发育产生子代小鼠。鼠尾组织聚合酶链反应(PCR)筛选、Southern印迹鉴定后,再用酶链免疫吸附法(ELISA)检测血清乙型肝炎表面抗原及e抗原,Southern印迹检测血清HBV DNA。结果 实验获子代小鼠61只,鼠尾组织经PCR筛选、Southern印迹鉴定18只阳性,血清乙型肝炎表面抗原及e抗原、HBV DNA呈阳性反应7只。结论 1.3倍加长的HBV全基因组转基因小鼠具有较高的复制、表达效率。     

人bcl-xl转基因小鼠外源基因的复制及其传代稳定性

背景：近年的研究表明。在脑缺血再灌注损伤机制中，bcl-xl基因可能起着抗神经细胞凋亡的脑保护作用。 目的：观察转bcl-xl基因小鼠外源基因的复制及传代稳定性问题。 设计：以基因为观察对象。 单位：华中科技大学同济医学院附属同济医院神经科和湖北省农科院畜牧兽医研究所。 材料：实验于1999-10／2001-04在华中科技大学同济医学院附属同济医院完成。选取昆明种小鼠4只。 方法：通过显微注射法建立转人bcl-xl基因小鼠，将PCR及Southem-blot检测整合阳性的小鼠与正常鼠交配并传代，然后检测子代小鼠外源基因的表达情况。作Southern-blot检测，结果证实第10，13，5，6号小鼠为整合阳性小鼠。以4只整合阳性小鼠作为首建者，分别与正常的昆明白小鼠交配繁殖传代，所生子代记为F1代，各系列的Fl～F4代均采用阳性转基因小鼠与正常的昆明白小鼠交配繁殖传代方法，保持其杂合子形式。主要观察指标：检测外源基因的复制和传代的稳定性。 结果：10号小鼠传代过程中外源基因PCR检测阳性率保持稳定，符合盂德尔遗传规律，表明外源基因能够稳定遗传。6号小鼠PCR阳性率呈轻微下降趋势，但仍能够保持相对稳定遗传。13号和5号小鼠PCR阳性率均呈明显的下降趋势，表明这2只小鼠存在外源基因遗传丢失现象。 结论：应用基因组DNA做目的基因，可获得能够稳定遗传的转基因鼠系。