脂肪源性干细胞研究进展

现代组织工程学是近几年迅猛发展的新学科,将对组织器官的修复与替代治疗产生划时代意义.组织工程技术大致由四大要素组成:自体种子细胞的获得;种子细胞的生长与分化;种有细胞的载体移入体内;移植物与受区整合,组织形成.其中组织细胞的获得、培养与分化是此工程的前提和基础.目前多应用自体或异体成熟细胞如软骨细胞、脂肪细胞为种子细胞,但由于其体外扩增能力弱,难以获得足够的数量,且取材对供区造成的损失也较重.     

肠缺血灌流时异丙酚对肠上皮细胞凋亡的影响

目的:研究缺血再灌流时异丙酚对肠上皮细胞凋亡的影响及可能机制.方法:96只成年♂Wistar大鼠,随机分为假手术组、缺血再灌流 生理盐水组(I/R NS)和I/R 异丙酚组(I/R Pr).采用夹闭肠系膜上动脉(SMA)的方法制作肠缺血再灌流模型.以上各组分别在再灌流后0,30,60,120和240 min(每时间点8只)处死动物取肠袋组织.采用病理学方法观察肠上皮细胞损伤指数;原位DNA末端标记法(TUNEL)检测肠上皮细胞凋亡率的变化;免疫组化法检测肠上皮细胞Caspase-3,bcl-2表达的变化.结果:I/R Pr组与I/R NS组相比,肠上皮细胞病理变化较轻,肠上皮细胞的凋亡率明显下降(P<0.01),再灌流后0,30,60,120和240 min肠上皮细胞中Caspase-3阳性细胞数明显减少(104.4±5.3 vs 146.4±7.6;97.4±6.2 vs 130.4±7.4;134.4±5.1 vs 170.4±8.1;125.4±6.2 vs 160.4±9.5:101±5.8 vs 120.4±8.2,均P<0.01),而bcl-2阳性细胞数明显增加(13.34±4.12 vs 6.72±2.59;14.96±4.85 vs 8.24±3.13;15.29±5.28 vs 9.63±2.89;10.39±3.61 vs 9.63±2.89;10.39±3.61 vs 5.96±1.93;11.08±4.83 vs 6.87±2.43,均P<0.01).结论:异丙酚能抑制缺血再灌流时肠上皮细胞Caspase-3表达,而增加bcl-2表达,减少肠上皮细胞的凋亡.     

肠道干细胞的研究进展

干细胞具有持久的自我增殖与分化能力,可以产生多种高度分化细胞的未分化细胞。肠道干细胞主要位于肠黏膜上皮Lieberkunn's隐窝中,潘氏细胞上方,具备干细胞的终生自我更新与分化的基本特征。当受到外界生理或病理的信号作用后,肠道干细胞进行非对称分裂,形成一个原代干细胞和一个分化了定向祖细胞,定向组细胞进一步分化为具有特殊结构和功能的终末分化细胞,如:吸收细胞、杯状细胞、潘氏细胞、M细胞、内分泌细胞等,修复并重建小肠黏膜上皮屏障和消化吸收功能,小肠干细胞的这种潜能对肠道损伤后的修复十分关键。目前,国内肠道疾病常见,肠道黏膜,甚至黏膜下肌层的结构和功能受到破坏,通过干细胞技术和组织工程技术定向诱导肠道干细胞使其分化为特定的细胞以替代功能障碍的细胞或组织缺损,这可能是治疗肠道疾病的有效方法。为此对影响肠道干细胞增殖分化的因素及其干细胞在肠道创伤愈合中的可能作用进行综述。     

改构型和野生型酸性成纤维细胞生长因子对大鼠皮肤生长促进作用的比较

目的　比较改构型和野生型酸性成纤维细胞生长因子 ( a FGF)促进大鼠皮肤生长的作用。方法　将 2 mm× 2 mm的新生大鼠皮肤分别接种在含有 1、10和 10 0 μg/ L 3种不同浓度的改构型 a FGF和野生型 a FGF与体积分数为 10 %小牛血清的 Dulbecco改良 Eagle培养基中培养 4 d,然后测定生长后皮肤的面积。结果　空白对照组的皮肤面积为 ( 2 .96± 1.12 ) mm2 ,浓度为 1、10和 10 0 μg/ L 改构型 a FGF组的皮肤面积分别是空白对照组的 1.4、1.5和 1.3倍 ,而 3种不同浓度的野生型 a FGF组的皮肤面积分别是空白对照组的 1.5、3.2和 1.6倍。与其他组相比 ,只有浓度为 10μg/ L野生型 a FGF组的皮肤面积显著升高 ( P<0 .0 5 )。结论　改构型 a FGF对皮肤生长无显著刺激 ,其作用效果明显低于野生型 a FGF。     

帕瑞昔布钠应用于重症肌无力胸腺切除术后镇痛的效果

目的评价帕瑞昔布钠用于重症肌无力患者胸腺切除术后镇痛的效果。方法选择行胸腺切除术的重症肌无力患者157例,分为曲马朵组(51例,术后给予肌肉注射曲马朵1.0².0 mg·kg-1)、氟比洛芬酯组(53例,术后予以静脉缓慢滴注0.82.0 mg·kg-1)、氟比洛芬酯组(53例,术后予以静脉缓慢滴注0.8¹.0 mg·kg-1氟比洛芬酯)和帕瑞昔布钠组(53例,术后予以静脉缓慢滴注0.61.0 mg·kg-1氟比洛芬酯)和帕瑞昔布钠组(53例,术后予以静脉缓慢滴注0.6¹.0 mg·kg-1帕瑞昔布钠),对3组患者术后1、2、6、12、24 h的静息及运动视觉模拟评分(VAS)、平均动脉压(MAP)、心率(HR)、呼吸频率(RR)、血氧饱和度(SpO2)及不良反应发生率进行比较分析。结果氟比洛芬酯组及帕瑞昔布钠组术后1、2、6、12、24 h的静息及运动VAS评分、MAP、HR、RR显著低于曲马朵组,差异有统计学意义(P<0.05)。帕瑞昔布钠组患者术后1、2、6、12、24 h的静息及运动VAS评分均显著低于氟比洛芬酯组(P<0.05)。氟比洛芬酯组及帕瑞昔布钠组的不良反应发生率均显著低于曲马朵组(P<0.05),且帕瑞昔布钠组的不良反应发生率显著低于氟比洛芬酯组(P<0.05)。结论重症肌无力患者胸腺切除术后采用帕瑞昔布钠进行镇痛,其镇痛时效显著优于氟比洛芬酯及曲马朵,且镇痛药物剂量小,术后不良反应率低。     

不同发育时期胎儿皮肤中基质金属蛋白酶-9,2及金属蛋白酶-2抑制因子基因表达的变化

目的:研究基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及其组织抑制因子(TIMP-2)在不同胎龄的胎儿皮肤中表达的变化特征及其可能的生物学意义.方法:用病理学技术检测不同发育时期胎儿皮肤的结构特征后,提取18例不同胎龄(13～33周)的胎儿皮肤总RNA后,分离mRNA,用RT-PCR方法检测这3种基因在不同组织中的表达变化规律.结果:MMP-9、MMP-2和TIMP-2基因在不同发育时期的胎儿皮肤组织中的表达变化规律相似.在早期妊娠胎儿皮肤中,这3种基因表达较弱,随着胎儿生长发育,MMP-9,MMp-2和TIMP-2基因表达逐渐增强,妊娠晚期的皮肤组织内,这3种基因表达产物的灰密度比值分别是妊娠早期的8.8、2.4和3.1倍,基因表达水平显著升高(P＜0.05).结论:MMP-9,2和TIMP-2对皮肤的生长发育、结构功能的维持以及创面修复具有重要的调节作用.妊娠早期,TIMP-2基因低表达可能与胎儿皮肤创面无瘢痕愈合相关,而妊娠晚期皮肤中TIMP-2基因表达增强可能是创面愈合后形成瘢痕的机制之一.     

△Np63α在创面愈合过程中表达改变的研究

目的:探讨p63基因编码的蛋白亚型△Np63α在创面愈合表皮再生中的表达及其生物学意义.方法:①在3周龄小鼠背部用直径1.6cm的环钻压切制备出一个2.0cm2全层皮肤缺损的圆形创面,并将切除的皮肤原位缝合以覆盖创面.②将18只昆明小鼠随机分成两组,实验组12只小鼠均在背部用环钻制备圆形创面;而对照组6只小鼠不致伤.分别于1d、2d、3d、7d、14d、21d在实验组创缘和对照组小鼠背部相同部位切取全层皮肤组织标本,用抗鼠多克隆抗体P40进行抗△Np63免疫组化染色.结果:△Np63α在正常皮肤中的特征性表达模式是强阳性染色限于生发层的角质形成细胞核.伤后1～2d,表皮开始迁移,与对照组正常皮肤相比,迁移表皮舌基底层细胞△Np63α表达下调.伤后3d,△Np63α有较强的表达出现在创缘和迁移的表皮舌中,阳性染色限于基底层和其上方1～2层的角质形成细胞,而创面尚未被上皮覆盖处则没有阳性细胞.伤后5～7d,△Np63α有更强的表达出现在创缘和迁移表皮舌的基底层角质形成细胞.伤后14～21d创面愈合,△Np63α在覆盖创伤区表皮的基底层和棘层的细胞中高表达,并且其表达在表皮中长期和持续的存在.结论:△Np63α可能通过调控表皮修复中的细胞增殖和细胞迁移而参与正常皮肤的创面愈合过程.     

异丙酚对肠上皮细胞氧化应激损伤的影响

目的:探讨异丙酚对大鼠肠上皮细胞(intestinal epithelia cell,IEC)氧化应激损伤的影响。方法:利用H2O2产生.OH攻击制备IEC氧化损伤模型。实验设对照组、H2O2组(2.5 mmol/L)、异丙酚组(异丙酚100μmol/L)。用四甲基偶氮唑盐(MTT)实验检测IEC的存活率,测定上清测乳酸脱氢酶(LDH)和细胞中丙二醛(MDA)含量。结果:与对照组相比,H2O2组LDH、MDA水平明显增高,细胞生存率减少(P<0.01)。异丙酚组与H2O2组相比,LDH漏出显著减少,MDA形成减少,并能提高细胞的细胞生存率(P<0.01)。结论:异丙酚对大鼠IEC氧化损伤具有保护作用。     

地佐辛复合右美托咪定在开胸术后镇痛的应用效果

目的评价地佐辛复合右美托咪定在开胸术后的镇痛效果。方法选择行择期开胸手术患者96例,随机分为A、B、C组,每组32例,全部患者手术结束后,A组患者给予芬太尼+地佐辛+托烷司琼镇痛;B组患者给予氟比洛芬酯+地佐辛+托烷司琼镇痛;C组患者给予右美托咪定+地佐辛+托烷司琼镇痛;对3组患者术后2、4、8、24、48 h的疼痛视觉模拟评分(VAS)及Ramsay镇静评分进行观察记录,并对3组患者术后24 h内单次自控镇痛(PCA)平均按压次数及头晕、恶心、呕吐、嗜睡等不良反应进行比较分析。结果 B组和C组患者术后2、4、8 h的疼痛VAS评分显著低于A组(P<0.05),且C组患者术后2、4 h的疼痛VAS评分显著低于B组(P<0.05);B组和C组患者术后2 h的Ramsay镇静评分显著高于A组(P<0.05),而术后4、8、24 h的Ramsay镇静评分显著低于A组(P<0.05)。B组和C组患者术后24 h内的PCA平均按压次数显著低于A组(P<0.05),而C组患者术后24 h内的PCA平均按压次数显著低于B组(P<0.05)。B组和C组患者的不良反应发生率显著低于A组(P<0.05)。结论地佐辛复合右美托咪定应用于开胸术患者的术后镇痛效果较好,较地佐辛复合氟比洛芬酯或芬太尼使用剂量更少,且不良反应少。     

改构型aFGF减轻大鼠小肠缺血再灌注所致肠道细胞凋亡

目的研究改构型酸性成纤维细胞生长因子(m aFGF)对大鼠肠缺血再灌注损伤所致肠道细胞凋亡的影响。方法将54只大鼠随机分为假手术组、生理盐水对照组和m aFGF治疗组。假手术组大鼠暴露肠系膜上动脉(SMA),不夹闭。生理盐水对照组和m aFGF治疗组大鼠以SMA夹闭造成肠缺血45分钟,松夹形成缺血再灌注,于再灌注即刻分别静脉注射生理盐水0.1m l和m aFGF 4μg,缺血再灌注2、6、12、24小时,取小肠组织观察组织学改变,用末端脱氧核糖转移酶介导的生物素化脱氧尿嘧啶缺刻标记技术(TUNEL)检测肠道细胞凋亡率。结果组织学检查显示生理盐水对照组缺血再灌注2~24小时肠道损伤严重,m aFGF治疗组肠道损伤较生理盐水对照组有所减轻。细胞凋亡检测结果假手术组肠道细胞凋亡率很低,生理盐水对照组和m aFGF治疗组细胞凋亡率明显高于假手术组。缺血再灌注12小时,生理盐水对照组细胞凋亡率高达(62.8±1.7)%,而m aFGF治疗组为(42.5±2.6)%,两者有统计学差异(P<0.05)。结论m aFGF能减轻大鼠肠缺血再灌注所致的肠道细胞凋亡。