膀胱癌差异表达基因BQ135232的全长克隆及意义

目的 克隆并鉴定膀胱移行上皮细胞癌(BTCC)的差异表达基因.方法 应用抑制消减杂交技术(SSH)构建膀胱癌和其正常上皮组织差异表达的cDNA消减文库,进一步利用斑点印迹杂交筛选出BTCC差异表达的基因, 对其中明显差异表达的BQ135232应用SMART RACE克隆全长,再应用免疫荧光原位杂交进行染色体定位,并应用Northern blot进行差异表达分析.结果 成功构建了人膀胱癌组织的cDNA消减文库,共含有376个阳性克隆和83个阴性克隆.随机挑出的100个阳性克隆中,76个克隆含有肿瘤差异表达的基因片段,对其进行同源性比对分析,其中有66个克隆为已知基因,其余的10个克隆代表5种未知基因.未知基因中BQ135232共有3个拷贝,染色体定位发现其位于第12号染色体近末端处.Northern杂交分析显示它在膀胱癌组织中高表达,而在正常膀胱组织中无明显表达.结论 本研究表明BQ135232是跟膀胱癌发生发展密切相关的新基因,它的成功克隆为阐明膀胱癌发生发展的分子生物学机制开辟了新的途径.     

肾癌的基因治疗进展

大多数肾癌对化疗和放疗不敏感 ,预后较差 ,目前仍缺乏有效的治疗手段 ,随着基因转导技术、肿瘤免疫学、分子生物学等学科的发展 ,基因治疗成为较有前景的一种方法。应用修复抑癌基因、阻断癌基因、抗血管疗法、免疫基因治疗及自杀基因治疗等疗法治疗肾癌已取得了很大进展。     

膀胱移行细胞癌差异表达基因的克隆与鉴定

应用抑制消减杂交(ssH)构建膀胱移行细胞癌差异表达的消减文库，再应用Dot blot方法筛选出差异表达的基因，为研究膀胱癌发生、发展提供实验依据。现报告如下。     

外周血中前列腺特异性抗原mRNA表达的临床意义

多年临床实践表明 ,前列腺特异性抗原 (prostaticspecificantigen ,PSA)在前列腺癌的诊断和治疗中有重要作用。但是PSA并不能协助前列腺癌的早期诊断 ,很多患者在确诊时已属晚期 ,这也是前列腺癌治疗效果不尽人意的重要原因之一。为寻找更为准确可靠的前列腺癌诊断指标 ,我们采用RT PCR技术对前列腺癌患者进行研究 ,为前列腺癌转移的分子生物学行为提供理论依据 ,并希望在前列腺癌的诊断方面有所突破。一、资料与方法1.临床资料 :病例组 :选取天津医科大学第二医院和天津市肿瘤医院 2 0 0 1年 2月～ 2 0 0 2年 5月住院前列腺癌患者3 3…     

肾癌的基因治疗进展

大多数肾癌对化疗和放疗不敏感，预后较差，目前仍缺乏有效的治疗手段，随着基因转导技术、肿瘤免疫学、分子生物学等学科的发展，基因治疗成为较有前景的一种方法。应用修复抑癌基因、阻断癌基因、抗血管疗法、免疫基因治疗及自杀基因治疗等疗法治疗肾癌已取得了很大进展。     

应用抑制消减杂交和斑点印迹杂交对膀胱癌差异表达基因的研究

目的：研究膀胱移行细胞癌和正常膀胱黏膜的差异表达基因。方法：应用抑制消减杂交技术(Suppression subtractive hybridization SSH)构建人膀胱移行细胞癌和正常粘膜差异表达的cDNA消减文库，进一步利用斑点印迹杂交(Dot blot)从中筛选出TCC差异表达的基因，随机选取部分克隆进行测序，结果在GenBank中作同源性对比分析。结果：成功构建了具有高消减效率的人TCC的cDNA消减文库，从文库的376个阳性克隆中随机选取100个克隆扩增、筛选后得到89条200～900bp的差异表达基因片段，测序后发现5条未知新基因片段和41种已知基因。结论：利用SSJ和Dot blot研究膀胱癌差异表达基因，为大批量筛选和克隆其差异表达的基因提供了行之有效的方法，也为研究基因功能和TCC的发生机制奠定了基础。