异丙肾上腺素对人胃癌细胞株凋亡的影响

目的研究异丙肾上腺素(ISO)对人胃癌细胞株(NKM45细胞)凋亡的影响。方法把NKM45细胞置含不同浓度(15,30,60μmol/L)ISO的培养液中培养24h。用TUNEL试验检测凋亡率。用免疫组化技术检测Bcl2和P53基因的表达。结果ISO显著地增加NKM45细胞的凋亡率(P<0.01),并随ISO浓度的增高而增高。Bcl2和P53的表达随ISO浓度的降低而降低(P<0.01)。NKM45细胞凋亡率与Bcl2和P53的表达密切相关(r=-0.93,P<0.01和r=-0.99,P<0.01)。结论ISO可促进NKM45细胞凋亡。NKM45细胞凋亡与Bcl2和P53表达减少相关。     

用白细胞粘附抑制法鉴定HBV—TF特异免疫活性

选用白细胞粘附抑制试验来鉴定乙肝特异性转移因子(HBV-TF)免疫活性。实验结果表明:经HBV-TF致敏的淋巴细胞与乙肝抗原(HBV-Ag)孵育后,显示出明显的粘附抑制活性,而非特异性转移因子(TFn)致敏淋巴细胞与乙肝抗原孵育、HBV-TF致敏淋巴细胞与甲肝抗原(HAV-Ag)孵育或HBV-TF致敏淋巴细胞与1640液(代替抗原液)孵育时均不能表现出这种抑制作用,说明HBV-TF具有抗原特异性免疫活性。实验证明,本法是体外鉴定HBV-TF免疫活性简便易行的方法。     

头颈部肿瘤多瘤抑制基因p16表达研究

目的探讨多瘤抑癌基因蛋白p16表达与原发性和继发性头颈部肿瘤生物学行为之间的关系。方法通过细针吸取及术中印片细胞学诊断病例获取标本,进行免疫细胞化学技术分析,检测220例头颈部良、恶性肿瘤及其他病变中p16蛋白表达水平,并对头颈部肿瘤组织学类型、分化程度的关系进行分析研究。结果 p16蛋白在头颈部良性病变的阳性表达率为84.63%,明显高于恶性肿瘤的表达率53.90%,差异有显著性(P0.05)。p16蛋白表达与恶性肿瘤的细胞分化程度有关,高分化肿瘤其表达水平明显高于低分化肿瘤,同时显示p16蛋白表达程度与头颈部肿瘤大小及有无转移均无明显关联。结论多瘤抑癌基因蛋白p16参与了肿瘤的发生及分化,检测p16蛋白表达水平,可能成为肿瘤诊断和预测预后的一项新指标。     

蛔虫体腔液对肿瘤细胞的细胞毒作用

目的观察蛔虫体腔液（ascaris body fluid，ABF）对小鼠黑色素瘤细胞（B16）、小鼠宫颈癌细胞（U14）和小鼠腹水瘤细胞（S180）的细胞毒作用及其与浓度的关系。方法用6种不同浓度的ABF对B16细胞、U14细胞和S180细胞进行作用，采用四氮唑盐酶还原法（Microculture tetrazolium test，MTT）观察其细胞毒性。结果在一定浓度范围内蛔虫体腔液对上述三种肿瘤细胞均产生细胞毒作用。当浓度为1600mg／ml时，对S180细胞的细胞毒性为57.4％；对B16细胞的细胞毒性达59．6％；对U14细胞的细胞毒性达63．2％．表现出极显著的细胞毒作用。结论在一定浓度范围内蛔虫体腔液对肿瘤细胞有明显的细胞毒作用．且与浓度有依赖关系。     

蛔虫感染期幼虫提取液对人肺上皮细胞的细胞毒作用

蛔虫是危害地域最广、感染人数最多的病原生物之一 ,全球蛔虫感染者约 14亿 ,我国感染人数近全国人口的一半 ,遍及各省[1] 。蛔虫感染可造成变态反应、肠功能障碍等 ,并可引起严重并发症。本研究利用人蛔虫感染期幼虫提取液 ,对体外培养的人肺上皮细胞 (A549细胞 )进行干预 ,观察其对A549细胞的细胞毒性作用及其与浓度的关系 ,探讨蛔虫感染引起宿主病变的发病机制。1　材料与方法1.1　标本来源　对江西省新建县农村社区小学生用双羟萘酸噻嘧啶驱虫 ,获取雌性成虫 ,解剖子宫收集受精蛔虫卵。A549细胞购自中国科学院上海细胞生物学研究所。1…     

雷公藤内酯醇对耐顺铂人卵巢癌细胞株COC_1/DDP增殖和凋亡的影响

目的观察雷公藤内酯醇（TP）对耐顺铂（DDP）人卵巢癌细胞株COC1/DDP细胞增殖和凋亡的影响。方法用10ng/ml TP（TP组）培养COC1/DDP细胞24、48、72 h,每组设3个复孔及3个对照孔。采MTT法检测两组细胞的细胞增殖抑制率。用透射电镜观察培养24 hTP组细胞的凋亡形态,用DNA电泳分析细胞DNA凋亡状况。结果 TP组COC1/DDP细胞增殖抑制率且呈时间依赖性提高（P均〈0.05）。作用24 h后,透射电镜观察可见TP组COC1/DDP细胞表面微绒毛消失,细胞核固缩、染色质凝集成新月状,有凋亡小体形成。DNA电泳可见TP组DNA断裂形成＂梯形＂条带。结论 10 ng/ml TP对COC1/DDP细胞有明显的抑制增殖和促凋亡作用。     

前列腺癌细胞的原代和传代培养的研究

目的探讨前列腺癌细胞的培养方法,以便建立前列腺癌细胞系,为前列腺癌的基础研究提供实验模型.方法前列腺腺癌组织来源于我院两例患者的手术标本,分别采用组织块培养法、消化培养法和裸鼠肿瘤移植动物模型法对癌组织细胞进行体外分离培养.培养细胞按恶性肿瘤连续细胞系建系标准进行各项指标检测.结果组织块培养法有一例已稳定传为13代,消化培养法有一例已稳定传为23代,裸鼠肿瘤移植动物模型法未见癌肿生长.结论组织块培养法和消化培养法均为前列腺癌细胞培养的可行方法.     

蛔虫粗抗原对人肺腺癌细胞凋亡中白细胞介素6和转化生长因子β分泌的影响

目的探讨蛔虫粗抗原对人肺腺癌细胞株(A549)凋亡,以及白细胞介素(IL-6)和转化生长因子β(TGF-β)分泌的影响。方法收集新鲜蛔虫虫体,制备蛔虫粗抗原。将A549细胞分别与低、中、高浓度的蛔虫粗抗原(蛋白浓度分别为25、125和500μg/ml)共培养,即低浓度组、中浓度组和高浓度组,同时设A549细胞+培养液的阴性对照组和阿霉素阳性对照组。用流式细胞术、ELISA和实时定量PCR(q PCR)分别检测作用1、18和24 h后A549细胞凋亡率和细胞周期,以及IL-6和TGF-β细胞因子水平和m RNA水平。结果 3个浓度的蛔虫粗抗原作用于细胞1、18和24 h后,细胞凋亡率均显著高于同时间点的阴性对照组(P0.01)。其中,中浓度组作用18 h后细胞凋亡率最高,为(47.10±3.68)%。细胞周期检测结果显示,中浓度组作用18 h后,G0/G1期细胞比例升高,S期细胞比例下降,与阴性对照组间差异有统计学意义(P0.01)。ELISA检测结果显示,相同作用时间下,A549细胞IL-6水平大多随蛔虫粗抗原作用浓度的增加而升高,TGF-β水平随着蛔虫粗抗原浓度和作用时间的不同,无明显的变化趋势。q PCR结果显示,中浓度组A549细胞的IL-6和TGF-βm RNA水平在作用18 h后达到最高,分别为5.95±0.31和3.43±0.35,且显著高于阴性对照组(P0.01)。结论蛔虫粗抗原可诱导A549细胞凋亡,并将细胞阻滞在G0/G1期,其调节过程可能有IL-6和TGF-β的参与。     

骨髓基质细胞移植对大鼠局灶性脑缺血区血运重建的作用

作为较理想的细胞移植治疗的种子细胞来源,骨髓基质细胞(BMSC)日益受到重视。有研究证实给大鼠心肌缺血区进行自体骨髓细胞移植能促进新生血管的形成。本研究初步观察了经颈动脉移植的BMSC在脑缺血区中的分布及对缺血区新生血管形成的影响。 一、材料与方法 1.复制局灶性脑缺血模型:雄性SD大鼠,体重250～300 g,参照文献[2]以线栓法复制局灶性脑缺血模型。 2.5-溴脱氧尿嘧陡(BrdU)标记的骨     

发光法分析莪术油等中药对肝、胃癌细胞增殖活性抑制作用的实验研究

目的：探讨抗癌中药莪术油、华蟾素、龙葵碱与肝癌细胞株SMMC7721、胃癌细胞株NKM45增殖活性的抑制作用。方法：应用生物发光法（BLA法）测定莪术油、华蟾素和龙葵碱与SMMC7721、NKM45作用后的ATP含量，并与5-氟脲嘧啶（5-FU）的作用进行比较，分析莪术油对NKM45生长曲线的影响。结果：莪术油等三种中药与SMMC7721、NKM45作用后的ATP含量明显下降（P〈0．05～P〈0．01）；与5-FL作用后的ATP含量比较，无明显差异（P〉0．05）莪术油对NKM45的存活率有明显的抑制作用。结论：莪术油等中药能够抑制SMMC7721、NKM45细胞的增殖活性BLA法可广泛应用于抗肿瘤药物的筛选。