红核妇洁洗液抗炎、止痒及抗菌作用研究

目的观察红核妇洁洗液的抗炎、止痒及抗菌作用。方法通过二甲苯致小鼠耳廓肿胀、醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性、小鼠皮下琼脂肉芽肿、豚鼠磷酸组胺致痒阈实验及白色假丝酵母菌感染兔阴道炎模型,观察红核妇洁洗液抗炎、止痒及抗菌作用。结果红核妇洁洗液能够显著抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀(P<0.01),显著降低小鼠腹腔毛细血管通透性(P<0.01),抑制小鼠琼脂肉芽肿的形成(其中高、中剂量组P<0.01),提高豚鼠的致痒阈(P<0.01);并对兔霉菌性阴道炎具有显著的治疗作用。结论红核妇洁洗液具有显著的抗炎、止痒及抗菌作用。     

非诺贝特对TNF-α诱导的人脐静脉内皮细胞CD40表达和基质金属蛋白酶活性的抑制作用

目的研究非诺贝特对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)CD40表达和基质金属蛋白酶(MMP)活性的作用。方法应用RT-PCR和流式细胞仪分别检测非诺贝特对TNF-α诱导的HUVECs的CD40mRNA和细胞表面CD40表达的影响;用明胶酶谱法测定TNF-α对HUVECs的MMP-2、MMP-9活性的影响以及非诺贝特对它们的作用。结果非诺贝特在5×10-5,1×10-4和2×10-4mol/L的浓度范围内能显著降低CD40mRNA和细胞表面CD40的表达(P<0.01),以1×10-4mol/L的非诺贝特的效果最为明显;浓度为2×10-4mol/L时,非诺贝特并没有进一步降低CD40mRNA和细胞表面CD40的表达。非诺贝特能抑制TNF-α诱导的HUVECs中MMP-2和MMP-9活性的增加。结论非诺贝特能降低TNF-α诱导的HUVECs的CD40表达,并且能抑制TNF-α诱导的HUVECs中MMP-2和MMP-9活性的增加。     

丹参酮ⅡA对过氧化氢损伤人血管内皮细胞的保护作用

目的:研究丹参酮ⅡA对过氧化氢(H2O2)损伤人脐静脉血管内皮细胞株(CRL-1730)的保护作用。方法:H2O2诱导人血管内皮细胞损伤,用四甲基偶氮唑蓝比色法检测细胞存活数量,用比色法测细胞培养液中过氧化物丙二醛(MDA)含量及乳酸脱氢酶(LDH)的活性,并对细胞进行流式细胞仪测定,观察丹参酮ⅡA对细胞周期的影响。结果:丹参酮ⅡA对H2O2损伤的CRL-1730具有保护作用,它能抑制H2O2引起的血管内皮细胞减少,其作用主要是使S期和G2M期细胞比率剂量依赖性增加,G0/G1期细胞比率剂量依赖性减少,还能抑制过氧化氢损伤的CRL-1730释放MDA和LDH。结论:丹参酮ⅡA具有减轻H2O2损伤,保护血管内皮细胞的作用。     

用CD40高表达细胞膜色谱模型筛选抗动脉粥样硬化中药的活性成分

目的：细胞膜色谱（Cell Membrane Chromatograph。CMC）技术是一种研究药物与靶体（包括受体）相互作用的亲和色谱分析技术。它是将活性细胞膜固定在特定载体表面,制备成细胞膜固定相（CMSP）,用液相色谱的方法研究药物或化合物与固定相上细胞膜及膜受体的相互作用。所以特别适用于中药药物有效部位及活性成分的筛选。但是CMC法使用的自然生物膜中存在多种活性蛋白,化合物可能与多种受体或通道蛋白结合,所以缺乏特异性、靶向性。而CD40-CD40L是As疾病相关基因,阻断CD40-CD40L炎症信号通路为抗As药物作用靶点,因此建立CD40高表达的CMC模型,其方法更具有应用价值。我们建立了CD40高表达细胞膜色谱模型,对经典抗As中药丹参进行特异性、靶向性筛选,以期发现其活性抗动脉粥样硬化成分。从而为中药筛选提供了方法和途径,为中药现代化提供了新思路。方法：构建CD40高表达的内皮细胞（ECV-304）,制备细胞膜固定相,应用CD40高表达的内皮细胞膜色谱模型筛选丹参中抗动脉粥样硬化的有效成分。     

用CD40高表达细胞膜色谱模型筛选丹参中抗动脉粥样硬化的活性成分

目的：用CD40高表达细胞膜色谱模型筛选抗动脉粥样硬化中药丹参的有效成分。方法：构建CD40高表达的内皮细胞（ECV-304），制备细胞膜固定相，应用CD40高表达的内皮细胞膜色谱模型筛选丹参中抗动脉粥样硬化的有效成分。结果：丹参酯溶性和水提取部位均存在对CD40高表达细胞膜的亲和作用，而由丹参酯溶性和水提取部位中分离得到的成分丹参酮ⅡA、丹参酮ⅠA和丹参素则是其有效成分。结论：CD40高表达细胞膜色谱模型可用于抗动脉粥样硬化药物的筛选。     

川芎嗪对缺氧缺糖状态下培养的血管内皮细胞ECV-304的影响

目的 :观察缺氧缺糖条件下血管内皮细胞 (ECV-30 4 )释放乳酸脱氢酶 (LDH)、一氧化氮 (NO)、丙二醛(MDA)水平和细胞膜流动性的变化及川芎嗪对它们的影响。方法 :缺氧缺糖诱导血管内皮细胞损伤 ,自动生化分析仪测定培养液和细胞层中LDH活性 ;用比色法测定细胞培养液中NO水平 ;用荧光法检测细胞内脂质过氧化产物MDA以评价脂质过氧化程度 ;荧光偏振法测定内皮细胞膜流动性。结果 :缺氧缺糖引起的血管内皮细胞LDH释放增加、MDA生成增多和膜流动性增高 ,NO水平降低。而川芎嗪可抑制缺氧缺糖引起的血管内皮细胞释放LDH ,MDA生成和降低细胞膜流动性 ,提高NO水平。结论 :川芎嗪可保护缺氧缺糖诱导血管内皮细胞的损伤 ,其作用机制有待进一步研究。     

组蛋白去乙酰化酶3在心血管疾病中的研究进展

组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylases,HDACs)是表观遗传的一种修饰酶,其与染色质结构和基因转录调控密切相关。HDAC3属于第Ⅰ类组蛋白去乙酰化酶,研究报道HDAC3在心脏发育过程中起着关键的作用,最新研究发现HDAC3在心血管疾病中发挥着重要的调控作用。本文主要围绕Ⅰ类组蛋白去乙酰化酶家族中的HDAC3,综述其定位和酶活性与先天性心脏病、冠心病、心肌疾病、心力衰竭、心律失常的关系,为心血管疾病临床治疗提供新的药物靶点。     

人CD40分子基因转染人脐静脉内皮细胞ECV-304

目的 构建人CD40的真核表达载体，建立持续、稳定高表达CD40的人脐静脉内皮细胞ECV-304。方法 将含有CD40的克隆载体pUCD40酶切后，再克隆到真核表达载体pCDNA3．1中，构建重组质粒pCDNA3．1（＋）／CD40，并对重组质粒进行酶切鉴定。然后用脂质体法将重组质粒转染ECV-304，G418筛选转染的细胞。RT-PCR、Western-blotting和流式细胞仪定性定量检测转染后的ECV-304的CD40的表达情况。结果 经酶切鉴定，重组体中已插入目的基因片段CD40。RT-PCR和Western-blotting证实，重组质粒转染的ECV-304中有CD40基因的表达，流式细胞仪检测转染后的ECV-304的CD40的表达率为95％。结论 成功构建了真核表达载体pCDNA3．1（＋）／CD40．并建立了高表达CD40的ECV-304，为筛选抗动脉粥样硬化药物奠定了基础.     

康妇炎胶囊对盆腔炎性疾病后遗症模型大鼠免疫功能的影响

目的观察康妇炎胶囊对盆腔炎性疾病后遗症模型大鼠免疫功能的影响,探讨其治疗盆腔炎性疾病后遗症的机制。方法将大鼠分正常对照组、假手术组、模型组、康妇炎胶囊大中小剂量组,以混合细菌加机械损伤法成功复制大鼠盆腔炎性疾病后遗症模型后,分别灌服蒸馏水及不同剂量康妇炎胶囊20 d,观察各组大鼠免疫指标变化。结果康妇炎胶囊可显著调节模型大鼠免疫指标的表达(P0.05)。结论康妇炎胶囊治疗盆腔炎性疾病作用机制可能与其参与免疫调节有关。