燃煤型氟中毒对仔鼠氟斑牙和氧化应激的影响

摘要:目的 探讨燃煤型氟中毒对仔鼠氟斑牙发生和氧化应激的影响。方法 模拟病区燃煤方式,复制高氟空气环境,疫区煤烘玉米制作含氟饲料。48只SD大鼠按雌雄比例2:1随机分为4组,即高氟空气饲养室内分别给予饲料氟含量40mg/kg(高氟组)、25mg/kg(中氟组)、10mg/kg(低氟组)和阴性对照组。饲养8周后合笼交配。仔鼠出生后21天(哺乳期)观察下切牙氟斑牙发生情况,并检测血清中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物(GSH-Px)活性。结果 出生后21天,高氟组、中氟组仔鼠下切牙釉质出现棕白相间横纹等典型氟斑牙症状。与对照组相比,各实验组仔鼠血清中MDA含量升高(F=796.229,P<0.001),SOD、CAT活性降低(F=119.315、 P<0.001;F=133.670,P<0.001),且随着亲代染氟剂量的增加呈加重趋势;GSH-Px活性变化无统计学意义(F=1.666,P=0.188)。结论 亲代大鼠摄入燃煤来源过量氟可以导致仔鼠氟斑牙的发生和血清氧化-抗氧化系统失衡,氧化应激在氟斑牙发生过程中可能起重要作用。     

胰岛细胞凋亡相关因子p21ras、c-fos、TGF-β检测及其意义

目的检测人胎成纤维细胞、胰岛细胞p21ras、TGF-β1、c-fos在不同时期的表达,进一步探讨胰岛细胞凋亡机制.方法 SABC法免疫组化法检测TGF-β1、c-fos,半定量RT-PCR检测不同生长期细胞p21ras表达.结果 p21ras表达成纤维细胞指数生长期强于潜伏期,停滞期最弱;胰岛细胞各生长时期均弱表达,无明显差别.TGF-β1在胰岛细胞停滞期表达强于潜伏期,指数生长期表达最弱,在胰岛细胞各生长期表达分别强于成纤维细胞各生长期.c-fos在胰岛细胞、成纤维细胞停滞期表达,在其他期不表达.结论细胞正常生长过程中,Ras可刺激成纤维细胞生长,Ras在胰岛细胞可能是Ras诱导凋亡通路未被过度激活,不发挥诱导细胞凋亡的作用.c-fos的表达可能是细胞凋亡的共同环节,并无细胞特异性.c-fos蛋白的表达对凋亡的启动可能是必须的,直接影响着细胞的生死存亡.     

嵌合基因gtfB-ctxB在防龋用转基因生菜的遗传稳定性研究

目的研究防龋用转基因生菜后代植株中外源嵌合基因gtfB-ctxB的遗传稳定性。方法种植T3、T4代外源嵌合基因gtfB-ctxB生菜植株64株、25株,分别在植株幼苗期、开花期、种子成熟期采集叶片、花、茎、种子等不同部位,采用PCR技术检测外源基因gtfB-ctxB,比较T_2~T_4连续世代转基因生菜的阳性率。结果 T_3、T_4代转基因生菜阳性植株分别为40株、15株,PCR阳性率分别为62.5%和60.0%。幼苗期、开花期、种子成熟期植株不同部位(叶片、花、茎、种子)的PCR阳性率检测结果一致。结论嵌合基因gtfB-ctxB能够在防龋用转基因生菜后代植株中稳定遗传。     

转基因番茄防龋疫苗中外源目的基因拷贝数的检测

目的：采用SYBR Green实时荧光定量 PCR方法检测转基因番茄防龋疫苗中外源目的基因的拷贝数。方法：用本课题组前期构建的重组质粒pEAC10、pEPC10作为标准品,SYBR Green实时荧光定量PCR法对含外源目的基因pacA-ctxB、pacP-ctxB的转基因番茄植株总基因组样本重复检测,取平均值作为目的基因拷贝数。结果：含pacA-ctxB转基因番茄植株外源目的基因的拷贝数为1.3,含pacP-ctxB转基因番茄植株外源目的基因的拷贝数为3.2。结论：构建的转基因番茄植株属低拷贝转基因植物,具有较好的稳定性。     

人胎胰岛细胞的分离培养及其意义

目的 初步探索人胎胰岛细胞的分离培养方法,以期深入研究胰岛细胞的凋亡机制及开展人胰岛细胞移植。方法 采用机械分离、体外胶原酶消化,并通过组织块联合培养、转皿、时间消化差法获取人胎胰岛细胞,观察胰岛细胞生长及开展人胰岛素释放情况。结果 双硫腙（Dithizone）染色显示胰岛纯度约80％～90％,细胞培养至7～9d为其对数生长期,培养至11d可测到胰岛素释放高峰,培养至15d仍具有一定的生物活性。结论 机械分离消化、转皿、时间消化差法可获得生物活性较好的胰岛细胞,为深入探讨胰岛细胞凋亡、胰岛细胞移植提供细胞基础。     

胰岛移植供源的研究现状

1902年Ssobolew等已建议采用胰岛移植来治疗糖尿病，但胰岛移植技术一直未能在临床得到广泛应用，即便是胰腺移植，也仅是作为有长期糖尿病史的肾衰终末期患者进行。肾移植时的联合手术。自1970年Younoszai等开展胰岛移植研究并取得较好的效果以来，临床胰岛移植已得到长足发展，胰岛移植亦被广泛应用于临床”。本文根据其移植物来源不同分别进行综述。     

肺泡表面活性物质联合NCPAP治疗新生儿肺透明膜病疗效观察

目的探讨肺泡表面活性物质联合经鼻持续正压通气（NCPAP）治疗新生儿肺透明膜病的疗效及临床价值。方法对我院2011年1月-2013年6月收治的新生儿肺透明膜病患儿（Ⅰ~Ⅲ级）26例,应用肺泡表面活性物质联合NCPAP治疗,观察患儿治疗前后的临床症状、血气分析结果、X线胸片改善情况及并发症发生率,分析其疗效。结果联合NCPAP治疗新生儿肺透明膜病后,其临床症状、血气指标、X线胸片明显改善,并发症少,减少机械通气的概率,治愈率为92.3%。结论 肺泡表面活性物质联合NCPAP治疗新生儿肺透明膜病疗效肯定,提高了早产儿抢救成功率,且方法简单,无创伤,并发症少,预后良好,值得临床推广应用。     

密钙息治疗骨质疏松症43例观察

目的 观察密钙息治疗骨质疏松疼痛的疗效及骨密度变化。方法 肌注密钙息治疗骨质疏松患者43例3个月，观察疼痛改善及骨密度变化情况。结果 比治疗前有效控制疼痛。总有效率91．07％；治疗前后骨密度无显著差异。结论 密钙息可有效改善骨质疏松疼痛。     

胰岛细胞凋亡相关因子p21ras、c-fos、TGF-β检测及其意义

目的 检测人胎成纤维细胞、胰岛细胞p21ras、TGF-β1、c—fos在不同时期的表达，进一步探讨胰岛细胞凋亡机制。方法 SABC法免疫组化法检测TGF-β1、c—fos，半定量RT—PCR检测不同生长期细胞p21ras表达。结果 p21ras表达成纤维细胞指数生长期强于潜伏期，停滞期最弱；胰岛细胞各生长时期均弱表达，无明显差别。TGF-β1在胰岛细胞停滞期表达强于潜伏期，指数生长期表达最弱，在胰岛细胞各生长期表达分别强于成纤维细胞各生长期。c—fos在胰岛细胞、成纤维细胞停滞期表达，在其他期不表达。结论 细胞正常生长过程中，Ras可刺激成纤维细胞生长，Ras在胰岛细胞可能是Ras诱导凋亡通路未被过度激活，不发挥诱导细胞凋亡的作用。c—fos的表达可能是细胞凋亡的共同环节，并无细胞特异性。c—fos蛋白的表达对凋亡的启动可能是必须的，直接影响着细胞的生死存亡。