乙肝病毒HBx蛋白具有激活胞浆Ras蛋白及胞核转录因子的双重特性

研究表明,HBV的HBx蛋白可凭藉广泛的病毒和细胞调节元件反式激活基因的表达。HBx蛋白能在体内激活Ras蛋白形成Ras-GTP复合物,迅速诱发Ras-Raf-MAP激酶胞浆信号转导的级联反应,导致细胞复制增加及转录因子AP-1和NF-κB的反式活化。另外,HBx蛋白还可直接与转录复合体的核因子相互作用激活转录。 利用激光共焦扫描免疫显微镜及遗传学方法,     

人类剪接因子ASF/SF2及SC35具有不同的、重要功能的RNA结合特性

高等真核细胞前体mRNA的剪接需要某些辅因子的参与,其中包括高度保守的SR核蛋白家庭。SR蛋白家族成员ASF/SF2及SC35蛋白质涉及体外前体mRNA剪接位点的选择,但尚不清楚它们是否具有不同的RNA结合特性。如有,这种差异是否影响其与前体mRNA的相互作用? 作者以含ASF/SF2或SC35蛋白质RNA结合     

血管紧张素转换酶基因多态性与冠心病关系的研究

目的 :研究血管紧张素转换酶 (ACE)基因多态性与冠心病的关系。方法 :应用聚合酶链式反应 (PCR)检测ACE基因第 16内含子I/D多态性 ,并计算基因型和等位基因频率。结果 :在 5 1例冠心病组中ACE基因DD基因型和D等位基因频率分别是 35 %和 6 1% ,83例正常对照组中的ACE基因DD基因型和D等位基因频率分别是 16 %和 45 % ,两者相比具有显著性差异。结论 :ACE基因DD基因型可能是冠心病发生发展过程中重要的危险因素之一。     

HL—60细胞内同源盒HOXA、cDNA基因的克隆

目的：研究同源盒ＨＯＸ基因的表达在ＡＴＲＡ诱导白血病细胞分化中的作用方法：利用我们建立的一种高效、简单的ｃＤＮＡ克隆方法－ＨＯＸ家诞基因指纹图技术,克隆ＨＬ－６０细胞内的ＨＯＸ ｃＤＮＡ基因。采用半定量ＲＴ－ＰＣＲ技术初步探讨ＡＴＲＡ对所克隆的ＨＯＸ基因表达的影响。结果：筛选出一个在ＨＬ－６０细胞内有表达的同源盒基因－ＨＯＸＡ１基因ｃＤＮＡ片段。初步研究证实,此基因的ｍＲＮＡ水平在ＡＴＲＡ的作用下     

RT-PCR检测慢性粒细胞白血病患者骨髓细胞集落bcr/abl mRNA的表达

采用ＲＴＰＣＲ 技术对ＣＭＬ 患者骨髓细胞１４ ｄ 的细胞集落群和部分１４ ｄ 或２８ ｄ 的单个细胞集落ｂｃｒ／ａｂｌ ｍ ＲＮＡ 表达进行分析。结果显示：所检测的骨髓细胞集落ｂｃｒ／ａｂｌ 基因的表达均呈阳性,即为ＣＭＬ 集落,与细胞遗传学分析结果一致。该方法为研究ＣＭＬ 造血前体细胞基因表达及其诊断、治疗监测提供了灵敏、有效的分析手段;并可作为研究ＣＭＬ 发病、治疗及筛选抗ＣＭＬ 药物较为理想的方法。     

扩大显微镜下细菌图片的灰度分布范围——基于 MATLAB直方图增强方法

目的 在图像工程中，图像增强方法有多种，如增强对比度和动态范围压缩等等。该类处理方法比较灵活方便，处理效果也不错，但对于某些灰度分布很密集或对比度很弱的图像，虽然也能起到一定的增强效果但并不明显。方法对于该情况就可以采用灰度直方图变换方法将原始图像（细菌图片）密集的灰度分布变得比较稀疏。结果 拉大图像的对比度并在视觉上达到明显增强的效果。结论 使一些原本不易观察到的细节能变得清晰可辨。     

载端粒酶反义核酸PLGA纳米粒的表征及生物学效应

目的 检测载端粒酶反义核酸聚乳酸-乙醇酸共聚物（PLGA）纳米粒的表征及生物学效应。分析其粒径范围、载药量及生物相容性。方法 以激光粒度分析仪测定纳米粒的粒径分布及平均粒径，紫外分光光度法测定反义核酸装载量，双室扩散法研究纳米粒的体外释药特性，核酸酶解法检测纳米粒对反义核酸的保护作用，MTT法研究纳米粒的细胞毒性。结果 纳米粒的平均粒度为201nm；包封率为67．3％，栽药量为3．66％。纳米粒体外释放开始阶段存在突释期，5d后释放量开始稳定，15d后仍有核酸释放。纳米粒中的核酸在37℃，经核酸酶消化1h后。仍然保持结构的完整、未被降解，而裸核酸在同样条件下30min即被完全降解。纳米粒对细胞的生长抑制与空白对照差异无显著性。结论 制备的端粒酶反义核酸-PLGA纳米粒稳定性、生物相容性好，以PLGA纳米粒作为载体可保护反义核酸免受核酸酶的降解。但PLGA纳米粒的反义端粒酶核酸载药量偏低，需进一步改进制备方法，提高载药量。     

PLGA纳米载体介导的端粒酶反义核酸体外转染率及对肝肿瘤细胞的影响

目的通过以PLGA纳米粒作为端粒酶hTEKT反义核酸的载体，促进反义核酸对肝肿瘤细胞的抑制作用。方法用绿色荧光蛋白报道基因pEGFP—N1表达质粒DNA转染细胞；观测不同转染方法的转染率，TRAP—ELISA法检测端粒酶活性；噻唑蓝（MTT）法测定端粒酶反义核酸对肝肿瘤细胞HepG2的抑制；过氧化物酶的抗荧光素抗体法检测肿瘤细胞凋亡指数。结果裸DNA和磷酸钙的转染效率均不高，分别为18％和24％；脂质体的转染效率为42％，纳米粒的转染效率最高，达61％；以脂质体或PLGA纳米粒为载体介导端粒酶反义核酸处理的肿瘤细胞，其端粒酶活性和生长与空白对照相比明显下降（P〈0．05），两种载体之间的差异也非常显著（P〈0．05）；处理72h后，纳米粒介导组的肿瘤细胞凋亡率显著高于脂质体介导组，分别为23．1％和16．4％。结论PLGA纳米粒是一种非常有前途的非病毒基因治疗载体。     

酶偶联速率法检测血清血管紧张素转换酶

血管紧张素转换酶 (ａｎｇｉｏｎｓｉｎｃｏｎｖｅｒｔｉｏｎｅｎｚｙｍｅ .ＡＣＥ .Ｐｅｐｔｉｄｙｌｄｉｐｅｐｔｉｄａｓｅ ;ＥＣ3.4 .15 .1)也叫激肽酶Ⅱ ,是一种构成血管内皮细胞的膜性糖蛋白 ,属于内皮细胞的外分泌酶 ,在血管紧张素Ⅱ的产生及缓激肽的分解代谢中均起到关键作用。近年来由于几项研究显示出ＡＣＥ、ＡＣＥ基因可能参与了心血管疾病的发生而引起人们对此酶的重视 ,因此建立一种灵敏、准确的检测方法将会对心血管疾病的研究及临床应用均有重要价值。另外 ,随着一类抗高血压新药—ＡＣＥ抑制剂开始在临床上的应用 ,测定血…     

活化的人P53蛋白对核DNA复制的一种直接效应

P53蛋白是一种转录的激活物和阻遏物,但新近的证据表明,P53蛋白的某些生物学功能与转录过程无关。为了解P53是否直接影响核DNA的复制,将纯化的重组人类全长野生型(wt)P53蛋白和C末端缺乏30个氨基酸的P53Δ30重组蛋白,分别加入到含精子染色质的非洲爪蟾卵细胞抽提物内。通过[α-~(32)P]αATP的掺入量的测定发现,在不转录