乙肝病毒携带者不育男性精液质量分析

目的:分析携带乙肝病毒(HBV)的不育男性的精液质量,探讨HBV感染对男性精液质量的影响。方法:选择2018年门诊初诊的782例不育男性,年龄25~35岁,根据HBV感染情况分为小三阳组(血清学检查乙肝表面抗原、e抗体、核心抗体阳性,n=286)和大三阳组(血清学检查乙肝表面抗原、e抗原、核心抗体阳性,n=230),以未感染者作为对照组(n=266),对上述3组进行精液常规、精子顶体酶活性及精子染色质结构分析,比较3组结果是否有差异。结果:①小三阳组精子浓度[(71.49±60.03)×10^6/ml]、前向运动精子百分率[(30.70±14.79)%]、精子活率[(42.67±17.23)%]、精子存活率[(81.07±10.19)%]、正常形态精子百分率[(5.72±3.47)%]均低于大三阳组[(88.20±82.62)×10^6/ml、(34.88±15.60)%、(45.77±16.58)%、(82.55±7.55)%、(6.93±4.45)%]和对照组[(89.29±53.80)×10^6/ml、(37.82±13.63)%、(48.16±14.03)%、(85.26±6.39)%、(7.27±4.43)%],除精子存活率以外差异均有统计学意义(P<0.05);大三阳组精子浓度、前向运动精子百分率、精子活率、精子存活率、正常形态精子百分率均低于对照组,其中前向运动精子百分率、精子存活率的差异有统计学意义(P<0.05);②小三阳组的精子顶体酶活性[(57.07±26.38)μIU/10^6精子]显著低于大三阳组[(63.03±28.75)μIU/10^6精子,P<0.05]和对照组[(78.00±33.49)μIU/10^6精子,P<0.01];大三阳组的精子顶体酶活性显著低于对照组(P<0.01);③小三阳组精子DNA碎片指数[DFI,(14.79±9.46)%]和高可染性[HDS,(9.62±6.20)%]均高于大三阳组[(12.95±7.29)%、(8.43±4.72)%]和对照组[(11.60±5.98)%、(8.41±4.59)%],差异有统计学意义(P<0.05);大三阳组的DFI和HDS均高于对照组,仅DFI的差异有统计学意义(P<0.05)。结论:HBV携带者的男性精液质量显著低于未感染者,HBV感染可能是引起男性生育力降低的原因之一。     

不育男性生殖道沙眼衣原体感染对精子核DNA碎片化指数的影响

目的探讨不育男性生殖道沙眼衣原体感染对精子核DNA碎片化指数的影响。方法选择2017年1月至2017年5月在成都市锦江区妇幼保健院生殖医学中心(成都西囡妇科医院)门诊初诊的117例生殖道沙眼衣原体感染的不育男性(感染组)和92例体检正常的男性(对照组),对两组的精液常规参数及精子核DNA完整性(以精子核DNA碎片化指数DFI表示)检测结果进行回顾性分析。结果⑴感染组的精子浓度低于对照组,但差异无统计学意义(P>0.50);感染组的前向运动精子百分比低于对照组,但差异无统计学意义(P>0.20);⑵与对照组相比,感染组的精子DFI值显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论生殖道感染沙眼衣原体的男性不育患者的精子核DNA损伤程度明显高于未感染者。精子核DNA碎片化指数可能是评估男性精液质量的独立指标。     

季节因素对不明原因不育男性精液常规参数的影响

目的探讨季节因素对不明原因不育男性精液常规参数的影响。方法对2015年2月至2016年1月在成都市锦江区妇幼保健院生殖医学中心(成都西囡妇科医院)门诊就诊的720例不明原因不育男性的精液常规检测结果进行回顾性分析,并按照季节分为A组(2~4月,143例)、B组(5~7月,248例)、C组(8~10月,168例)、D组(11~次年1月,161例)。结果⑴四组的精子浓度比较:C组>D组>B组>A组,差异无统计学意义(P>0.05);⑵A组、C组的前向运动精子百分比高于B组、D组,差异有统计学意义(P<0.05);A组、C组的精子活动率高于B组、D组,差异有统计学意义(P<0.05);⑶A组、C组的精子存活率高于B组、D组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论不明原因不育男性的精子浓度不随季节变化而变化,但季节因素影响前向运动精子百分比、精子活动率及存活率,其中春秋两季的前向运动精子百分比、精子活动率及存活率显著高于夏冬两季。     

Changes in human umbilical vein endothelial cells induced by endothelial nitric oxide synthase traffic inducer

This study investigated the changes in human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) induced by overexpression of endothelial nitric oxide synthase traffic inducer (NOSTRIN) and its role in cellular injury. Recombinant NOSTRIN-expressing and empty vectors were transfected into cultured HUVECs, and factor Ⅷ-related antigen was examined by using immunohistochemical analysis. Growth curves were generated for both transfected and untransfected cells and these indicated that the proliferative ability of cells overexpressing NOSTRIN was significantly decreased. The expression of NOSTRIN and eNOS proteins was detected by using Western blot analysis, endothelial NOS (eNOS) activity was assayed by using spectrophotometry, and NO 2 /NO 3 levels were measured using nitrate reductase. Immunohistochemical analysis demonstrated that all groups expressed NOSTRIN in the plasma membrane and cytoplasm, and Western blot analysis confirmed that NOSTRIN levels were significantly higher in cells transfected with the NOSTRIN plasmid (P<0.01). The activity of eNOS and the levels of NO 2 /NO 3 were significantly decreased in NOSTRIN overexpressing cells as compared with empty vector and untransfected cells (P<0.01 and P<0.01, respectively). Morphological and ultrastructural changes were observed under light and electron microscopy, and it was found that NOSTRIN-overexpressing cells were elongated with deformities of the karyotheca, injury to the plasma membrane, increased lipids in the cytoplasm, and shortened microvilli. This study showed that overexpression of NOSTRIN had a significant effect on eNOS activity in HUVECs and resulted in significant cellular damage.     

快速无创性产前诊断唐氏综合征的初步研究

目的建立快速无创性产前诊断唐氏综合征的有效诊断模式。方法从98名孕妇中筛选出12名高度怀疑唐氏妊娠者,当日流式细胞术分选母血中的胎儿有核红细胞（Fetal nucleated red blood cells,FNRBCs）,制备滴片后,次日进行多重引物原位杂交（muti—primed in situ labeling,multi—PRINS）检测胎儿细胞21号、Y染色体。结果均可在两日内得到诊断结论,诊断10例正常胎儿和两例男性唐氏综合征胎儿,与实际胎儿核型完全一致。结论流式分选母血中胎儿有核红细胞后多重PRINS技术检测细胞染色体可作为快速无创性产前诊断的有效模式,并可为其他非整倍体异常和单基因病的快速无创性产前诊断提供有效参考。     

精子顶体酶活性对辅助生殖技术治疗方案选择的影响

目的:探讨精子顶体酶活性对辅助生殖技术治疗方案选择中的影响及其意义。方法:选择2014年~2015年在成都市锦江区妇幼保健院生殖医学中心(成都西囡妇科医院)门诊就诊的2120例不育夫妇的男性,对其进行精液常规分析和精子顶体酶活性检测。根据检测结果分为顶体酶正常组和异常组,比较两组在辅助生殖技术治疗方案选择中的差异。结果:(1)顶体酶活性正常组的精子浓度、前向运动精子百分比、精子活动率与顶体酶活性异常组相比,其差异具有统计学意义(P0.05);(2)顶体酶活性正常组和异常组在辅助生殖技术治疗方案选择中的差异无统计学意义(P0.05);(3)2014年~2015年间,采用辅助生殖技术治疗方案者的精子顶体酶活性下降,其差异具有统计学意义(P0.05)。结论:精子顶体酶活性正常组与异常组之间的精液常规参数存在显著性差异,但是精子顶体酶活性检测对辅助生殖技术治疗方案选择的临床指导意义不明确,精子顶体酶活性异常者也能选择与正常者一致的辅助生殖技术治疗方案;精子顶体酶活性在2年间呈逐年下降趋势,其对辅助生殖技术治疗后受精结局的影响有待进一步研究。     

CR16在特发性无精子症患者睾丸组织中的表达

目的:研究糖皮质激素区域表达基因16(corticosteroids and regional expression 16,CR16)在特发性无精子症患者睾丸组织中的表达,探讨CR16在精子发生中的作用。方法:采用免疫组化法和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测CR16蛋白和CR16 mRNA在48例特发性无精子症患者(病例组)和10例正常生育男性(正常组)睾丸组织中的表达情况。结果:CR16蛋白表达于睾丸生精小管上皮,主要分布在支持细胞与生精细胞连接区,在特发性无精子症患者睾丸组织中的表达显著弱于正常生育男性睾丸组织中的表达。CR16 mRNA在病例组睾丸组织中的表达水平显著低于正常组。结论:特发性无精子症患者睾丸组织中CR16表达水平显著降低,这可能与无精子症相关。     

精子核蛋白组型转换在预测复发性流产中的价值*

摘要:目的探讨精子核蛋白组型转换在 复发性流产中的预测价值。方法选取 2019- 2022 年在本院生殖医学门诊就诊的生育检测指标完整的不孕症夫妇521对,其中男性年龄23~56岁。排除导致复发性流产的因素,包括女性的年龄、体质指数、代谢性疾病、抗磷脂综合征、子宫及附件异常、剖宫产史、宫内肌瘤/宫颈锥切等手术史、男女外周血染色体异常、吸烟/酗酒等不良生活史。根据流产情况分为复发性流产组(自然流产≥2次)、自然流产1次组和未流产组,应用GraphPad6.0统计软件进行Tukey多重比较各组精子核蛋白组型转换的差异;采用Pearson法分析精子核蛋白组型转换与复发性流产的相关性;采用敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、Youden指数和比值比分析精子核蛋白组型转换对复发性流产的预测价值。结果复发性流产组(42例)的精子核蛋白组型转换异常率[ (33.31+13.83)%]显著高于未流产组[( 26.85+15.38)%]和流产1次组[ (28.20+12.50)%,P<0.05]。Pearson 相关分析结果显示,精子核蛋白组型转换异常率与复发性流产呈显著正相关。精子核蛋白组型转换预测复发性流产的敏感性为45.24%.特异性为73.64%。阳性预测值(15.70%)、阴性预测值( 92.53%)、Youden指数(18.88%)及比值比(2.31)均高于高DNA可染色性(HDS)的阳性预测值( 10.64%)、阴性预测值(90.31%)、Youden 指数. ( 1.05%)及比值比(1.11)。结论在复发性流产患者的配偶中,精子核蛋白不成熟度显著升高,且其与复发性流产呈显著正相关。同时精子核蛋白组型转换异常可能是复发性流产的重要男性因素,其对临床中复发性流产的预测价值较高。     

NOSTRIN在无精子症患者睾丸组织中的表达

目的:通过测定无精子症患者睾丸组织中内皮型一氧化氮合酶运输介导物(NOSTRIN)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)的表达,探讨其与无精子症发病的相关性。方法:采用免疫组化法检测17例特发性无精子症患者(病例组)和10例正常男性(正常组)睾丸组织中NOSTRIN的定位和定量表达;RT-PCR检测睾丸组织中NOSTRINmRNA的表达;分光光度法测定睾丸组织中eNOS的活性;应用硝酸还原酶法测定睾丸组织上清液中NO代谢产物亚硝酸基/亚硝基(NO2-/NO3-)水平。结果:NOSTRIN在睾丸组织中表达于生精细胞、支持细胞以及血管内皮细胞,NOSTRIN在特发性无精子症患者睾丸中的表达水平显著低于正常男性;病例组患者睾丸组织中NOSTRINmRNA呈弱表达(0.312±0.076),明显低于正常组(0.793±0.082,P<0.01);病例组患者睾丸组织eNOS活性[(33.727±3.58)U/mg]与正常组[(17.69±3.84)U/mg]比较显著增高(P<0.01);病例组患者睾丸中NO2-/NO3-水平为[(48.56±8.49)μmol/L],与正常组[(25.37±9.61)μmol/L]比较显著升高(P<0.01);病例组睾丸组织中NOSTRIN表达水平与eNOS活性呈负相关(r=-0.57,P<0.01),与NO代谢产物NO2-/NO3-同样呈负相关(r=-0.61,P<0.01)。结论:无精子症患者睾丸组织中NOSTRIN表达水平降低,eNOS活性增强,NO-/NO-水平升高,这可能与无精子症的发生有着相关性。     

1号染色体平衡易位及其断裂点位置与人精液质量的相关性分析

目的：探讨1号染色体平衡易位及其断裂点位置对人精液质量的影响。方法：29例男性经外周血淋巴细胞培养与G-显带核型分析，确诊为1号染色体平衡易位携带者；按照世界卫生组织《人类精液检查与处理实验室手册》进行精液常规分析。结果：大多数携带1号染色体平衡易位的患者精子密度与活力出现异常（25/29，86%）；其中携带p12、p13、q12、q21、q25断裂点的患者精子密度明显降低；携带p13、p32、p34、q12、q21、q25断裂点的患者精子活力明显降低。结论：1号染色体平衡易位可影响精子的密度与活力；精子质量受损的程度与易位断裂点的位置密切相关。对于携带1号染色体平衡易位的男性患者建议可以采用辅助生殖技术结合胚胎植入前遗传学诊断技术阻断染色体易位向下一代的传递。