抗人精浆蛋白McAb的制备及其特性研究

本文报道用杂交瘤技术建立了２株分泌抗人精浆蛋白单克隆抗体的细胞株Ｄ１和Ｃ１２。Ｄ１株分泌的抗体为ＩｇＭ，Ｃ１２株为ＩｇＧ３。这两株均能与正常人精浆和无精子症患者的精浆产生特异性免疫反应。Ｄ１株单抗具有补体依赖性制动人精子的作用，间接免疫荧光试验表明，它能结合到人精子颈部和顶体后区。这充分说明２株单抗是特异性抗人精浆的，Ｄ１是精子制动抗体，其相应的精子抗原属于精子外套抗原成分之一。     

抗人间充质干细胞单克隆抗体的制备及生物学特性研究

目的:制备抗人间充质干细胞(hM SC s)的单克隆抗体,为鉴定、分选hM SC s奠定基础。方法:以多供体hM SC s免疫BALB/C小鼠,采用杂交瘤技术制备单克隆抗体,并以间接免疫荧光法、免疫组织化学法和流式细胞术等检测单克隆抗体在细胞及组织中的表达。结果:建立了5个能分泌抗人间充质干细胞的单克隆抗体杂交瘤细胞株,该组单抗能与人间充质干细胞特异性结合,而对所检测的人间充质和非间充质来源的组织和细胞均未见交叉反应,5个单抗的相对亲和力分别为:ZUB1 1×106、ZUB4 1×105、ZUC 3 1×106、ZUE 12 1×105、ZUF10 1×105;表位分析:ZUB1、ZUE 12、ZUF10针对相同的表位,ZUC 3和ZUB4则分别针对不同的表位。流式细胞分析显示分离培养的hM SC s阳性表达率为ZUB1 87.39%、ZUB4 88.07%、ZUC 3 88.12%、ZUE 12 69.89%和ZUF10 83.67%。结论:5株杂交瘤分泌的单克隆抗体均能与人间充质干细胞发生特异性结合,为深入研究hM SC s的生物学功能奠定了基础。     

桐乡市农村老年人群认知功能状况调查

中国是世界上老年人口数量最多的国家,尤其是长三角地区的人口结构已呈现较为典型的老年型[1]。老年人群的各种生理功能开始逐渐衰退,多种躯体疾病处于高发状态[2];同时由于社会角色的改变,一些负性事件的影响,老年人常产生各种心理问题[3];此外老年人由于躯体衰老和子女独立成家不能照顾等因素,还会导致失落、多疑、角色紊乱和精神困扰等其他心理问题[3];而上述诸多问题在农村老年人群上表现得尤为突出,且农村老年人又有自己的特殊性,如文化程度低、医疗保障水平较低和收入少且不稳定等,因     

含C-src同源序列的酪氨酸磷酸酶SHP-2和SHP-1在前列腺增生组织重构中的表达

目的:探讨含C-src同源序列的酪氨酸磷酸酶SHP-2和SHP-1在前列腺增生组织重构中的表达及意义。方法:采用免疫组化En Vision二步法检测10例正常前列腺组织、30例良性前列腺增生组织(BPH)、20例前列腺上皮内瘤变(PIN)、20例高分化前列腺癌(Pca)和10例低分化前列腺癌组织中SHP-2和SHP-1的表达。结果:SHP-2在正常组中主要表达在基底和上皮细胞的胞浆中,少数在胞核中表达;在BPH组中基底和上皮细胞的胞浆和胞核中均有表达;在PIN、高分化Pca和低分化Pca组中主要在细胞核内表达,少数在胞浆中表达。SHP-2在各组的平均染色指数分别为0.4、1.7、2.1、2.2和2.6。SHP-1在正常前列腺组织,BPH、PIN和高分化Pca的组织细胞的胞浆中均有不同程度表达,在低分化Pca组织中不表达;SHP-1在各组的平均染色指数分别为1.8、1.8、1.5、1.2和0.4。结论:在前列腺组织细胞增殖、分化及转化过程中,存在SHP-1和SHP-2相关的信号传导的改变。SHP-2异常激活和表达部位的改变可能是导致前列腺组织重构、增生及癌变的重要机制。     

淋球菌外膜蛋白Porin I多抗的黏附抑制作用研究

目的:研究兔抗淋球菌外膜蛋白Porin I(P I)的多克隆抗体阻断淋病奈瑟菌对泌尿生殖道上皮的黏附作用。方法:将自行构建表达的淋球菌GST-P I融合蛋白作为抗原免疫新西兰兔,获得兔抗P I蛋白的多抗血清,纯化后得到P I-IgG抗体。建立淋球菌感染BALB/c小鼠模型,并通过观察阴道黏膜改变、分泌物涂片、冲洗液培养及阴道组织病理变化评价兔抗P I-IgG抗体对淋球菌黏附的影响。结果:经1 m g/m l兔抗P I-IgG处理后3 h再接种淋球菌的BALB/c小鼠生殖道黏膜未见红肿及脓液,分泌物涂片及阴道冲洗液未检及淋球菌,阴道组织病理检查也未见炎症细胞浸润。而低于浓度1 m g/m l及长于3 h兔抗P I-IgG处理的小鼠阴道组织病理可检及炎症细胞,但其它检查结果阴性。结论:纯化的抗淋球菌GST-P I融合蛋白的多克隆抗体,能有效抑制淋病奈瑟菌对小鼠泌尿生殖道上皮的黏附与感染,阻断作用及持续时间与抗体浓度有关。     

溶酶体参与蓖麻毒素A链降解途径的研究

目的:研究溶酶体在蓖麻毒素A链(RTA)细胞内转运过程中的作用.方法:用DNA重组技术,将溶酶体的靶向信号肽KFERQ连接在RTA的羧基端;将构建好的重组质粒pKK223.3-RTA和pKK223.3-RTA-KFERQ转化感受态大肠杆菌JM109,经IPTG诱导表达RTA和RTA-KFERQ蛋白;重组蛋白质用Blue-Sepharose6B亲和柱纯化,以MTT法分别测定纯化后的RTA与RTA-KFERQ蛋白对体外培养的HEPG2(人肝癌细胞)、Hela(人宫颈癌细胞)、A549(人肺癌细胞)3种细胞的毒性作用.结果:在大肠杆菌中成功表达了RTA和RTA-KFERQ.与RTA相比较,纯化的重组蛋白在体外有相似的蛋白质合成抑制活性,RTA-KFERQ对HEPG2、Hela和A549细胞的毒性分别减少了约49.87%、54.18%、88.68%.结论:RTA不能完全被溶酶体灭活,RTA可能存在溶酶体外的降解途径.     

氨甲喋呤(MTX)治疗类风湿性关节炎的免疫调节机制

目的：探讨MTX治疗类风湿性关节炎（RA）的免疫学机制，为临床MTX治疗RA提供理论依据。方法：在建立佐剂型关节炎（AA）动物模型基础上，通过关节炎指数评价，血清中细胞因子测定和关节切片的病理学检查，观察MTX对促炎症细胞因子如IL－1β、TNF－α和抗炎症细胞因子IL－4、IL-10的调控作用。结果：MTX预防组和对照组关节炎指数和发病率的变化均无显著差异（P＞0.05)。MTX肌肉注射治疗或外用治疗后，关节炎指数发生较显著的变化与对照组相比有显著性差异（P＜0.05)。对照组与MTX预防组、MTX肌肉注射组、MTX外用组血清中细胞因子水平相比，对照组与各组TNF－α和IL－10的水平有明显差异，P＜0.05，MTX肌肉注射组与MTX外用组的TNF－α水平相差很大，P＜0.05。而IL－1β、IL－4的水平各组之间没有明显差异，P＞0.05。病理组织学变化中炎症程度：对照组＞MTX预防组＞MTX肌肉注射组＞MTX外用组。结论：本研究结果表明，MTX治疗（肌肉注射和外用）可以降低AA大鼠血清中TNF－α浓度，提高IL－10的浓度，从而抑制或控制RA的发生发展。但MTX治疗对IL－1β和IL－4没有明显作用，这方面的机制尚需进一步研究。     

人乳头瘤病毒和磷酸酪氨酸,SHP-2在尖锐湿疣组织重构中的表达研究

目的探讨HPV6/11,16/18,31/33型和酪氨酸磷酸酶2(SHP2)在尖锐湿疣(CA)组织重构中的表达及意义。方法采用原位杂交和免疫组化SP法检测36例CA组织中HPV6/11,16/18,31/33型和磷酸酪氨酸、SHP2的水平及分布,并以正常人皮肤(包皮)10例、宫颈鳞癌13例作为对照。结果CA和宫颈鳞癌组HPV6/11,16/18,31/33型的阳性率分别为80.5%,38.9%,36.1%和69.2%,38.4%,53.8%。CA、宫颈鳞癌与正常包皮组比较均P<0.05。CA和宫颈鳞癌组磷酸酪氨酸和SHP2在胞浆和胞核中的阳性率分别为97.2%,22.2%和100%,0。正常包皮组SHP2在胞浆和胞核中的阳性率为0和80.00%,CA和宫颈鳞癌组在胞浆和胞核中的阳性率比较P<0.05。结论尖锐湿疣和宫颈鳞癌组细胞磷酸酪氨酸和SHP2的表达较正常皮肤组显著增强,提示CA组织重构中存在细胞信息通路的异常激活与HPV感染有关。     

氨甲喋呤(MTX)治疗类风湿性关节炎的免疫调节机制

目的:探讨MTX治疗类风湿性关节炎(RA)的免疫学机制,为临床MTX治疗RA提供理论依据。方法:在建立佐剂型关节炎(AA)动物模型基础上,通过关节炎指数评价,血清中细胞因子测定和关节切片的病理学检查,观察MTX对促炎症细胞因子如IL^-1β、TNF-α和抗炎症细胞因子IL-4、IL-10的调控作用。结果:MTX预防组和对照组关节炎指数和发病率的变化均无显著差异(P>0.05)。MTX肌肉注射治疗或外用治疗后,关节炎指数发生较显著的变化与对照组相比有显著性差异(P>0.05)。对照组与MTX预防组、MTX肌肉注射组、MTX外用组血清中细胞因子水平相比,对照组与各组TNF-α和IL-10的水平有明显差异,P<0.05 ,MTX肌肉注射组与MTX外用组的TNF-α水平相差很大,P>0.05。而IL-1β、IL-4的水平各组之间没有明显差异,P>0.05。病理组织学变化中炎症程度:对照组>MTX预防组>MTX肌肉注射组>MTX外用组。结论:本研究结果表明,MTX治疗(肌肉注射和外用)可以降低AA大鼠血清中TNF-α浓度,提高IL-10的浓度,从而抑制或控制RA的发生发展。但MTX治疗对IL-1β和IL-4没有明显作用,这方面的机制尚需进一步研究。     

35例急性酒精中毒并发症临床分析

急性酒精中毒在临床上较多见,近年来,我国饮酒人数逐年增加,嗜酒者日趋增多,给个人、家庭以及社会造成严重危害[1].从1999年3月～2003年3月我们共收治急性酒精中毒233例,剔除因醉酒导致交通事故、自身伤害等意外性损伤情况外,其中发生急性并发症35例,占15.0%,现报告如下.