STAT1过表达慢病毒载体的构建及其在MHCC97L细胞中的表达

目的：构建STAT1基因过表达慢病毒载体并实现其在人肝癌细胞MHCC97L中的表达。方法：根据人STAT1基因mRNA序列,全基因合成STAT1基因,构建至过表达载体并转化至感受态细胞DH5OC,进行测序验证。在脂质体介导下转染293T细胞,包装生产慢病毒。慢病毒载体转染人肝癌细胞MHCC97L,用荧光定量PCR和Westernblot检测原始细胞株（MHCC97L）,稳转细胞株（MHCC97－statl）中STAT1的表达情况,确定STAT1过表达的有效性。结果：测序证实STAT1基因过表达载体构建成功。过表达慢病毒包装成功。慢病毒转染人肝癌细胞MHCC97L48h后,STAT1基因在mRNA水平和蛋白质水平上表达显著增加。结论：STAT1基因过表达慢病毒载体构建成功,并实现其在人肝癌细胞MHCC97L中的表达。     

人VEGF基因慢病毒介导RNA干扰有效靶点的设计及筛选

目的:设计并筛选人血管内皮生长因子(VEGF)有效RNA干扰片段,构建VEGF慢病毒表达载体。方法:对人VEGF基因编码区分析,筛选序列3条,阴性对照序列l条,通过连接线性化的plenti6.3-MIR载体,构建miRNA慢病毒载体质粒,并转化至感受态细胞DH5α,进行测序验证。在脂质体介导下转染293T细胞,包装生产慢病毒,测定其滴度。慢病毒载体转染人肝癌细胞MHCC97L,用Real-time PCR检测干扰效果。结果:测序证实3个VEGF基因RNAi慢病毒载体质粒构建成功。慢病毒载体经293T细胞包装成功,测定病毒的滴度分别为3.23×109、3.30×109、3.73×109TU/mL。3个慢病毒载体转染人肝癌细胞MHCC97L后,VEGF基因在mRNA水平受到抑制,其中miR-200序列效果最佳,对VEGF基因表达的干扰效率可达72%。结论:成功构建并筛选了人VEGF基因RNAi慢病毒载体及有效靶点,为进一步深入研究VEGF基因与抗肿瘤药物药效关系提供实验基础。     

基于病理学特征探讨肉芽肿小叶性乳腺炎诊断及手术术式

目的:以HE染色及免疫组织化学为途径探讨肉芽肿性小叶性乳腺炎的临床病理特征,并为手术术式选择提供合理依据.方法:对北京中医药大学东直门医院病理诊断为肉芽肿性小叶性乳腺炎患者的病灶及阴性切缘行HE染色及天冬氨酸蛋白水解酶-1(caspase-1)/消皮素-D(gasdermin D,GSDMD)/雌激素受体(estrog...     

托里透脓外治法联合封闭负压引流治疗脓肿期肉芽肿性小叶性乳腺炎的临床研究

目的:探讨托里透脓外治法联合封闭负压引流(VSD)治疗脓肿期肉芽肿性小叶性乳腺炎(GLM)的临床治疗意义。方法:将40例入组患者分为VSD联合托里透脓外治法(观察组)和单用VSD治疗(对照组),观察组患者的住院时间、术后至切口愈合期间的换药次数、切口愈合时间、乳房疼痛情况、超声下脓肿范围变化、创面肉芽组织生长情况、切口纵径变化及治疗前后的血清IgG4~+、CD4~+、CD8~+、RF、C1q水平。结果:与对照组相比,VSD联合托里透脓外治法可明显减少住院时间,降低换药换药次数,缩短切口愈合时间,有效改善乳房疼痛,加速脓肿缩小,改善创面肉芽组织生长,加速切口纵径缩小,降低血清IgG4~+、CD4~+、CD8~+、C1q水平。差异有统计学意义(P0.01)。结论:托里透脓外治法联合VSD治疗成脓期GLM疗效可靠,能明显缩短切口愈合时间,改善乳房炎症预后。     

紫草阳和汤外治联合激素治疗肿块期肉芽肿性乳腺炎的临床疗效及对细胞焦亡蛋白的影响

目的：观察紫草阳和汤外敷联合地塞米松软膏治疗肿块期肉芽肿性小叶性乳腺炎的临床效果及对细胞焦亡相关蛋白的影响。方法：将40例肉芽肿性小叶性乳腺炎患者随机分为观察组20例和对照组20例。两组均给地塞米松软膏治疗，观察组在对照组基础上外敷紫草阳和汤治疗。比较两组乳腺肿块体积变化、乳房疼痛及成脓症状、病理组织学及免疫组织化学、细胞焦亡相关指标表达。结果：治疗后，观察组肿块体积差明显大于对照组，对照组为16.7±21.5，实验组为32.9±27.4，两组差异有统计学意义（P<0.05）；观察组患者的客观缓解率（ORR=85%）明显高于治疗组（ORR=50%,P<0.05）。在成脓率及疼痛程度上，治疗2、3周后观察组乳房疼痛评分明显低于对照组（P<0.05）；观察组成脓率为30%，对照组成脓率为20%，差异无统计学意义（P>0.05）。观察组caspase-1及GSDMD免疫组化表达水平均明显低于对照组（P<0.05）；而在细胞焦亡相关指标表达方面，与对照组比较，观察组GSDMD、caspase-1、NLRP3表达明显降低（P<0.05）。结论：紫草阳和汤外敷联...     

参芪扶正注射液对荷S180小鼠肿瘤细胞凋亡的影响

目的:探讨参芪扶正注射液对荷S₁₈₀小鼠肿瘤细胞凋亡的影响。方法:将23只荷瘤小鼠随机分成4组,分别为对照组、参芪扶正注射液高剂量组(8g·kg^-1组)、中剂量组(4g·kg^-1组)及低剂量组(2g·kg^-1组)。对照组给予生理盐水,ip,1次/d,其他3组ip给于不同剂量的参芪扶正注射液。14d后处死小鼠,采集体重、肿瘤重量数据,流式细胞仪检测肿瘤细胞凋亡率和细胞周期。结果:参芪扶正注射液各剂量组肿瘤重量皆低于对照组,但仅中剂量组与对照组的差异有统计学意义(P<0.05);各剂量组肿瘤细胞凋亡率皆显著高于对照组(P<0.05～P<0.01);各剂量组细胞周期与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:参芪扶正注射液单独应用可以通过促进肿瘤细胞的凋亡而发挥抑制肿瘤的作用。     

基于CiteSpace分析我国中医药领域乳腺癌治疗的研究热点及趋势

目的 利用CiteSpace 5.8软件分析中国中医药领域乳腺癌治疗近20年来的研究热点和趋势,探究其未来发展方向。方法 在中国期刊网数据库(CNKI)中对2000年1月—2022年4月的中医药领域乳腺癌治疗文献进行检索,以“乳腺癌”和“中医药”为主题,导入NoteExpress软件,然后根据纳入和排除标准进行人工检索,以Refworks格式导入CiteSpace 5.8软件,以该软件来可视化分析纳入文献的作者、机构、关键词及其他信息。结果 共收录2207篇论文,文献数量总体呈现出上升趋势,核心作者58人,发文最多的作者为刘胜,作者团队内部合作较稳定,但团队之间合作较少。研究机构主要在中医药类高校,各机构间联系相对紧密,呈现出一定地域性。相关关键词主要为化疗、生活质量、中药、凋亡等,关键词聚类共有95个,前十个聚类涵盖临床试验、动物实验和机制研究以及药物实验,关键词凸现前18个关键词表明,最近的研究热点集中在“免疫功能”“疗效”“自噬”方面。结论 中医药领域乳腺癌治疗的相关研究成果丰富而广泛,研究热点主要集中在中医药应用提高乳腺癌患者的生活质量、提高免疫功能、辅助化疗和细胞凋亡机制。而...     

腹腔镜治疗小肠异物穿孔2例

消化道异物患者临床较常见,而小肠异物导致穿孔者较少见,既往此类患者多采用传统手术剖腹探查、异物取出,创伤大、恢复慢。本院于2010年8月至2011年3月应用腹腔镜技术成功治疗小肠异物穿孔2例,现报告如下。     

十二指肠球部巨大平滑肌肉瘤及术后胰瘘的治疗体会

<正>患者男性,45岁,因胃脘疼痛伴贫血半年入住本院,患者入院前曾去上海、河南多家医院诊治,临床印象"胃十二指肠溃疡"。因血红蛋白仅3.1%,体质甚差而放弃手术治疗。近期因十二指肠溃疡大出血在本院施行急救手术。术中见十二指肠球部后壁约5cm直径的大溃     

氧化亚氮麻醉意外的脑复苏急救体会(附1例中西结合治疗报道)

<正>心肺复苏后脑功能能否复苏,已成为衡量复苏成败的关键。国外根据心脏停搏后的病理变化,制订了心肺脑复苏的"九则"治疗措施,但复苏的成功率仍较低,仅有30%的患者可达到生活自理的程度,其余大部分早期死亡或者以"植物人"的形成名存实亡。因此心脏复苏的根本目的在于脑复苏。近年来,脑复苏已成为复苏研究的重要课题。如何发扬中西结合的优势,开创一条新的治疗途径,提高复