深圳地区女性感染人乳头瘤病毒基因类型分析

目的了解深圳地区各年龄段与不同生殖道疾病女性感染人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)基因类型分布状况,为深圳地区HPV分子流行病学研究提供依据。方法利用反向杂交技术分别对2005年1月~2005年12月来医院就诊的801例可疑患者进行23种HPV基因亚型检测,其中包括18种高危亚型(HPV16,18,31,33,35,39,45,51,52,53,56,58,59,66,68,73,83,MM4)及5种低危亚型(HPV6,11,42,43,44)。结果HPV阳性检出率为17.5%(140/801),其中高、低危型检出率分别为16.9%(135/801)与2.6%(21/801),高危型中主要为HPV16,58感染,低危型中主要为HPV11感染。不同生殖道疾病(宫颈炎性病变、尖锐湿疣、宫颈上皮内瘤变(≥CIN))与正常对照组比较差异有显著性意义(P<0.05)。20~30 y,31~40 y,40~50 y和>50 y各年龄组中HPV阳性的比率为32%,38.5%,22.4%和7.1%。结论HPV11,16,58是深圳地区HPV感染的主要型别,20~50 y为感染的高峰人群,对HPV阳性者进行定期的跟踪,是防治尖锐湿疣与宫颈癌的重点。     

继发性肺结核患者治疗初期 FOXP3 TSDR DNA去甲基化变化情况分析

目的 应用一种FOXP3 TSDR DNA去甲基化荧光定量PCR技术,并分析该方法在继发性肺结核患者治疗初期变化情况。方法 选取2014年6月～2015年5月来深圳市龙华新区慢性病防治中心就诊的继发性肺结核病人47例作为研究组,健康对照40例,分离外周血单个核细胞,筛选CD4⁺CD25⁺T细胞,提取基因组DNA。利用去甲基化FOXP3 TSDR特异性引物扩增对照组基因组DNA,通过酶切、克隆和回收纯化等过程构建质粒标准品,优化FOXP3 TSDR去甲基化实时定量PCR技术,建立CD4⁺CD25⁺T细胞比例与FOXP3 TSDR PCR 拷贝换算关系,用该方法分析对照组和研究组0周及治疗后2,4和8周时的调节T细胞频率(FOXP3 TSDR去甲基化),应用spss16.0软件统计分析实验所得数据。结果 0周时47例研究组抗酸染色均为阳性,对照组均为阴性。以抗酸染色结果分组:对照组、抗酸(1+)组、抗酸(2+)组、抗酸(3+)组和抗酸(4+)组其调节T细胞频率分别为1.63%±0.70%,1.96%±0.10%,1.32%±0.32%,0.86%±0.21%和0.53%±0.12%,抗酸(2+)组与对照组差异无统计学意义,抗酸(3+)组与对照组差异有统计学意义。研究组0,2,4和8周时调节T细胞频率均值、范围及95%可信区间分别为1.05%(0.32%～2.03%),CI(0.93%,1.18%); 2.04%(0.95%～3.95%),CI(1.85%,2.24%); 3.44%(2.35%～4.95%),CI(3.27%,3.61%); 2.79%,(1.02%～4.27%),CI(2.60%,2.98%)。对照组与研究组0周时人群调节T细胞频率之间差异有统计学意义(t=4.669,P<0.05)。单变量方差分析显示治疗时间对研究组外周血调节T细胞频率(FOXP3 TSDR 去甲基化)水平变化有影响(F=347.2,P<0.001,df=3,组内F=407.4,P<0.001,df=3),治疗时间和分组交互效应呈线性关系(F=678.2,P<0.001,df=1)。结论 该方法敏感、特异,可以用于继发性肺结核患者的疗效监测。     

γ-干扰素释放试验与PPD皮肤试验在学龄儿童结核感染筛查中的比较

目的比较γ-干扰素释放试验和PPD皮肤试验在学龄儿童结核感染筛查中的应用价值。方法选取2015年龙华新区6~7岁和12~13岁学龄儿童共92名作为研究对象,采用自身配对设计,研究对象均接受γ-干扰素释放试验和PPD皮肤试验,利用SPSS 16.0统计学软件分析两种方法的差异,率的比较采用卡方检验。结果学龄儿童PPD皮肤试验,6~7岁年龄组共45例,感染率为7.14%,12~13岁年龄组共47例,感染率为9.30%,两组人群差异无统计学意义。92例研究对象PPD皮肤试验阳性率为22.80%,IGRA-ELISA法阳性率为39.10%,两种方法检测的阳性率差异无统计学意义。结论 IGRA-ELISA方法在临床结核病初步筛查是有较高应用价值。在学龄儿童结核筛查中IGRA-ELISA方法和PPD皮肤试验结果相同,但出于成本及操作角度考虑,PPD皮肤试验应用价值更大。     

FOXP3 mRNA RT-PCR检测在继发性肺结核疗效监测的应用

目的探讨FOXP3 m RNA荧光定量PCR技术在继发性肺结核患者疗效监测的应用意义。方法研究组选取继发性肺结核病人47例,收集初诊痰液,染色和镜检。选取健康对照40例。分离两组淋巴细胞,利用FOXP3 m RNA定量PCR技术分析对照组和研究组0周及治疗后2周、4周和8周时的FOXP3 m RNA表达情况,应用SPSS16.0软件统计分析实验数据。结果 0周时47名研究组抗酸染色均为阳性,对照组均为阴性。以抗酸染色结果分组,抗酸(+)组、抗酸(++)组、抗酸(+++)组和抗酸(++++)组与对照组FOXP3 m RNA表达差异均有统计学意义(P0.05,P0.01)。治疗时间对抗酸染色各组FOXP3 m RNA表达水平有影响(P0.01),治疗时间和抗酸各组因素存在交互作用(P0.01)。研究组和对照组FOXP3 m RNA表达差异有统计学意义(P0.01)。研究组治疗不同时间点方差分析显示治疗时间对研究组FOXP3 m RNA表达水平有影响(P0.01)。结论 FOXP3 m RNA定量PCR检测敏感,特异,可以用于继发性肺结核患者疗效和其机体免疫力的监测。     

结核性胸膜炎患者血清Treg细胞相关因子及趋化因子的检测价值研究

目的分析结核性胸膜炎患者血清Treg细胞相关因子及趋化因子的检测价值。方法选取2015年7月至2016年12月该院收治的92例结核性胸膜炎患者为观察组,选取同时间的92例健康者为对照组。检测并比较两组患者血清Treg细胞相关因子[单核细胞趋化蛋白(MCP)-1、IP-10、CCL-3及CCL-16]及趋化因子[白细胞介素(IL)-10、转化生长因子(TGF)-β及IL-35]水平,并比较不同分类与分期结核性胸膜炎患者的上述指标水平。结果观察组的血清Treg细胞相关因子及趋化因子水平均高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);结核性脓胸患者的表达水平高于干性胸膜炎与渗出性胸膜炎患者,渗出性胸膜炎患者高于干性胸膜炎患者,多发性胸膜炎患者高于特发性及伴发性胸膜炎患者,差异均有统计学意义(P0.05)。结论结核性胸膜炎患者的血清Treg细胞相关因子及趋化因子呈现高表达状态,且疾病的分类与分期对表达的影响均较大,上述指标在结核性胸膜炎患者中具有较高的检测价值。     

常见曲霉菌的反向斑点杂交技术的研究

目的 建立常见曲霉菌的反向斑点杂交诊断技术.方法 针对曲霉菌内转录间隔区2(internal transcribed spacer 2,ITS2)保守基因设计引物和杂交探针,对探针标记、固定在尼龙膜,形成一种杂交膜与PCR产物进行斑点杂交,显色.结果 真菌通用引物扩增常见曲霉菌ITS2基因DNA片段,大小为350bp左右.构建了常见曲霉菌的反向斑点杂交膜,与其PCR产物反应特异性好,灵敏度高.结论 利用PCR技术和反向斑点杂交技术鉴定常见的曲霉菌,方法特异性好、灵敏度高,符合临床需要,能为侵袭性真菌感染提供新的选择.     

兔脑出血模型ACTH 和Cor的RIA检测分析

采用放射免疫分析法(RIA )检测兔局灶性脑出血模型血清促肾上腺皮质激素(ACTH)和皮质醇(Cor) 含量的变化,观察下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴功能紊乱情况 ,以期为临床脑出血诊治提供实验依据.     

丙泊酚分次诱导异氟醚维持全身麻醉调控CO2气腹致循环紊乱

腔镜胆囊切除手术的主要特点为快捷、微创,在临床已广泛使用.但建立人工CO2气腹时可引起严重循环紊乱,主要表现为动脉血压急剧升高,甚至损害心肌细胞,引发心律失常[1,2].     

苯职业接触者基因多态性研究分析

目的了解深圳市龙华新区苯职业接触者的细胞色素氧化酶基因多态性。方法选取深圳市龙华新区100例苯接触职工作为观察组,并选取同一地区100例非苯职业接触者作为对照组。采集两组的血样,应用限制性片段长度多态性聚合酶链反应方法对CYP2E1 Rsa I/Pst I/Dra I基因多态性进行研究分析。结果观察组和对照组的CYP2E1 Dra I基因型和等位基因的分布差异无统计学意义(P>0.05);观察组和对照组的CYP2E1 Rsa I/Pst I基因型与等位基因的分布差异具有统计学意义(P<0.05)。结论因CYP2E1 Rsa I/Pst I位点的突变,体内的CYP2E1表达可能会增强,因此携带此类基因的人群更易因长期苯接触而中毒。