经直肠联合经阴囊超声检查在获得性梗阻性无精子症中的诊断价值

目的 探讨获得性梗阻性无精子症经直肠联合经阴囊的超声特征,评价超声检查在获得性梗阻性无精子症患者定位诊断中的作用.方法 回顾性分析72例获得性梗阻性无精子症患者(病例组)的临床资料,均行经直肠超声及经阴囊超声检查,观察睾丸、附睾、阴囊段输精管、精囊、射精管、前列腺的声像图表现.并以同期60例精液检查正常者为对照,进行超声特征分析.结果 72例获得性梗阻性无精子症患者中,经直肠超声发现前列腺中线囊肿25例,射精管结石或钙化18例,慢性精囊炎13例;经阴囊超声检查发现输精管扩张43例,附睾异常团块17例,附睾局部增厚伴网状改变24例,睾丸网扩张或囊肿4例;与对照组相比,超声检查发现获得性梗阻性无精子症的远端精道病变、附睾病变异常率明显增高,差异有统计学意义(P<0.01);病例组与对照组睾丸体积比较,差异无统计学意义(P>0.05);附睾头、体、尾部的厚度与对照组比较明显增厚,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 经直肠联合阴囊超声能够发现输精管道不同部位的病变,获得性梗阻性无精子症的远端精道病变、附睾病变异常率及附睾体积均增高,经直肠联合阴囊经超声检查能够为获得性梗阻性无精子症患者梗阻部位的定位诊断提供可靠的影像学依据.     

利用CRISPR/Cas9系统构建4T1细胞CXCR4基因敲除稳定细胞株

目的 利用CRISPR/Cas9系统敲除4T1细胞中的CXCR4基因,构建稳定敲除CXCR4基因的4T1细胞株。 方法 根据CRISPR/Cas9靶点设计原则,在美国国立生物技术信息中心（NCBI）上找到CXCR4基因序列的外显子区域,设计两条sgRNA,用LentiCRISPRv2作为载体构建LentiCRISPRv2-sgRNA重组质粒并转化至感受态的Stbl3菌体中,挑取单克隆测序验证并扩大培养提质粒后转染至293T细胞中包装成慢病毒。 收集病毒并感染4T1细胞,通过嘌呤霉素筛选并用有限稀释法分离培养出单克隆细胞。 提取筛选出的单克隆细胞基因组DNA并对敲除位点附近的DNA片段进行PCR扩增并测序;用Real-time PCR检测细胞株CXCR4基因mRNA表达情况;用免疫印迹法检测CXCR4蛋白质的表达情况。 结果 LentiCRISPRv2-sgRNA重组质粒构建成功;经过基因组DNA片段PCR扩增测序得1株缺失27 bp的稳定敲除CXCR4基因的细胞株;细胞株CXCR4mRNA的表达量低且几乎无CXCR4蛋白质的表达。 结论 通过CRISPR/Cas9系统获得靶向敲除CXCR4基因的重组质粒,并筛选出稳定敲除CXCR4基因的细胞株。     

开窗技术数值模拟在主动脉弓部病变中的应用

目的:探讨主动脉弓部病变中开窗技术的应用对主动脉弓部及弓上分支血管血流动力学的影响。方法:选取2016年11月至2019年5月复旦大学附属中山医院收治的主动脉瓣弓部病变患者10例,均行胸主动脉腔内修复,术中运用开窗技术重建左锁骨下动脉。基于患者术后随访的影像数据,建立个体化的主动脉三维几何模型。运用计算软件,对主动脉三维模型开展数值模拟,评估开窗技术对主动脉弓部及弓上分支血管血流动力学的影响。结果:结合开窗技术的胸主动脉腔内修复术成功率较高(9/10),术后未发生严重并发症,无手术相关死亡,随访期间未发现目标血管丢失。术后开窗支架相对狭窄,在收缩期和舒张期均观察到高速血流;开窗支架进入主动脉弓区域的血流振荡指数增高,表明开窗支架破坏了主动脉弓部的血流稳定;弓上分支血管的血流量分配发生改变,右侧头臂血流增加,左侧头臂血流减少。结论:开窗技术可在胸主动脉腔内修复术中有效重建左锁骨下动脉,但也对主动脉弓部和弓上分支血管血流产生影响;根据数值模拟结果,可对手术方式进行改良,并为手术器械的设计提供参考。     

脂联素与动脉粥样硬化

正动脉粥样硬化(AS)是冠心病、脑梗死、外周血管病等多种血管性疾病的病理基础。由AS引发的各类血管性疾病的发病率正在逐年增加,每年约有一千多万人死于AS所引起的相关疾病。因此,了解动脉粥样硬化的发生机制及研究其有效的预防措施具有重要意义。AS主要发生在大中型动脉,以冠状动脉、锁骨下动脉、颈动脉分叉处为著。受累动脉病变从内膜开始,在内膜损伤、炎性因子及趋化因子分泌增