端粒酶核酶hTERT 5''RZ时辰治疗人肝癌裸鼠移植瘤

我们在既往的研究中 ,为探讨肝癌裸鼠移植瘤细胞DNA合成与端粒酶表达的生物节律 ,在时辰同步化裸鼠中构建了肝癌细胞SMMC 772 1裸鼠移植瘤。继续在程控光照条件下饲养 ,于光照后 3,6 ,9,1 2 ,1 5 ,1 8,2 1小时取样 ,用流式细胞仪测定各时期细胞DNA含量 ,细胞周期分布及端粒酶活性水平。结果 ,肝癌裸鼠移植瘤细胞DNA合成随昼夜节律变化 ,且伴随端粒酶活性的同步节律变化 ,均在光照后 2 1小时达高峰 ,光照后 9小时处于低谷 ;节律周期呈余弦分布。表明 ,肝癌裸鼠移植瘤的生长与端粒酶活性表达在静止相达高峰 ,为制定肿瘤时辰化疗方案提…     

Survivin反义核酸对SMMC-7721细胞增殖和凋亡的影响

Survivin是凋亡抑制蛋白（IAP）家族的一个成员，具有强大的抗细胞凋亡功能，在几乎所有肿瘤组织中特异性表达，而在正常成年终末分化组织中低表达甚至不表达。本研究针对Survivin mRNA序列设计了反义寡核甘酸，RT—PCR检测表明，该序列反义寡核苷酸可明显降低细胞中survivin基因的mRNA含量；Western印迹显示Survivin蛋白水平也被降低。MTT比色实验法检测结果说明人Survivin反义寡核苷酸抑制SMMC-7721细胞增殖，抑制率为43％，远高于无义寡核苷酸组和空白对照组。反义寡核苷酸还显著增强SMMC-7721细胞对于抗肿瘤药高三尖杉酯碱的敏感性，TUNEL法检测结果显示，在较低高三尖杉酯碱浓度下，反义寡核苷酸转染细胞的凋亡率明显高于其它对照组。本研究结果提示，survivin表达的靶向抑制有望应用于肿瘤的辅助治疗之中。     

肝癌裸鼠移植瘤端粒酶活性表达的近日节律

目的：探讨肝癌裸鼠移植瘤细胞DNA合成与端粒酶表达的近日节律。方法：在时辰同步化裸鼠中构建肝癌细胞SMMC-7721裸鼠移植瘤，继续在程控光照条件下饲养，于光照后3、9、15、21h取样，用流式细胞仪测定各时期细胞DNA含量，细胞周期分布及端粒酶活性水平。结果：肝癌裸鼠移植瘤细胞DNA合成随近日节律变化，且伴随端粒酶活性的同步节律变化，呈近日节律特征。结论：肝癌裸鼠移植瘤的生长与端粒酶活性表达在静止相达高峰，为制定肿瘤时辰化疗方案提供了有价值的参考。     

体内蛋白转导的研究进展

简要综述了几种能够携带药物跨越血脑屏障和细胞生物膜屏障的蛋白结构域的研究进展。     

异鼠李素作用后HeLa细胞bcl-2基因表达的变化

目的　本研究采用人宫颈癌细胞 (He L a细胞株 ) ,观察异鼠李素诱导下 He L a细胞 bcl- 2和 bax基因表达的改变以研究其抗癌作用的机理。方法　体外培养的人宫颈癌细胞 (He L a)经 2 0μg/ml异鼠李素处理后 ,作光电镜观察 ,集落形成实验 ,3H- Td R掺入实验和流式细胞术检测。结果　异鼠李素作用后 ,He L a细胞的生长明显受到抑制 ,细胞形态出现凋亡特征 ,集落形成率和3H- Td R掺入率显著低于对照组 ,流式细胞仪检测显示异鼠李素处理组的细胞被阻止在G2 /M期 ,细胞凋亡率升高 ,bcl- 2癌基因表达降低 ,bax癌基因表达明显增加。结论　异鼠李素可能通过影响癌基因表达 ,从而抑制 He L a细胞增殖 ,达到抑制肿瘤的作用。     

节律基因mPeriod2对Lewis肺癌细胞生长的影响

目的 研究节律基因mPeriod2(mPer2)对肿瘤细胞的生长抑制及诱导分化凋亡的作用。方法 体外培养Lewis肺癌细胞,使用脂质体包裹法将真核表达质粒pcDNA3．1为基础的mPer2表达质粒(pcDNA3．1-mPer2)转导入Lewis肺癌细胞内;以免疫组化及流式细胞技术检测mPer2表达;通过流式细胞技术检测稳定转染的mPer2阳性表达的Lewis肺癌细胞的生长及凋亡。结果 mPer2表达质粒(pcDNA3．1-mPer2)转染的Lewis肺癌细胞表达PERIOD2蛋白;与对照组比较,其增殖指数下降及凋亡率增加。结论 节律基因mPer2可以抑制肿瘤细胞的生长,增加肿瘤细胞的凋亡率。     

管乐器训练对改善慢性精神分裂症患者心理状况的研究

目的:通过对部分慢性精神分裂症患者进行30周的管乐器训练以了解管乐器训练对改善慢性精神分裂症患者心理状况的作用。方法:对部分病人进行管乐器训练30周,在训练前后用《焦虑自评量表》(SAS)、《内外向性格测验问卷》分别对病人进行测试,并对测试所得数据用统计学方法进行分析。结果:患者的心理状况得到改善。《焦虑自评量表》所测得数据前后相比显示有效率65. 7% (t值3. 038,P<0. 01);《内外向性格测验问卷》所得的数据前后相比显示总有效率为57. 14%, (t值2. 6122,P<0. 05)。结论:管乐器训练对改善长期住院的慢性精神分裂症患者心理状况是有效的。     

成纤维细胞端粒酶重建对生物节律的调控

为探讨衰老对生物节律调控的分子机理,以青龄、衰老和端粒酶重建的皮肤成纤维细胞作为细胞模型,检测节律基因Per2,BMAL1和Clock表达.衰老细胞中节律基因表达受损,端粒酶重建细胞恢复了节律基因的节律性表达,提示端粒酶重建细胞可望用于衰老细胞的替代治疗.     

嗜肺军团菌PAL、HSP60抗原基因在真核细胞中表达的实验研究

目的 研究嗜肺军团菌PAL、HSP60抗原基因在真核细胞中的表达,为嗜肺军团菌DNA疫苗的研制提供实验依据.方法 将本室已构建的重组质粒pcDNA3.1-PAL和重组质粒pcDNA3.1-HSP60分别及混合转染NIH3T3细胞,通过免疫荧光和RT-PCR检测其瞬时表达和稳定表达产物.结果 重组质粒pcDNA3.1-PAL、pcDNA3.1-HSP60以及混合pcDNA3.1-PAL 和pcDNA3.1-HSP60转染NIH3T3细胞后均获得了有效表达.结论 本研究结果为嗜肺军团菌核酸疫苗的进一步研究奠定了基础.     

缺氧诱导因子-1α在缺氧缺血皮质神经元中的表达

目的探讨缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）蛋白及其mRNA在体外培养大鼠皮质神经元缺氧和（或）缺血过程中的表达情况。方法培养16~18 d胎鼠皮质神经元,建立体外神经元缺氧缺血（HI）、单纯缺氧、单纯缺血模型。在缺氧和（或）缺血再灌注后不同时间点,采取免疫细胞化学、原位杂交技术检测皮质神经元HIF-1α蛋白及其mRNA的表达。结果常氧下神经元HIF-1α蛋白有微弱表达,在缺氧和（或）缺血处理后,其表达明显增高,HI再灌注4~8 h后HIF-1α蛋白表达最高,与其他时间点比较均有显著差异（Pa=0）,12 h后开始下降;且HI组HIF-1α蛋白较单纯缺氧和单纯缺血组表达高,差异有统计学意义（Pa=0）。HIF-1αmRNA表达在HI后即达到高峰,2 h后渐下降,在8 h呈低水平表达。结论HIF-1α在缺氧和（或）缺血后的皮质神经元表达的差异具有一定时间规律性,提示对HI神经元进行HIF-1α基因治疗可能是一种可行的方法。