氯化镉对人肝癌细胞SMMC-7721抑制作用

目的 研究氯化镉（CdCl2）对人肝癌细胞（SMMC-7721）的抑制作用并探讨其作用机制。方法应用生长曲线法、四甲基偶氮噻唑蓝法（MTT）、流式细胞术（FCM）检测CdCl2对SMMC-7721的生长抑制及对细胞周期的影响。结果CdCl2对肝癌细胞SMMC-7721有明显的生长抑制作用，且存在剂量-效应关系；影响细胞周期进程并出现G0／G1期阻滞。结论CdCl2能有效抑制肝癌细胞株的生长，其抑制作用可能与影响细胞周期进程有关。     

我和世界杯抢老公

4年一次的世界杯开始了,足球的力量在这个夏天被无限放大,有人说世界杯是男人的盛典,也有人说世界杯是男人的兴奋期。反正,在这一段时间,整个世界似乎都是属于男人的。白天上班,晚上看球,男人的每一分钟都被足球占了去,再也没有女人一丝一毫的影子。于是,女人们打出了“和世界杯抢老公”的旗号,用尽各种方法,要把男人从世界杯里拉回自己身边。于是,世界杯,变得更加热闹非凡……     

全长型人Smac基因真核表达载体构建及表达

目的 构建全长型(full length,FL)人Smac基因(hSmac)真核表达载体pcDNA3.1 -FL hSmac,并在肝癌细胞中表达.方法 应用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术从人宫颈癌细胞株Hela中扩增到Smac CDs基因片段,构建重组真核表达载体peDNA3.1 -FL hSmae.PCR、酶切鉴定重组质粒正确后,通过脂质体介导将其和作为阴性对照的空载体pcDNA3.1 分别转染人肝癌细胞株(SMMC-7721).同时转染含EGFP的质粒pcDNA3.1 -EGFP.利用荧光显微镜和流式细胞术检测转染效率.采用RT-PCR、western blot法检测外源基因Smac的表达.结果 PCR扩增片段与预期片段大小相符,插入片段测序结果与GenBank公布的一致,表明人Smac基因克隆成功.且鉴定证实真核表达载体pcDNA3.1 -FL hSmac构建成功.流式细胞术检测到转染效率高达48%,荧光显微镜下也可见非常明亮的绿色荧光.无论是在mRNA水平还是蛋白水平上,转染后的细胞中外源基因Smac表达均明显增加.结论 成功构建重组真核表达载体pcDNA3.1 -FL hSmac,并在肝癌细胞中明显表达,为研究Smac基因在细胞凋亡过程中的调控作用.以及探讨以Smac基因为基础的肿瘤基因治疗策略提代基础依据.     

甲基汞致人肝细胞株HL-7702凋亡及相关机制

目的 研究甲基汞对体外培养的人肝细胞株HL-7702的凋亡作用及其机制.方法 实验分为阴性对照组及甲基汞受试物组,甲基汞的浓度分别为10、20、30、40、50 μmol/L.采用丫啶橙(AO)/溴化乙锭(EB)染色法和流式细胞技术检测甲基汞对细胞凋亡的影响;流式细胞技术检测甲基汞对细胞线粒体膜电位的影响;免疫细胞化学方法 检测甲基汞对凋亡相关蛋白表达的影响.结果 不同浓度氯化甲基汞作用24 h均可诱导细胞凋亡,AO/EB染色法检测阴性对照组细胞凋亡率为(2.62±0.19)%,10～50μmol/L 甲基汞受试物组细胞凋亡率分别为(7.97±0.64)%、(12.66±0.76)%、(19.16±0.87)%、(18.42±0.88)%、(11.52±0.63)%,各剂量组细胞凋亡率明显高于对照组(q值分别为17.057、32.009、52.732、50.373、28.375;P＜0.05).随着作用浓度的升高细胞线粒体膜电位明显下降,阴性对照组线粒体膜电位为(10.23±3.43)mV,10～50 μmol/L 甲基汞受试物组线粒体膜电位分别为(3.25±0.66)、(3.03±0.35)、(1.68±1.26)、(1.69±1.13)、(1.77±0.88)mV,各剂量组明显低于对照组(q值分别为9.569、9.871、11.722、11.708、11.598;P＜0.05).随着甲基汞作用浓度的升高 Bax、Bel-2、CytC、Caspase-3 及AIF表达有上升的趋势,且Bax/Bcl-2值升高.阴性对照组Bax表达的积分吸光度值(IOD)为21 295.86±1969.81,10、20、30μmol/L 组Bax表达的IOD分别为42 807.87±4416.64、55 651.65±4662.72、72 708.56±910.10,各剂量组明显高于对照组(g值分别为14.191、14.320、33.917;P＜0.05);阴性对照组Bcl-2表达的IOD为12 588.33±4091.02,10、20、30μmol/L组Bel-2表达的IOD分别为20 539.16±4906.09、23 689.97±2281.42、28692.80±4655.86,各剂量组明显高于对照组(g值分别为4.322、6.035、8.754;P＜0.05);阴性对照组AIF表达的IOD为12 942.72±457.94、10、20、30、40μmol/L组AIF表达的IOD分别为16 973.57±1922.87、29 998.91±6803.58、52 467.16±1916.25、106 342.53±1273.19,20、30及40 μmol/L组明显高于对照组(q值分别为11.449、26.530、62.692;P＜0.05).结论 甲基汞可以通过线粒体通路诱导体外培养的人肝细胞株HL-7702发生凋亡.     

纳米SiO2对大鼠肺泡Ⅰ型上皮细胞毒性的影响

目的 探讨纳米SiO2的肺细胞毒性.方法 用透射电镜观察2种不同粒径纳米SiO2粒子粒径、分散性、形状;用Zeta电位粒度分析仪检测纳米粒子在纯水和含体积分数为1%胎牛血清的RPMI 1640细胞培养液中的粒径.以大鼠肺泡Ⅰ型上皮细胞R3/1为靶细胞,利用分光光度法检测浓度均为2.5、5.0、10.0、20.0 μg/ml的2种不同粒径纳米SiO2粒子在6、24和48 h引起细胞乳酸脱氢酶(LDH)活力的变化;用酶联免疫法检测24 h时2种纳米SiO2粒子对细胞蛋白质羰基化水平及巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)释放的影响.结果 2种粒径纳米SiO2粒子均呈球形,大小一致,分布均匀,分散性好,平均粒子粒径分别为(43±4.2)和(68±5.7)nm;2种粒子分别在纯水和含质量分数为1%胎牛血清的RPMI 1640细胞培养液中有相似的粒径.6、24、48 h,2.5、5.0、10.0和20.0μg/ml的43和68 nm粒子引起细胞LDH活力轻微增加,与对照组相比,差异无统计学意义(P＞0.05);作用24 h后,细胞MIP-2的释放及细胞羰基化水平轻度增加,与对照组相比,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 在该实验条件下,2.5、5.0、10.0、20.0 μg/ml的2种纳米粒子对R3/1细胞无明显肺毒性.     

分裂样精神病与精神分裂症

分裂样精神病与精神分裂症四川省攀枝花市第三人民医院（６１７０６１）杜海英①王耀华戎建铁ＤＳＭ－ＩＶ和ＣＣＭＤ－２－Ｒ诊断标准中，均把病程的长短作为区别分裂样精神病和精神分裂症的主要尺度，其科学性和正确性有待进一步验证，本文仅对我院收治的现已确诊为精神...     

从SARS防治反思急诊工作

在2003年春夏之际，我国广东、北京等部分地区遭受一场突如其来的SARS风暴，在救治病人的过程中，首先遭到SARS袭击的是急诊科的医护人员，同时暴露了医院急诊工作中不少的薄弱环节。