新型猪胶原基真皮支架细胞毒性及亲和性的实验研究

目的通过对一种新型的猪胶原基真皮支架（PCDM）的细胞毒性和与成纤维细胞（FB）的亲和性进行评价,为这种新型生物材料的安全应用及工艺改良提供依据。方法用MTT法检测真皮支架不同浓度的浸提液对细胞增殖的影响情况,按医用生物材料细胞毒性分级标准进行评级;用MTT法测定种植24 h后FB在PCDM乳头层面的黏附情况,并与空白培养板对照,确定细胞在支架上的黏附率;在PCDM乳头层面种植人FB,于接种后1、7、14天通过苏木精-伊红染色、扫描电镜观察FB在PCDM上的生长情况。结果PCDM细胞毒性评级为0～1级,可认为无细胞毒性;FB在PCDM上的黏附数目相当于在培养板上的50%;FB在真皮支架乳头层表面增殖良好,但无法长入支架内部。结论猪胶原基真皮支架是一种无毒的天然异种真皮替代物,细胞亲和性较好,但需要改良生产工艺,以提高细胞黏附率和细胞相容性。     

大鼠肝细胞与Kupffer细胞共同培养对两者功能和形态影响

目的观察大鼠肝实质细胞与Kupffer细胞体外共同培养时对两者生长、形态及功能的影响。方法采用原位二步Ⅳ型胶原灌注法、Percoll液密度梯度离心法分离Wistar大鼠肝实质细胞与Kupffer细胞;体外将肝实质细胞与Kupffer细胞按6∶1比例共同培养。观察不同情况下肝细胞生存时间和形态,每隔24 h检测培养上清液中清蛋白和谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)的水平,并在培养36 h用放免法检测上清液中白细胞介素1(IL-1)、白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量。结果单独培养组肝细胞的生长、增殖迅速,并向正常肝细胞的形态演变,肝细胞可培养存活至15 d;共同培养组肝细胞生长增殖缓慢,细胞可培养存活至10 d。共同培养组上清液中清蛋白水平在24、36、48、60 h比单独培养组低(t=2.551~3.139,P<0.05);ALT、AST水平在24、36、48、60 h比单独培养组高(t=2.446~3.108,P<0.05);共同培养组Kupffer细胞保持IL-1I、L-6、TNF-α分泌功能,而单独培养组未检测到IL-1I、L-6、TNF-α。结论大鼠Kupffer细胞和肝实质细胞在适宜的培养条件下可进行共同培养,二者可以保持良好的分泌功能,可用于实验研究。     

猪胶原基真皮支架成纤维细胞生长特性的观察

目的：观察成纤维细胞在一种新型的猪胶原基真皮支架（PCDM）上的粘附生长特性,探讨提高异种真皮支架细胞相容性的方法。方法:分别在PCDM乳头层面和网状层面种植人皮肤成纤维细胞,于接种后1、7、14d通过HE染色,扫描和透射电镜下观察成纤维细胞在PCDM上的生长情况。结果:人皮肤成纤维细胞早期在乳头层真皮面的粘附优于网状真皮面,而晚期更多的网状真皮面可见到细胞形成复层并长入基质内部。结论:PCDM具有良好的细胞相容性,是与异体真皮最为接近的天然真皮支架,改良生产工艺以及去除基底膜和真皮乳头层可提高其细胞相容性。     

血清胆红素与脑梗死患者年龄及分型的关系探讨

目的探讨动脉粥样硬化性脑梗死患者发病早期(48h内)血清胆红素水平与年龄及分型的关系。方法选取127例动脉粥样硬化性脑梗死住院患者,分为动脉粥样硬化穿支闭塞型35例,动脉-动脉脑栓塞型32例,栓子清除障碍型30例,混合型30例,行NIHSS评分,采用全自动生化分析仪测定血清胆红素水平,按照患者年龄分组并与对照组比较。结果动脉粥样硬化性脑梗死患者血清胆红素水平与对照组比较显著降低(P<0.01),不同年龄段患者血清总胆红素水平比较差异有统计学意义(P<0.05);各分型中动脉-动脉脑栓塞型脑梗死血清胆红素水平最低,其次为栓子清除障碍型、混合型,而动脉粥样硬化穿支闭塞型最高。结论动脉粥样硬化性脑梗死患者血清胆红素水平与年龄及神经功能缺损程度呈负相关,在不同病因及病理生理机制方面存在差异。     

冠心病者体液免疫功能变化

冠心病(CAD)是危害人类健康的主要疾病之一，其危害程度似经济与社会的发展水平相一致。CAD的主要发病机理是冠脉硬化及其血栓形成，近年来免疫功能异常在CAD中的作用受到重视。为此我们对CAD及急性心肌梗死(AMI)患者血清免疫球蛋白(Ig)及补体(C)进行了检测。     

脱细胞真皮基质的制备与性能分析

目的 制备一种新型脱细胞真皮基质(ADM)并分析其性能。方法 选用猪皮为原料,采用化学、物理及生物综合技术制备ADM,采用HE染色、扫描电子显微镜观察、红外光谱分析、氨基酸分析、拉力实验、MTT法检测其外观、结构及理化性能。结果 ADM细胞去除彻底,胶原蛋白的含量达92.01%;具有连通的三维孔道,孔径约100μm;红外吸收符合胶原蛋白的吸收特征,保持了胶原纤维的天然结构;透水汽性达到每天2923g/m2;孔隙率提高到85.54%;细胞在ADM上黏附生长、增殖良好、分布均匀。结论 ADM孔隙率和拉伸强度适宜、孔结构理想、降解速度可控、生物相容性良好,符合皮肤组织工程对支架材料的要求。     

高尿酸血症与妊娠高血压的关系研究

目的 研究妊娠高血压患者的尿酸水平,探讨高尿酸血症与妊娠高血压的关系.方法 以392例的血压正常孕妇为对照组,261例妊娠轻度高血压患者为观察组1,164例妊娠重度高血压患者为观察组2,研究三组别血清尿酸水平及尿酸增高率.结果 三组别尿酸水平分别为289.6±53.2、387.2±81.7、442.3±92.6,经方差分析,F=305.9,P<0.001,差异有统计学意义,两两比较q分别为31.17、10.83、23.94,P<0.05,均有统计学差异;三组别尿酸增高率为21.9%、48.3%、63.4% 经卡方检验X2=98.76,P<0.001,差异有统计学意义,观察组2与观察组1比较,χ2=9.89,P<0.05,差异有统计学意义;结论 高尿酸水平与妊娠高血压的发生有密切的关系,是妊娠高血压的一个危险因子.     

腹腔镜辅助下肛门全直肠系膜切除直肠癌根治术在低位直肠癌保肛治疗中的应用

目的探讨腹腔镜辅助下肛门全直肠系膜切除直肠癌根治术在低位直肠癌保肛治疗的效果。方法选取2015年1月至2019年2月在山东省滕州市中心人民医院治疗低位直肠癌患者410例,根据治疗方法分为观察组210例和对照组200例,观察组给予腹腔镜辅助下肛门全直肠系膜切除直肠癌根治术,对照组给予腹腔镜经腹直肠癌切除术或腹会阴联合直肠癌根治术治疗,观察两组手术情况等,采用肛门失禁评分系统(wexner incontinence score,WIS)和视觉模拟评分(visual analogue scale/score,VAS)对肛门功能、肛门控便及疼痛情况进行评价。结果两组患者手术时间、淋巴结清扫数、肠管切除长度差异无显著性(P>0.05);观察组术后出血量明显低于对照组,排气时间、下床时间和住院时间明显短于对照组(P<0.05)。观察组术后1、3、6个月WIS评分显著低于对照组,观察组术后1、3、7d时VAS评分显著低于对照组,差异有显著性(P<0.05)。两组并发症发生率比较,差异无显著性(χ2=0.612,P=0.434)。结论腹腔镜辅助下肛门全直肠系膜切除直肠癌根治术治疗低位直肠癌有较好的效果,值得临床使用。     

透明质酸的改性及其应用

透明质酸（HA）是广泛分布在软结缔组织细胞外基质（ECM）中的主要蛋白多糖,具有良好的生物相客性和生物降解性,能调节渗透压、流动阻力以及血浆与基质蛋白扩散的选择性,可应用于组织工程和医药领域。HA极易溶于水、降解速度快等良好性能限制了其在某些组织工程和医药领域的应用,因此需要进行化学改性,提高其机械强度,减缓其在组织内的降解速度,进一步扩大其应用前景。HA具有羟基、羧基和乙酰胺基等官能团,可通过交联、酯化、接枝、分子修饰和复合等方法进行改性。