人地中海贫血基因β654的克隆与序列分析

[目的]克隆人地中海贫血基因β654,并进行序列分析,为下游转基因小鼠模型的建立奠定工作基础。[方法]以PCR法扩增获得人β654基因,将其克隆入卸除了人β基因的质粒pBGT51中,酶切、反应点杂交及测 法鉴定重组质粒。[结果]所构建的重组质粒中含人β654基因,其引入方向正确,序列分析结果正确。[结论]构建所得的重组擀粒可用于下游的传基因工作。     

附睾或睾丸取精术在男性不育症治疗中的应用

目的:探讨附睾及睾丸取精术在男性梗阻性无精子症(OA)患者的不育治疗中的应用价值。方法:对38例OA患者行经皮附睾精子抽吸术(PESA)或开放式睾丸取精术(TESE),获取精子后行卵泡浆内单精子注射术(ICSI)及胚胎移植术(ET),统计评估受精率及临床妊娠率。结果:38例OA患者均顺利获取精子,共进行治疗41个周期,受精率及临床妊娠率分别为73.3%、56.3%。妊娠22例,已分娩13例,继续妊娠3例,流产6例。结论:附睾及睾丸穿刺取精术在男性梗阻性无精子症的不育治疗中具有重要应用价值。     

中山地区男性不育患者精液质量分析

目的对中山地区男性不育患者的精液进行常规分析,了解中山地区男性不育患者精液质量的现状。方法按照《世界卫生组织人类精液检查与处理实验室手册》（第5版）的标准,应用西班牙人类精液分析微机辅助智能系统（CASA）对2012年10月～2013年6月来中山市博爱医院生殖中心就诊的2224例不育男性患者的精液进行常规检测和采用改良巴氏染色法分析精子正常形态率。结果2224例不育男性精液中正常者1113例（31．61％）,异常者1521例（68．39％）,其中液化异常964例（43．35％）,pH值异常124例（5．58％）,精子总数异常1002例（45．05％）,精子浓度异常556例（25．0％）,精子存活率异常1031例（46．36％）,精子总活力（PR＋NP）异常1208例（54．31％）,无精子症372例（16．72％）,精子正常形态率异常1021例（45．91％）。结论精子总活力、存活率下降,精子总数减少,精子正常形态率下降和精液液化不良是引起中山地区男性患者不育的主要原因,临床上应加于重视。     

精子DNA碎片率与体外受精实验室结局的关系

目的初步探讨精子DNA碎片率、精子核蛋白不成熟度与体外受精实验室结局的关系。方法对2013年5~7月在我院行IVF治疗的男性患者行精液常规、精子DNA碎片率及精子核蛋白不成熟度检查,利用spearman相关分析探讨它们与IVF受精率、优胚率的关系。结果精子DNA碎片碎与男方年龄正相关,与前向运动精子百分率、优胚率负相关,与IVF受精率无相关。精子核蛋白不成熟度与精子浓度、正常精子百分率负相关,与IVF受精率、优胚率无显著相关。结论精子DNA碎片率检测对预测IVF优胚率有一定的临床意义。     

利用附睾或睾丸精子行卵胞浆内单精子注射治疗阻塞性无精子症

目的 回顾性分析38例阻塞性无精子症（OA）患者利用附睾或睾丸精子行卵胞浆内单精子注射（ICSI）的治疗结局。方法OA患者通过经皮附睾精子抽吸术（PESA）或睾丸切开取精术（TESE）获得精子行ICSI，评估受精率及临床妊娠率，以精液精子行ICSI组为对照。结果OA组38例共41个治疗周期，受精率和临床妊娠率分别为73．3％和53．6％，精液精子组31例33个治疗周期受精率和临床妊娠率分别为75．1％和48．4％，两组间比较，受精率和临床妊娠率差异无统计学意义（P〉0．05）。OA组共妊娠22例，已分娩13例，流产6例，继续妊娠3例；精液精子组共妊娠16例，已分娩10例，流产1例，继续妊娠5例。结论采用附睾／睾丸精子行ICSI是治疗男性阻塞性无精子症的有效方法。     

β珠蛋白生成障碍性贫血聚合酶链反应-反向点杂交法基因诊断

β珠蛋白生成障碍性贫血亦称 β地中海贫血是由于 β珠蛋白基因座位突变导致 β珠蛋白肽链合成减少或缺乏所引起的一类遗传性溶血性疾病。该病呈常染色体隐性遗传 ,在中国华南及西南地区是一种常见病 ,广东地区人群发生率达1.36 %～ 4 .90 %。本病的轻型患者可以没有临床症状 ,重症患者一般在出生后一年内开始表现出严重的贫血 ,终身需要输血治疗。由于缺乏有效的根治性手段 ,目前对β地中海贫血以预防为主。通过对人群中地中海贫血突变基因携带者的筛查 ,有针对性地指导婚育 ,开展产前诊断工作 ,从而杜绝重症患儿的出生。本文利用聚合酶链…     

慢性前列腺炎患者血清抗精子抗体和精液参数变化

目的　探讨前列腺慢性炎症对患者血清抗精子抗体 (AsAb)和精液参数的影响。方法　用酶联免疫吸附试验 (ASA ELISA)对 75例慢性前列腺炎患者和 31例正常对照者血清中AsAb进行定量分析 ,用美国HML全自动精液分析仪对两组精液常规检查 ,比较血清AsAb和精液主要参数变化。结果　慢性前列腺炎患者血清抗精子抗体IgG、IgA值明显高于正常对照组 (P <0 .0 1) ,精液量、精子活动百分率、精子正常形态百分率、精子活力a级和a b级、路径速度 (VAP)、直线运动速度 (VSL)及前向性STR均显著低于正常生育者 (P <0 .0 5和P <0 .0 1) ,精子密度、精液PH值、侧摆幅值 (ALH)与正常对照者比较无显著性差异 (P>0 .0 5 )。结论　慢性前列腺炎患者血清抗精子抗体滴度升高 ,精液部分主要参数较正常生育者明显降低。     

荧光原位杂交技术在染色体非整倍体产前诊断中的应用研究

目的建立荧光原位杂交技术应用于未培养羊水标本的染色体非整倍体产前诊断。方法对于符合产前诊断指征的孕妇,于孕16-25周抽取羊水25ml,其中20ml用于传统的细胞培养和染色体G显带分析,其余5ml用荧光原位杂交方法诊断13、8、21、X、Y染色体非整倍体。结果100例受检样本中,染色体数目异常3例,其中21三体2例,45,X 1例。FISH方法与传统羊水细胞核型分析符合率100%。结论FISH技术具有快速、简便、特异的特点,可作为部分染色体非整倍体的快速产前诊断方法。     

血常规MCV、MCH对静止型α地中海贫血的筛查意义

目的探讨血常规MCV、MCH对静止型α地中海贫血(以下简称地贫)的筛查价值。方法回顾性分析,2010年1月至2011年5月间在我院行相关检查者。研究组:110例静止型α地贫患者;对照组:100例健康体检者。比较两组间MCV、MCH均值的差异,并对两组资料进行ROC曲线分析。结果静止型α地贫组MCV、MCH均值与健康对照组有明显差异。ROC曲线分析,MCV曲线下面积0.926,MCH曲线下面积为0.954。结论血常规MCV、MCH可作为静止型α地贫的有效筛查指标,但存在漏检风险。     

鲍曼不动杆菌耐消毒剂-磺胺类耐药表型及耐药基因的检测

目的:了解广东省中山地区鲍曼不动杆菌耐消毒剂-磺胺类的耐药表型和基因表型的分布及其关系。方法:用VITEK-2 Compact高级专家系统判定2010年1～9月405株鲍曼不动杆菌对消毒剂-磺胺类的耐药表型检测,并对其中30株多重耐药鲍曼不动杆菌采用PCR方法检测qacE△1-sul1基因。结果:405株鲍曼不动杆菌耐消毒剂-磺胺类的耐药表型模式RESISTANT为201株(49.6%),WILD为185株(45.7%),RESISTANT+WILD为19株(4.7%)。30株多重耐药菌株检出耐消毒剂-磺胺类的耐药表型模式为ESISTANT 12株,WILD 15株,RESISTANT+WILD 3株。结论:临床分离的鲍曼不动杆菌多重耐药严重,qacE△1-sul1基因携带率为100%。