厄贝沙坦对糖尿病大鼠心肌损伤中MAPKs信号通路及相关因子的影响

目的观察厄贝沙坦在糖尿病大鼠心肌损伤中发挥的作用,并探讨其对丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPKs)信号通路及其相关因子表达影响。方法雄性SD大鼠50只,随机分为糖尿病4周(DM4W)组、糖尿病8周(DM8W)组、糖尿病8周+厄贝沙坦(DM8W+Ir)组、对照(Con)组、高糖高胆固醇饮食(HC)组,各10只。复制2型糖尿病大鼠模型成功后,DM8W+Ir组给予厄贝沙坦溶液灌胃干预;饲喂第4周时,处死DM4W组大鼠并留取心脏组织标本;饲喂8周后,处死剩余组大鼠。比较各组大鼠空腹血糖、体质量、心体比和左心室质量指数;取大鼠离体心肌行Masson染色观察心肌细胞纤维化改变;ELISA法检测心肌细胞内炎症细胞因子白细胞介素(interleukin,IL)-1β、IL-6、IL-1表达水平;Western blotting法检测心肌组织丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1(mitogen-activated protein kinase phosphatase-1,MKP-1)、P38丝裂原激活蛋白激酶(P38 mitogen-activated protein kinase,P38MAPK)、细胞外信号调节激酶(extracellular signal-related kinases,P-ERK1/2)蛋白表达水平。结果HC组大鼠空腹血糖、体质量、心体比、左心室质量指数与Con组差异均无统计学意义(P>0.05),IL-1β、IL-6、IL-1表达水平和MKP-1、P38MAPK、P-ERK1/2蛋白表达与Con组差异亦均无统计学意义(P>0.05)。与Con组、HC组相比,各糖尿病组大鼠Masson染色心肌细胞明显纤维化改变;体质量减轻,心肌细胞内炎症细胞因子IL-1β、IL-6、IL-1表达水平升高,心肌组织MKP-1蛋白表达降低,P38MAPK、P-ERK1/2蛋白表达升高(P < 0.05~P < 0.01);与DM4W、DM8W组比较,DM8W+Ir组大鼠IL-1β、IL-6、IL-1表达水平降低,MKP-1蛋白表达升高,P38MAPK、P-ERK1/2表达蛋白降低(P < 0.05~P < 0.01)。结论厄贝沙坦通过调控MAPKs信号通路发挥改善糖尿病心肌损伤的作用。     

NLRP1炎症体在糖尿病大鼠心肌组织内的表达

目的 观察高脂高糖饮食和糖尿病分组中核苷酸结合寡聚化结构域样受体1（NLRP1）炎症体在心肌组织中表达的情况,分析其在糖尿病心肌病中潜在的致病机制。方法 将实验大鼠分为3组：正常组、高糖高脂饮食组和糖尿病组。以链脲佐菌素（STZ）30 mg/kg腹腔注射复制糖尿病大鼠模型,造模成功8周后行血清学检测各组大鼠血清胆固醇、甘油三酯、空腹血糖及空腹胰岛素,并计算得出胰岛素抵抗指数（IRI）和胰岛素敏感性指数（ISI）;心脏彩超评估心脏结构及功能;免疫印迹法和实时荧光定量PCR检测心肌组织NLRP1、ASC和caspase 1的蛋白及mRNA表达等情况。结果 与正常组相比,高糖高脂饮食组体质量、血 清胆固醇、甘油三酯增高,NLRP1 mRNA、caspase 1 mRNA及NLRP1蛋白表达增加(P<0.01),但空腹胰岛素、IRI、ISI、心脏彩超未见明显变化（P>0.05）,心肌组织ASC和caspase 1蛋白及血清IL-1β、IL-18水平无明显变化（P>0.05）,而糖尿病组中,大鼠血清胆固醇、甘油三酯、空腹血糖升高,空腹胰岛素、ISI和体质量降低（P<0.01）,左室舒张末期内径、左心室收缩末期内径增大,射血 分数、短轴缩短率及E/A比值下降并伴有NLRP1/ASC/caspase 1通路mRNA同步增加和NLRP1、caspase 1蛋白水平升高,但心肌组织中ASC蛋白表达无明显升高（P>0.05）。此外糖尿病组中IL-1β、IL-18也较正常组升高（P<0.05）;与高糖高脂饮食相比糖尿病组大鼠空腹血糖升高伴有空腹胰岛素,ISI和体质量降低（P<0.01）,心脏彩超提示左心室收缩末期内径,射血分数及E/A比值下降并伴有NLRP1、caspase 1蛋白表达增加和血清L-1β、IL-18升高（P<0.01）。结论 糖尿病可诱发心脏结构和功能异常及心肌炎症反应,其机制可能与NLRP1/ASC/caspase 1炎症体活化有关。     

糖尿病大鼠心肌损伤中程序性坏死通路相关蛋白的表达

目的 探讨程序性坏死（Necroptosis）通路相关蛋白在糖尿病心肌中的表达及其可能机制。 方法 在大鼠高糖高脂饮食喂养基础上腹腔注射链脲佐菌素40 mg/kg制备糖尿病模型大鼠,其中正常组（CON组,n=6）、高脂高糖组（HC组,n=6）和糖尿病组（DM组,n=6）;10周后超声检测左心室舒张末期内径（LVEDD）、左心室收缩末期内径（LVESD）及左心室射血分数（LVEF）;处死大鼠后测量心质量（HW）、体质量（BW）、心体比（HW/BW）;ELISA法检测血液中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）及丙二醇（MDA）水平;心尖部组织行Masson染色;RT-PCR及Western blotting检测心肌组织中RIPK1、RIPK3、MLKL的含量变化。 结果 与CON组比,HC组HW、TNF-α、IL-6、MDA水平增加,RIPK1、RIPK3和MLKL的蛋白表达量增加（P < 0.05~P < 0.01）,但MLKL的mRNA表达量无明显变化（P>0.05）;与HC组比较,DM组HW/BW升高,LVEF下降,TNF-α、IL-6及MDA水平增加,RIPK1、RIPK3、MLKL的mRNA及蛋白含量增加（P < 0.01）,Masson染色蓝染加重。 结论 高糖状态可诱导心肌损伤,增加心肌纤维化及氧化水平,可能与上调Necroptosis通路有关。     

血清ALDH2和NLRP3活性水平在冠心病不同血管病变程度中的变化

目的通过检测血清线粒体乙醛脱氢酶2（ALDH2）及核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3）活性水平,分析血清ALDH2和NLRP3与冠心病（CHD）不同病变程度之间的相关性,探讨二者在CHD发生、发展中的变化规律。方法选择因胸痛入院并行冠脉造影检查的病人170例,其中冠状动脉（冠脉）造影明确诊断为CHD病人133例,同期冠脉造影正常者37例（对照组）。133例CHD病人按照冠脉狭窄严重程度分成轻度狭窄组（< 50%,is-CHD组）19例、中度狭窄组（50%~75%,ms-CHD组）41例和严重狭窄组（≥75%,ss-CHD组）73例。应用酶联免疫吸附实验检测血清中ALDH2及NLRP3活性水平,分析在有无CHD及冠脉不同病变程度下ALDH2和NLRP3活性差异,探讨ALDH2及NLRP3活性水平与CHD发生、发展的关系,采用Pearson相关性分析ALDH2和NLRP3的血清学影响因素。结果CHD组血肌酐水平高于对照组和ms-CHD组（P < 0.05）,高密度脂蛋白在ss-CHD组中明显低于对照组（P < 0.01）,ms-CHD和ss-CHD组淋巴/单核细胞低于is-CHD组（P < 0.05）。is-CHD组、ms-CHD组和ss-CHD组血清ALDH2水平均较对照组减低（P < 0.05~P < 0.01）,并且随着冠脉狭窄严重程度的加重而逐渐减低（P < 0.01）;而血清NLRP3水平随着冠脉病变程度加重其含量逐渐升高（P < 0.01）,且两者之间呈正相关关系（P < 0.05）。随着CHD病变支数的增加ALDH2逐渐下降（P < 0.01）,而NLRP3水平逐渐增加（P < 0.05）,以NLRP3变化为显著。血清ALDH2水平与Gensini评分呈明显负相关关系（r=-0.247,P < 0.01）,而NLRP3水平与Gensini评分呈明显正相关关系（r=0.477,P < 0.01）。血清ALDH2与LDL呈负相关关系（r=-0.220,P < 0.05）;而血清NLRP3与ALDH2呈负相关关系（r=-0.201,P < 0.05）。结论随着冠脉病变程度加重,血清ALDH2水平逐渐降低,血清NLRP3水平逐渐升高,两者间存在一定的线性相关。     

血清成纤维细胞生长因子-23及可溶性α-Klotho水平对冠状动脉病变预后的相关性分析

目的：观察急性冠状动脉综合征（acute coronary syndrome,ACS）患者血清成纤维细胞生长因子-23（fibroblast growth factor-23, FGF-23）和α-Klotho表达水平与冠状动脉病变及临床预后相关性。方法：入选200例我院行冠状动脉造影患者，根据病史、相关检查及冠状动脉造影结果分为：不稳定型心绞痛组（UAP组，共104例）、急性心肌梗死组（AMI组，69例）和造影正常组（对照组，27例）。检测患者血清FGF-23及α-Klotho水平并对所有患者进行平均1年的随访，评估两组患者主要心脏不良事件（major adverse cardiovascular and cerebrovascular events,MACCE）的发生情况。结果：UAP组和AMI组中血清α-Klotho水平低于对照组（P <0.05）;AMI组血清FGF-23水平高于对照组和UAP组（P <0.05）。多支病变组血清FGF-23高于单支和双支病变组（P <0.05）;Pearson相关分析显示：血清FGF-23水平与Gensini评分呈线性正相关（...     

RIP1-RIP3-MLKL信号通路在急性冠状动脉综合征病人外周血单核细胞中的表达

目的:研究急性冠状动脉综合征(ACS)病人外周血单核细胞(PBMCs)上刺激受体相互作用蛋白1(RIP1)-RIP3-混合谱系激酶结构域样假激酶(MLKL)信号通路的表达变化,并分析其可能机制.方法:选取初诊为ACS病人60例,其中不稳定型心绞痛(UAP)病人31例,急性心肌梗死(AMI)病人20例,对照组选取同期健康...     

急性冠脉综合征患者血清miR-139-5p表达水平与短期预后的关联性分析

［摘要］　目的　分析急性冠脉综合征（ACS）患者血清miR-139-5p表达水平与短期预后的关联性。方法　招募2021年1月至2021年9月安徽省第二人民医院收治的因胸痛入院的ACS患者176例,其中不稳定型心绞痛(UAP)患者100例（UAP组）、急性心肌梗死(AMI)患者76例（AMI组）。另选择同期因胸痛入院,并经冠脉造影检查排除冠心病的28例患者为对照组。于患者入院次日抽静脉血检测血清miR-139-5p和血管内皮细胞生长因子受体-1（VEGFR-1）表达水平,并收集患者其他临床资料。对所有患者进行6个月随访,记录其主要心血管不良事件（MACE）发生情况。结果　与对照组比较,UAP组和AMI组血清miR-139-5p表达水平更高,VEGFR-1表达水平更低,差异有统计学意义（P<0.05）。且AMI组血清miR-139-5p表达水平较UAP组显著升高（P<0.05）,但两组血清VEGFR-1表达水平比较差异无统计学意义（P>0.05）。Pearson相关性分析结果显示,ACS患者血清miR-139-5p表达水平与VEGFR-1表达水平呈负相关（r=-0.189,P=0.010）。Cox回归分析结果显示,较高的血清miR-139-5p表达水平是促进MACE发生的危险因素（P<0.05）。受试者工作特征（ROC）曲线分析结果显示,血清miR-139-5p表达水平能有效预测术后MACE发生［AUC(95%CI)=0.81(0.73～0.89),P<0.001］,其最佳截断值为2.08,对应的灵敏度为82.83%,特异度为66.28%。K-M曲线分析结果显示,血清miR-139-5p表达水平≥2.08的ACS患者的无MACE生存时间较血清miR-139-5p表达水平<2.08者更短,差异有统计学意义（P<0.001）。结论　ACS患者具有较高的血清miR-139-5p表达水平,血清miR-139-5p表达水平≥2.08时提示患者发生MACE的风险较大,应引起临床医师关注。