结核性胸膜炎患者外周血和胸水中Th17、Th1细胞检测分析

目的 探讨结核性胸膜炎患者Th17、Th1细胞免疫应答的特性及作用。方法 应用流式细胞术检测30例健康对照组（HD）、23例潜伏感染组（LTBI）、20例结核性胸膜炎组(TP) 患者外周血单个核细胞（PBMC）与胸水单个核细胞（PFMC）Th17、Th1细胞的变化情况。结果 结核性胸膜炎患组外周血非特异性Th17和Th1细胞百分比分别为（2.81±0.94）和（27.85±11.02）,低于健康对照组（4.63±1.63）、（36.34±9.39）和潜伏感染组（4.13±1.91）、（42.37±13.87）,差异有统计学意义（P<0.001,P<0.05）;结核性胸膜炎患者胸腔积液PFMC的非特异性Th17细胞百分比为（1.85±1.34）,低于外周血PBMC的（2.81±0.94）,差异有统计学意义(P<0.01);同时PFMC结核菌特异性Th17、Th1细胞的百分比分别为（0.68±0.13）和（6.91±1.16）,高于PBMC（0.25±0.11）和（1.98±0.56 ）,差异有统计学意义(P<0.01,P<0.001)。结论 结核性胸膜炎患者外周血非特异性Th17、Th1细胞应答及感染局部Th17的非特异性应答反应均受到抑制;感染局部特异性Th17、Th1应答处于高水平状态;Th17、Th1细胞应答在结核性胸膜炎的发病中发挥重要作用。     

Th17淋巴细胞对甲型H1N1流行性感冒病毒清除作用的探讨

目的 探讨甲型H1N1流行性感冒(流感)患者Th17淋巴细胞表型、比例及其与病毒清除之间的关系.方法 将甲型H1N1流感患者70例、季节性流感患者30例、健康对照者68例分别纳入3组.通过细胞内染色,流式细胞技术测定3组人群外周血Th1、Th2、Th17、调节性T细胞(Treg)淋巴细胞比例;ELISA法测定血浆及外周血单个核细胞(PBMC)培养上清液中的IFN-γ、转化生长因子-β(TGF-β)、IL-6水平;RT-PCR检测鼻咽拭子甲型H1N1流感病毒载量.统计学方法采用单因素方差分析和线性相关分析.结果 甲型H1N1流感患者Th17淋巴细胞比例为(2.740±0.210)%,较健康对照者的(3.443±0.154)%及季节性流感患者的(3.443±0.277)%显著下降(F=4.242,P＜0.05),而3组间Th1、Th2、Treg淋巴细胞比例无明显差异;甲型H1N1流感患者血浆TGF-β水平为(10±8)ng/mL,较健康者的(43±32)ng/mL及季节性流感患者的(18±10)ng/mL显著下降(F=17.72,P＜0.01);甲型H1N1流感患者PBMC中TGF-β水平为(782±736)pg/mL,较健康者的(1462±315)pg/mL及季节性流感患者的(1481±348)pg/mL显著下降(F=5.730,P＜0.01);Th17淋巴细胞比例与病毒清除时间呈负相关(r=-0.38,P=0.02).结论 甲型H1N1流感患者Th17淋巴细胞比例显著降低,且与TGF-β水平密切相关,其降低可能导致机体延长排毒时间.     

实时荧光定量PCR技术检测儿童HBV-DNA载量

目的:研究儿童HBV-DNA及血清学标志物与乙肝病毒复制的关系,探讨其应用在儿童乙型肝炎患者的临床价值.方法:实时荧光定量PCR测定HBV-DNA;ELISA法酶联免疫吸附法检测血清标志物;速率法检测丙氨酸转氨酶(ALT),综合分析并评价其相互关系及临床联合检测的价值.结果:HBsAg+、HBeAg+、抗HBc+阳性组125例, 检出125例,检出率100%,含量为5.26×106～2.19×108拷贝/ml,ALT 35例增高,占28%;HBsAg+、抗HBe+、抗HBc+阳性组55例,15例被检出,检出率为27.3%,含量范围2.53×103～1.29×106拷贝/ml,ALT 10例增高,占18%;HBsAg+、抗HBc+阳性组10例,检出1例,检出率10%,含量3.19×103拷贝/ml.结论:儿童乙型肝炎患者HBeAg阳性组HBV-DNA载量较高,是否与其生理发育不够完善,机体免疫力低下,对病毒的抵抗力较弱有关.抗HBe阳性组相对复制水平较低,与成人差异无显著,HBV-DNA载量与ALT水平高低无相关性,乙肝病毒含量的高低与肝功能受损程度不呈正相关.     

结核分枝杆菌IFN-γ酶联免疫斑点检测在结核诊断中的应用

目的采用结核分枝杆菌特异性IFN-γ酶联免疫斑点（简称Elispot）检测技术对不同的人群进行检测,评价其在结核诊断中的应用情况。方法290例结核病人（结核组）,其中肺结核221例中痰抗酸染色（AFB）阳性者89例,AFB阴性者132例;同时选取133例健康志愿者为健康组。采用自行建立的Elispot技术对2组外周血结核菌特异性IFN-γ水平进行检测;对11例结核病人和10例健康者同时采用T-SPOT.TB试剂盒进行平行检测。结果Elispot反应阳性率结核组为83.79%,显著高于健康组的16.54%（P〈0.001）;AFB（＋）肺结核病人阳性率为89.89%,AFB（—）肺结核病人阳性率为81.06%,两者差异无显著性意义（P〉0.05）。T-SPOT.TB与Elispot平行检测阳性率比较,差异无显著性意义（P〉0.05）。结论结核菌特异性IFN-γElispot检测技术在结核诊断中显示出较好的特异性和敏感性,可作为临床结核病诊断的辅助手段。     

结核病患者血浆和胸水中白介素6水平及其临床意义

目的通过检测结核病患者血浆及胸水中白细胞介素6（IL-6）的浓度变化情况,探讨IL-6与结核菌感染的临床转归、疾病严重程度的关系。方法用ELISA法检测30例健康体检者、30例潜伏感染者、30例活动性肺结核患者、20例结核性脑膜炎患者及20例结核性胸膜炎患者血浆和胸水中的IL-6的浓度。结果肺结核患者血浆中IL-6水平明显高于健康对照组及结核潜伏感染者（P〈0.01,P〈0.01）;结核性胸膜炎患者血浆中IL-6水平明显高于肺结核患者（P=0.0029）;结核性胸膜炎患者胸水中的IL-6显著高于相应血浆中IL-6水平（P〈0.0001）。结论 IL-6与结核菌感染的临床转归、结核病严重程度相关,是局部病灶炎症反应的重要作用因子。     

恩施自治州病原菌耐药分析

随着耐药形势的日趋严峻，抗生素的耐药性已成为全球性的严重问题。为此，我们对1987-2003年我州及周边地区从患者临床标本中检出的病原菌及药敏资料进行分析。     

涂阳活动性肺结核患者HRCT评分与细菌学及免疫学相关性分析

目的探讨HRCT评分标准在诊断活动性肺结核中的应用价值。方法对42例痰涂阳性肺结核患者,进行HRCT检查和评分,每侧肺组织划分为为三个区域,分别对各类型CT征象所累及范围进行评分;分析评分结果与痰细菌学检查结果和外周血结核菌特异性IFN—y水平之间的相关性。结果根据结核菌涂片结果分为4组,其中,AFB（＋）12例、AFB（＋＋）11例、AFB（＋＋＋）10例、AFB（＋＋＋＋）9例,相关性分析显示（1）HRCT总评分与痰阳性分级有正相关性（r=0．9661 P〈0．0001）：（2）HRCT总评分与结核菌抗原ESAT6、P4-6、P8．10特异性IFN—y释放水平均呈正相关（r=0．4805,P=0．0017,r=0．4451,P=0．0083,r=0．4211,P=0．0131）。结论以活动性肺结核患者复杂的CT征象的范围为基础的HRCT评分标准与细菌学及免疫学均呈正相关,表明该HRCT评分标准对临床诊断治疗和疗效判定具有一定指导意义。     

少数民族区域医疗机构临床检验执业相关分析

目的调查并掌握恩施自治州临床检验中心行政管辖6县2市共130所医院341名医学检验人员在医学检验专科建设、人才培养、设备购置、检测项目、实验室管理等方面的整体现状,竭力争取政策、壮大队伍、服务基层、服务百姓。方法实地调查与检查评审有机结合,收集资料与直面交流结合,精确统计与数据处理结合等。结果三级甲等医院检验科管理精细;二级医院检验业相对稳固;民营医院检验业良性运转;一级医院检验专业发展堪忧。结论县、市及州二、三级等级医院检验事业发展向好。农村乡镇医院检验人才与设备匮乏,州域临床医学检验行业行政管理力度不够,检验事业创新发展亟待努力。     

结核抗原特异性IFN-γ ELISPOT检测技术用于诊断HIV感染者人群中结核潜伏感染的研究

目的 探讨结核分枝杆菌抗原特异性IFN-γ酶联免疫斑点(ELISPOT)检测技术在HIV感染者中用于诊断结核潜伏感染的应用价值.方法 运用自行研发的结核分枝杆菌抗原特异性IFN-γ ELISPOT检测方法对110例确诊的HIV感染者及205例HIV阴性健康志愿者的外周血结核特异性IFN-γ释放水平进行检测,并同时进行结核菌素皮肤试验(研).结果 ELISPOT在HIV感染和HIV/AIDS正在接受抗病毒治疗人群中的阳性率分别为24.5%和29.8%,明显高于HIV阴性健康人群7.3%(P＜0.001);对多种不同部位多肽抗原刺激以P8.10的敏感性最高,但与其他抗原的差异无统计学意义(P＞0.05);不同CD4细胞计数水平对ELISPOT检测结果尤影响(P＞0.05);PPD试验在HIV感染人群中的阳性率远远低于ELISPOT检测方法,其差异有统计学意义(P＜0.0001).结论 结核分枝杆菌抗原特异性IFN-γ ELISPOT检测技术在艾滋病合并结核潜伏感染的早期诊断中有很大的应用价值,推荐用于艾滋病合并结核潜伏感染的辅助诊断.     

肺结核患者外周血记忆性T细胞及B细胞亚群的检测分析

目的探讨肺结核患者外周血记忆性T及B细胞亚群的表达水平。方法采用流式细胞仪检测肺结核患者（TB）、潜伏感染者（LTBI）、健康人（HD）外周血记忆性T、B细胞亚群水平及B细胞表达水平;利用Elispot技术检测外周血单个核细胞（PBMC）结核菌抗原特异性IFN-r分泌水平。结果流式结果显示,TB及LTB1的CD4＊及CD8＊中心记忆性T细胞（Tcm）显著增多,以CD4＊尤为显著;相反,效应记忆性T细胞（Tem）减少。TB记忆性B细胞均低于HD和LTBI（P〈0．01）;而在HD与LTBI及TB这三组CD19＆细胞占淋巴细胞比例中都有明显差异（P〈0．01;P〈0．001）。CD4’／CD8’Tcm与IFN-γ ELISPOT结果成正相关。结论肺结核患者外周血中存在着记忆性T及B细胞亚群的紊乱,中心记忆性T细胞增多,效应记忆性T细胞减少,记忆性T、B细胞的数量及免疫状态与结核菌感染的不同转归有关,记忆性T、B细胞在结核病发病机制中发挥着重要作用。