ECRG2基因对人类纤维肉瘤HT1080细胞侵袭迁移能力的影响

目的探讨ECRG2基因在人类纤维肉瘤侵袭和转移过程中的作用。方法应用RNA干扰技术抑制内源性ECRG2基因在人类纤维肉瘤HT1080细胞中的表达,建立ECRG2基因在该细胞中的可诱导表达系统,Westernblotting方法观察细胞ECRG2蛋白表达水平的变化,细胞划痕实验和Transwell侵袭实验观察HT1080细胞迁移、侵袭能力的变化。结果Westernblotting检测筛选得到敲除内源性ECRG2基因的最佳Tet—On可诱导表达克隆。细胞划痕实验和Transwell侵袭实验发现,敲除内源性ECRG2基因明显促进HT1080细胞的侵袭迁移能力,而表达外源ECRG2基因的HT1080细胞侵袭、迁移能力显著下降。结论ECRG2基因与人类纤维肉瘤的侵袭转移潜能相关,外源ECRG2基因的表达可明显抑制人类纤维肉瘤HT1080细胞的侵袭、迁移能力。     

医学细胞生物学实验教学改革之探索

细胞生物学是生命科学领域重要的基础学科，也是医学教育中重要的基础课程。近年来，细胞生物学与分子生物学、医学遗传学密切联系，使细胞生物学发展进入了一个新阶段，即分子细胞生物学。为适应学科发展的需要，2004年以来，教研室陆续对细胞生物学实验课进行了改革。根据学生的不同水平，适当删去或增加一些内容，突出了以培养实验技能为主的特点，规范了细胞生物学实验教学。     

抗氧化维生素对大鼠脂代谢及清道夫受体表达的影响

目的 :　观察不同水平的 VE、VC对 SD大鼠血脂代谢、脂质过氧化和清道夫受体( SR) m RNA表达的作用。方法 :　将诱导成高脂模型的 SD雄性大鼠分为 5个组 ,分别饲以含不同剂量的 VE( 1 5 0 mg/kg diet、35 0 mg/kg diet)、VC( 1 0 0 0 mg/kg diet、2 0 0 0 mg/kg diet)高脂饲料和阳性对照组 8w。结果 :　 VE组和 VC组低剂量均可降低血清中 TC、LDL- C、致动脉粥样硬化指数 ( AI)和 Apo- B及脂质过氧化物水平 ,并可升高 HDL- C、HDL - C/LDL- C,同时能抑制肺组织SR- m RNA的表达 ;而增高 VC剂量对上述指标无显著性作用。结论 :　VE、VC能降低血清 TC与 LDL- C、抑制 LDL氧化和 SR- m RNA表达。     

煤工尘肺与血液中前列腺素E_2水平的关系

用放射免疫方法检测不同期别的煤工尘肺（ＣＷＰ）患者血浆中前列腺素Ｅ２（ＰＧＥ２）的水平，同时用体外细胞培养方法将煤尘作用于肺泡巨噬细胞（ＡＭ）后对其分泌ＰＧＥ２的情况进行比较。结果表明：ＣＷＰ患者血浆中ＰＧＥ２的水平明显高于对照组；不同期别的病人血浆中ＰＧＥ２含量不一样．表现为Ⅰ＞Ⅱ＞Ⅲ，经统计分析．Ｐ＜０．０１．体外实验显示随着煤尘对ＡＭ作用浓度增加．培养时间延长，ＡＭ培养上清液中ＰＧＥ２含量升高。体内、体外的研究结果均证实煤尘作用于ＡＭ后，可以改变ＡＭ的分泌功能，使其分泌大量的ＰＧＥ２．提示：ＣＷＰ的发生发展与血浆中ＰＧＥ２的水平有一定的关系。     

食管癌相关基因新作用伙伴p53的鉴定

残根残冠牙是临床上常见的大面积牙体缺损，以往大多数被拔除。近年来，桩核冠修复技术得到不断的发展和提高，使过去认为需拔除的残根残冠得以保留。但是，如果治疗技术掌握不好，操作不当，同样可致残根残冠保存修复失败。2003--2007年我院就诊患者中残根残冠保存修复失败23例，现报告如下。     

ECRG2基因缺失通过p53途径导致中心体过度复制

目的 探讨ECRG2基因调控中心体复制的分子机制.方法 采用质谱法筛选ECRG2基因作用伙伴;采用免疫共沉淀法鉴定ECRG2与p53发生相互作用的位点;采用Western印迹法检测p53转录活性;采用免疫荧光技术观察ECRG2基因对p53中心体定位能力的影响.结果 结果显示p53是ECRG2基因的一个新的作用伙伴.ECRG2基因通过其N端20个肽与p53发生相互作用,通过p53参与中心体复制.ECRG2基因缺失不但促进p53蛋白泛索化降解程度,降低p21蛋白活性,提高cydinE/CDK2活性,从而启动了中心体过度复制,而且使p53蛋白无法定位于中心体,丧失了对中心体再复制的抑制作用.结论 ECRG2基因通过p53参与中心体复制,一方面,ECRG2通过p53/p21/cyclin E/CDK2途径调控中心体复制;另一方面,ECRG2也可影响p53中心体定位能力,参与p53对中心体再复制的抑制作用.     

不同水平维生素E和β-胡萝卜素对Cu~(2 )氧化修饰低密度脂蛋白的影响

研究不同浓度的维生素 E(VE)和β-胡萝卜素 (βC)对 Cu2 诱导的氧化修饰低密度脂蛋白 (L DL )作用的影响 ,通过测定硫代巴比妥酸反应物质 (TBARS)、L DL 的电泳迁移率 (Rf)以及荧光物质 (L ipofusin)扫描 ,反映 L DL的氧化修饰程度。结果表明 :VE、βC均可减少 TBARS的产生、减小 L DL的 Rf,并且具有剂量 -效应关系 ,随浓度增加 ,VE抑制作用加强而 βC抑制作用减弱 ,而且 VE对 TBARS的影响比 βC小 ,对 Rf的影响比βC大。二者对荧光物质均有降低作用 ,但无剂量 -效应关系。提示 VE、βC均可不同程度的抑制Cu2 氧化修饰 L DL 的作用 ,在降低机体脂质过氧化反应、减少氧化修饰型 L DL(OX- L DL)的形成方面具有重要作用 ,但二者作用机理可能并不相同     

ECRG2基因缺失导致纺锤体检测点功能缺陷

目的 观察ECRG2基因对纺锤体检测点功能的影响.方法 利用基因敲除和免疫荧光染色技术观察ECRG2基因在细胞内的定位及生物学功能.结果 ECRG2基因在有丝分裂间期分布于中心体、有丝分裂期分布于着丝粒处,可能参与中心体复制和纺锤体检测点功能.siRNA技术敲除ECBG2基因细胞导致纺锤体检测点功能丧失,在nocodazole处理时无法阻断细胞于有丝分裂期而进入下一细胞周期,最终导致染色体不稳定性和非整倍体细胞出现.结论 ECRG2在纺锤体检测点中起重要作用,对确保染色体稳定性必不可少;ECRG2基因的缺失可能是肿瘤细胞染色体不稳定性和非整倍体细胞产生的重要原因.     

ECRG2基因通过干扰uPAR与β1整合素的相互作用抑制肿瘤细胞侵袭迁移

目的 探讨ECRG2影响人成纤维肉瘤HT1080细胞侵袭迁移的分子机制. 方法 利用ECRG2可诱导表达系统观察该基因对uPAR与β1整合素相互作用及下游Src/MAP信号通路的影响. 结果 ECRG2基因通过干扰uPAR与β1整合素的相互作用、阻断uPAR/β1/Src/MAP信号通路,从而抑制HT1080细胞的侵袭迁移;ECRG2基因缺失导致uPAR/β1整合素/Src/MAP信号通路活性增强,促进HT1080细胞的侵袭迁移. 结论 ECRG2基因通过干扰uPAR/β1整合素/Src/MAP信号通路参与肿瘤细胞侵袭迁移的调控.