外源性硫化氢调节TGF-β1/Smad7信号通路改善高同型半胱氨酸血症所致的大鼠心肌纤维化

目的:观察外源性硫化氢(hydrogen suifide,H2S)对高同型半胱氨酸血症(hyperhomocysteinemia,HHcy)诱导的大鼠心肌纤维化及转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)和Smad7蛋白表达的影响.方法:将40只成年雄性SD大鼠随机均分为对照(Control)组、模型(HHcy)组、H2S干预模型(HHcy+H2S)组和H2S对照(H2S)组,每组10只.本实验模型大鼠的建立通过将L-蛋氨酸(10 g/L)加入大鼠的饮用水,持续10周喂养建立.建模成功后,HHcy+H2S组及H2S组大鼠每日经腹内注射硫氢化钠(sodium hydrosulfide,NaHS)溶液,持续干预4周.各组大鼠心肌胶原纤维沉积情况由Masson染色法观察,心肌组织中Ⅲ型胶原的表达情况由免疫组织化学染色法检测,CBS、TGF-β1和Smad7蛋白的表达情况通过Western blot检测.结果:与对照组相比,模型组心肌细胞排列紊乱、胶原沉积明显增加,心肌组织中Ⅲ型胶原沉积明显增加(P=0.000),TGF-β1蛋白表达明显升高(P=0.004),CBS(P=0.006)及Smad7(P=0.001)蛋白表达水平明显下调;与模型组相比,HHcy+H2S组大鼠心肌细胞排列相对整齐、胶原沉积相对减轻,组织中Ⅲ型胶原沉积减轻(P=0.003),TGF-β1蛋白表达相对下调(P=0.006),CBS(P=0.005)及Smad7(P=0.000)蛋白表达水平增加.结论:外源性硫化氢可以改善HHcy诱导的大鼠心肌纤维化,其调节机制可能与TGF-β1/Smad7信号通路有关.     

外源性硫化氢通过上调SIRT1延缓心肌早衰抑制尿毒症大鼠心肌纤维化

目的 探讨外源性硫化氢（H₂S）对尿毒症心肌病（UCM）大鼠心肌早衰和心肌纤维化的影响。方法 雄性SD大鼠48只按随机数字表法分成假手术组（Sham组）、模型组（UCM组）、H₂S治疗组（UCM+H₂S组）以及H₂S对照组（H₂S组）。其中UCM组、UCM+H₂S组用经典5/6肾切除法造模,而Sham组及H₂S组仅游离双肾。建模后UCM+H₂S组和H₂S组大鼠每日注射硫氢化钠（NaHS,50 μmol/kg）,Sham组和UCM组注射同剂量生理盐水。干预8周,心脏超声检测大鼠左心室的短轴缩短率（LVFS）;Masson染色法评估心肌纤维化情况,计算胶原容积分数（CVF）;免疫组化染色检测心肌Ⅲ型胶原表达;β-半乳糖苷酶染色检测衰老心肌细胞;蛋白免疫印迹法检测心肌中沉默信息调节因子-1（SIRT1）、NOD样受体家族3（NLRP3）、白细胞介素（IL）-1β、P21、P19、P53蛋白表达。结果 与Sham组比较,UCM组LVFS明显下降,心肌CVF、Ⅲ型胶原的阳性表达率、β-半乳糖苷酶染色阳性率升高,NLRP3、IL-1β、P19、P21及P53表达增多,SIRT1蛋白表达减少（P<0.05）;而UCM+H₂S组较UCM组大鼠心肌CVF、Ⅲ型胶原、β-半乳糖苷酶染色阳性率降低,NLRP3、IL-1β、P19、P21及P53蛋白表达量减少,SIRT1蛋白表达增多（P<0.05）。结论 外源性H₂S能改善尿毒症大鼠心肌纤维化,机制可能与其上调SIRT1抑制心肌早衰有关。