反相高效液相色谱法测定鼠肝微粒体中依普黄酮及其在代谢研究中的应用

目的　建立鼠肝微粒体中依普黄酮的反相高效液相色谱测定法,以研究依普黄酮的体外代谢。方法　本法中依普黄酮与鼠肝微粒体共孵育之后用氯仿提取,采用地非三唑为内标,以Nova parkC₁₈柱为分析柱,乙腈0.1%醋酸溶液(60∶40)为流动相,流速1.0mL·min^-1,紫外检测波长为250nm。结果　依普黄酮在1～100μg·mL^-1内线性关系良好(r=0 .9998)。检测限为0.02μg·mL^-1(S/N≥3) ,定量限为0.1μg·mL^-1(RSD<5.0% ,S/N=8,n=3)。方法回收率达96 .90 %～112 .8% ,日内,日间RSD分别<8.0%和<10% (n=5)。结论　此法简便,准确,可用于依普黄酮的体外代谢研究     

研究性自主实验和设计性实验的开设与尝试

通过优化实验结构，开设设计性实验和研究性自主实验，发挥学生在实验中的主体作用，综合评定实验成绩等手段，对药物分析课程的实验教学进行改革。实践表明设计性实验和研究性自主实验充分发挥了学生的主观能动性，提高了学生的分析问题、解决问题和创新思维能力。     

地非三唑对大鼠肝细胞细胞色素P450 CYP1A1/2的诱导作用

目的 试从mRNA表达水平阐明地非三唑对鼠肝微粒体中细胞色素P450 CYP1A1/2的诱导机制。方法 给SD大鼠腹腔注射地非三唑，采用Trizol法提取大鼠肝脏RNA,用RT-PCR测定经地非三唑处理1, 2及4 d的鼠肝中细胞色素P450 CYP1A1, CYP1A2 mRNA的表达水平。结果 地非三唑处理不同时间的鼠肝细胞中细胞色素P450 CYP1A1, CYP1A2 mRNA的表达水平比空白对照组明显增加，空白对照组CYP1A1吸光度比值为0.270±0.040, 诱导1, 2及4 d的吸光度比值分别为0.343±0.055, 0.417±0.045及0.603±0.083；空白对照组的CYP1A2吸光度比值为0.613±0.189, 而诱导1，2及4 d的吸光度比值分别为1.510±0.226, 3.057±0.518及4.120±0.458。随着诱导时间的增加，细胞色素P450 CYP1A1及CYP1A2 mRNA的表达也逐步增加，诱导时间与表达水平之间存在一定的线性关系,相关系数分别为0.9984和0.9563。结论 地非三唑对细胞色素P450 CYP1A1/2 mRNA表达具有诱导作用。     

反相高效液相色谱法测定他克莫司软膏含量

目的建立用反相高效液相色谱法测定国产他克莫司软膏含量方法。方法用28%乙腈在80℃水浴中提取他克莫司软膏,以反相高效液相色谱法测定含量。色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶柱(Shim-pack VP-ODS柱,150mm×4.6mm,5μm),检测波长210nm,流动相为异丙醇∶乙腈∶磷酸溶液(pH3.5)(35∶2∶63),流速为1ml/min,柱温为50℃,进样量为100μl。结果辅料对他克莫司含量测定无干扰,他克莫司与相邻峰之间的分离度良好。线性研究表明,在4.44~44.45μg/ml范围内他克莫司线性关系良好,相关系数为1.0000(n=6)。他克莫司的检测限与定量限分别为0.0889与0.222μg/ml。回收率平均值为100.2%,相对标准偏差为1.5%(n=9)。结论本法简便准确,重现性高,适用于产品的质量控制。     

地非三唑与甾体激素类药物的体外相互作用

目的观察地非三唑与甾体激素类药物的代谢性相互作用，为临床合理用药提供科学依据。方法选择在临床上可能与地非三唑合用的甾体激素类药物，如米非司酮、雌二醇、醋酸甲羟孕酮、黄体酮和炔诺酮等进行试验。分别将它们与地非三唑在鼠肝微粒体中共孵育，采用反相高效液相色谱法测定孵育液中地非三唑和共孵育药物的剩余浓度或代谢产物浓度，计算代谢抑制常数值。结果地非三唑对米非司酮、雌二醇、醋酸甲羟孕酮、黄体酮以及炔诺酮的代谢抑制常数K_i分别为(201.3±1.0)，(94±4)，(128.7±2.2)，(64±5)和(80±4) μmol·L^-1；雌二醇、醋酸甲羟孕酮、黄体酮以及炔诺酮对地非三唑的代谢抑制常数K_i分别为(66.9±2.2)，(60.0±2.3)，(163±10)和(88±5) μmol·L^-1。结论地非三唑与甾体激素类药物之间均有不同程度的代谢相互抑制作用。     

卡托普利迟释型缓释片体外释放和体内吸收相关性研究

 目的卡托普利迟释型缓释片的体外释放和体内吸收的比较。方法以0.1 mol·L^-1的盐酸溶液为释放介质,转速 100 r·min^-1,在预定时间取样,HPLC测定卡托普利迟释型缓释片的体外释放度。给Beagle犬交叉服用单剂量卡托普利迟释型缓释片(CDSR)和普通缓释片(CSR),定时抽取血样,采用柱前衍生-固相萃取-HPLC测定血浆样品中卡托普利浓度,以Wagner-Nelson法计算药物的体内吸收百分数。结果迟释型缓释片在体外释放3 h开始起释,5 h时累积释放率仅10％,而普通缓释片1 h即释放20％。Beagle犬服用迟释型缓释片后2 h内血浆中未检测到药物,3～5 h时血药浓度达最大;而普通缓释片服用 0.5 h后血浆中即可检测到药物,1～3 h时血药浓度达最大。结论卡托普利迟释型缓释片的体外释放和体内吸收有一定相关性。     

中国汉族人群S-美芬妥英4''-羟化酶的表型与基因分析

目的:研究中国汉族人群S-美芬妥英4'-羟化代谢遗传多态性.方法:以美芬妥英为探针药物采用手性毛细管气相色谱法测定尿中S-/R-MP浓度比值, 对90名志愿者进行了表型分型测定,应用PCR技术对其中的26名志愿者进行了S-美芬妥英4'-羟化酶(CYP2C19)基因分析.结果:表型分析结果,11人属慢代谢者(PM),S/R比值0.95;基因分析结果,6人为野生型纯合子(wt/wt);10人为杂合子(wt/m1和wt/m2),9人为CYP2C19m1突变型纯合子(m1/m1),1人为两突变型杂合子(m1/m2).结论:表型分析与基因分析结果显示了很好的相关性,本实验测得慢代谢者的频发率为12.2%,与文献报道相符.     

2—丙酰—6—甲氧基萘的气相色谱测定法

2-丙酰-6-甲氧基萘(简称丙酰物)是非甾体消炎镇痛药萘普生一条合成路线的重要中间体。本文采用气相色谱法,以正二十四烷为内标,测定丙酰物的含量,获得较满意结果。一、材料与方法 1.仪器和试药: 岛津GC-15A气相色谱仪,C-R4A数据处理机;正二十四烷系色谱试剂,含量≥99％;丙酰物对照品系本系药化教研室提供,含量99％。     

顶空GC测定盐酸法舒地尔中残留溶剂

目的 建立盐酸法舒地尔中甲醇、二氯甲烷和乙醇残留量的测定方法。方法 采用顶空毛细管气相色谱法,以Agilent HP-INNOWAX毛细管柱(30 m´0.32 mm, 0.5 µm)为分析柱,柱温为程序升温：起始温度35 ℃,保持12min,以40 ℃·min^-1升温至200 ℃,保持5 min;载气为高纯氮气,柱流速1.0 mL·min^-1;气化室温度200 ℃;FID检测器,检测室温度250 ℃。结果 外标法测得甲醇、二氯甲烷和乙醇的平均加样回收率分别为96.21%、77.96%和95.56%。样品中检测到的甲醇、二氯甲烷和乙醇残留量均远在药典规定的限量以下。结论 建立的方法能有效控制盐酸法舒地尔原料药中甲醇、二氯甲烷和乙醇的残留量。     

厄多司坦原料药中有关物质的测定方法

建立厄多司坦原料药中有关物质的反相高效液相色谱测定方法。以ODS-SunFire(250 mm×4.6 mm ID,5μm)为分析柱;甲醇-乙腈-0.01 mol·L 1枸橼酸溶液(pH 2.5)(20∶4∶76)为流动相,流速为1 mL.min 1;检测波长254 nm。采用加或不加校正因子的主成分自身对照法控制原料药中有关物质。在选定的色谱条件下,厄多司坦与有关杂质分离良好。以主成分计,检测限为0.2μg.mL 1(S/N=3)。该方法能够有效地控制厄多司坦原料药中的有关物质。