霜天蛾昆虫变应原多克隆抗体的制备及免疫特性分析

目的 制备兔抗霜天蛾变应原多克隆抗体,分析其与特异性过敏患者血清抗体成分的异同,为免疫筛选cDNA文库,制备基因重组霜天蛾变应原奠定基础.方法 应用霜天蛾变应原提取液免疫家兔获得霜天蛾变应原多克隆抗体,用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定混合免疫兔血清抗体效价:应用免疫印迹的方法对比分析免疫兔血清与特异性过敏患者血清抗体成分的异同.结果 混合免疫兔血清效价经ELISA检测,效价>1:10 000,免疫印迹检测兔抗血清免疫球蛋白G相似文献   

悬铃木属花粉的纯化及免疫活性分析

目的对悬铃木属花粉变应原进行初步纯化并对其主要成分进行免疫学活性分析。方法悬铃木属花粉变应原粗制浸液经过凝胶过滤层析，收集主要蛋白质，SDS-PAGE检测各段蛋白质分子量，并用免疫印记法分析7例悬铃木属花粉过敏的支气管哮喘患者血清。结果悬铃木属花粉变应原粗制液经层析柱洗脱得两个洗脱峰，第一峰及第二峰升段富含蛋白，而第二峰降段蛋白含量甚微，收集各段进行SDS—PAGE。出现6条蛋白区带，分子量分别为7、50、35、39、22和16kd。第一峰主要含22-71kd蛋白质，峰2升段以14-16kd之蛋白质为主。对7例花粉过敏的支气管哮喘患者血清免疫印记分析可见4条sIgG反应带，蛋白分子量为50、39、22和16kd，病人血清结合百分比分别为100％、28．57％、57．14％和14．29％。结论悬铃木属花粉变应原含有6种主要蛋白成分，第一峰的50、39和22kd的蛋白质为主要致敏组分，第二峰升段的16kd蛋白质为次要致原。     

霜天蛾昆虫变应原多克隆抗体的制备及免疫特性分析

目的制备兔抗霜天蛾变应原多克隆抗体,分析其与特异性过敏患者血清抗体成分的异同,为免疫筛选cDNA文库,制备基因重组霜天蛾变应原奠定基础。方法应用霜天蛾变应原提取液免疫家兔获得霜天蛾变应原多克隆抗体,用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定混合免疫兔血清抗体效价;应用免疫印迹的方法对比分析免疫兔血清与特异性过敏患者血清抗体成分的异同。结果混合免疫兔血清效价经ELISA检测,效价>1:10000,免疫印迹检测兔抗血清免疫球蛋白G(IgG)可以特异性识别霜天蛾10种蛋白组分,相对分子质量分别为100000、92000、79000、74000、66000、49000、43000、36000、25000和16000;患者血清IgG可以识别6种蛋白组分,相对分子质量分别为79000、74000、66000、49000、36000和25000。结论制备出的兔抗血清与特异性霜天蛾过敏患者血清特异性识别霜天蛾变应原的结果接近,比患者可以识别更多的蛋白条带,可以应用免疫兔血清作为筛选霜天蛾cDNA文库的探针及重组霜天蛾变应原表达蛋白的鉴定分析。     

霜天蛾昆虫变应原的变应原性及免疫原性分析

目的 分析霜天蛾主要变应原的变应原性和免疫原性,为进一步制备霜天蛾标准化变应原疫苗和基因工程重组霜天蛾昆虫变应原奠定基础.方法 应用不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳对霜天蛾变应原蛋白成分进行分离,对9例霜天蛾过敏患者血清分别进行IgE、IgG免疫印记分析,并对比分析IgE、IgG反应变应原成分.结果 霜天蛾提取液经SDS-PAGE染色后显示出20余种蛋白质成分,相对分子质量12 000～128 000.免疫印迹分析结果显示具有变应原性的蛋白相对分子质量及反应率分别为:74 000(88.9%),66 000(22.2%),49 000(22.2%),36 000(77.8%),25 000(33.3%),具有免疫原性的蛋白相对分子质量及反应率分别为:79 000(33.3%),74 000(66.7%),66 000(22.2%),49 000(22.2%),36 000(44.4%),25 000(55.6%).结论 霜天蛾变应原中具有较强变应原活性的蛋白质相对分子质量为74000和36000,具有较强免疫原活性的蛋白质相对分子质量为74 000和25 000的蛋白质,是霜天蛾过敏患者特异性过敏诊断和治疗的主要成分.     

红细胞分布宽度和血清胱抑素C对COPD继发肺动脉高压的预判价值比较

目的 比较红细胞分布宽度 (RDW)和血清胱抑素 C (Cys-C)对 COPD 继发肺动脉高压的预判价值.方法 纳入2014年5月至2016年4月就诊的114例单纯COPD患者和66例COPD合并肺动脉高压患者,测量其血清 RDW 和 Cys-C 水平,比较并评价它们对肺动脉高压的预测价值.结果 合并组患者的血清 RDW和Cys-C水平均显著高于单纯 COPD患者 (P<0.05);RDW和 Cys-C预测COPD合并肺动脉高压的准确性均是74%,两者的敏感性、特异性和准确性等指标差异均无统计学意义 (P>0.05);血清 RDW水平与肺动脉压力呈正相关 (r=0.416,P =0.002),Cys-C水平与肺动脉高压的严重程度无显著相关性 (r=0.225,P =0.307).结论 虽然 RDW和 Cys-C 对 COPD合并肺动脉高压的预测准确性无明显差别,但 RDW与肺动脉压力显著相关,因此在临床中更具应用价值.     

哮喘患者气传昆虫变应原疫苗的实验

目的:研究西安地区哮喘患者气传致敏昆虫变应原种类,为哮喘病因学研究及防治提供实验依据.方法:制备13种气传优势昆虫变应原疫苗,应用这些昆虫变应原疫苗给哮喘患者300例和正常对照者100例分别做皮肤挑刺试验(SPT),及应用BSA-ELISA法测定昆虫SPT阳性患者的sIgE.结果:哮喘患者300例气传昆虫变应原疫苗SPT总阳性率为60%,显著高于正常对照(P<0.01);哮喘组患者对粉蝶、棉铃虫、霜天蛾等10种气传昆虫变应原疫苗的SPT阳性率在30%以上;SPT阳性的哮喘患者气传昆虫变应原sIgE阳性率达85%以上,对照组仅为6%,两组之间有显著性差异(P<0.01).结论:粉蝶、棉铃虫、霜天蛾等10种气传昆虫是西安地区哮喘的主要气传致敏昆虫,可能是夏末秋初哮喘发作的致敏原.