铜绿假单胞菌LasⅠ基因反义核酸载体的构建及生物学作用研究

目的 构建LasⅠ基因反义核酸原核表达载体pUCP18/lasⅠantisense,转化入铜绿假单胞菌并分析其生物学作用.方法 PCR扩增LasⅠ基因序列,反向克隆法构建LasⅠ基因的反义核酸原核表达载体pUCP18/lasⅠantisense,并转化铜绿假单胞菌.通过检测转化菌的LasB和LasR基因表达,测定外毒素的活性和绿脓菌素的表达等指标,分析pUCP18/lasⅠantisense的生物学作用.结果 成功构建pUCP18/lasⅠantisense并转化铜绿假单胞菌,且有效表达,转化菌的毒力因子弹性蛋白酶、外毒素和绿脓菌素表达水平均降低.结论 pUCP18/lasⅠantisense可以降低铜绿假单胞菌毒力因子表达,提示LasⅠ基因可作为医院内铜绿假单胞菌感染治疗的一个新的靶点.     

PNP—TK融合自杀基因及PNP单自杀基因对肝癌细胞杀伤效率

目的分析PNP—TK融合自杀基因系统及PNP单自杀基因系统对肝癌细胞的杀伤作用及二者对肝癌细胞潜在的杀伤机制。方法构建融合基因表达我体pcDNA3．0／PNP—TK。经酶切、PCR及测序鉴定重组体。G418筛选获得稳定转染了pcDNA3．0／PNP-TK的HepG2细胞克隆。RT—PCR和Western Blotting检测融合基因在HepG2细胞中的表达。台盼兰排斥法检测细胞的生长曲线,MTT法检测细胞对相应前药的敏感性及分别在一种和两种前药作用下所导致的旁观者效应。结果融合基因片段PNP—TK正确插入了pcDNA3．0载体中,pcDNA3．0,PNP-TK在肝癌细胞株HepG2中实现了表达。抗性细胞克隆对相应的前药十分敏感。在两种前药的联合作用下。pcDNA3．0／PNP-TK所导致的旁观者效应明显强于只给予MeP-dR一种前药以及pcDNA3．0／PNP单基因系统所致的旁观者效应。结论具有双自杀基因功能的表达载体pcDNA3．0／PNP-TK对肝癌细胞的杀伤效果优于PNP单自杀基因系统。     

广东省预防医学会流行病学专业委员会的发展历程与成就

1.学会成立的时代背景新中国成立初期,为了解决人民群众迫在眉睫的健康问题,党和政府提出了包括"预防为主"在内的四大卫生工作方针,作为预防医学主干学科和基础学科的流行病学在做出巨大贡献的同时也得到了很大的发展。在此背景下,1980年7月中华医学会第一次全国流行病学学术会议暨流行病学学会成立大会在哈尔滨举行,这是新中国成立后国内流行病学界的第一次盛会,"中华医学会流行病学学会"的成立,为我国流行病学的发展创造了良好条件。     

铜绿假单胞菌多药耐药危险因素分析

铜绿假单胞菌是医院内感染的常见病原体,其多药耐药性已成为临床治疗的棘手问题.目前,国内对铜绿假单胞菌感染相关危险因素的研究较多,而对其多药耐药危险因素方面的研究较少~([1-2]).     

纳入突发公共卫生事件应急处理课程完善流行病学教学体系

目的:预防医学生未来必须掌握应对突发公共卫生事件的基本知识和技能,为了教育我们的学生,我们特别设置了新发传染病、自然灾害和生物恐怖等应急处理课程。方法:抽取部分国内外重点医学院校,查看其课程设置,并结合当前新发传染病和生物恐怖应急处理的有关文献,经教研室和部分CDC工作人员的研讨,制定了相应的医学生授课规划。结果:形成以小组为基础的三小时突发公共卫生事件的现场模拟训练和两周的突发公共卫生事件课程。结论:通过论证,各参评专家一直认为本课程必将为医学生应对可能的新发传染病和生物恐怖提供最基本的应对知识和技能,此课程的设置必将推动流行病学教学体系的完善。     

武汉市农村居民2018年健康素养3个维度调查及影响因素

目的 了解武汉市农村居民2018年健康素养水平,分析其影响因素,为武汉市有针对性加强健康教育和健康管理提供依据。方法 采用分层多阶段与人口规模成比例抽样方法,对武汉市15个行政区农村居民进行健康素养调查,用单因素卡方检验和多因素Logistic回归分析武汉市农村居民健康素养3个维度具备率的影响因素。结果 武汉市农村居民健康素养具备率12.2%,基本知识和理念维度具备率25.9%,健康生活方式与行为维度具备率8.4%,健康技能维度具备率25.8%。其中文化程度是3个维度具备率主要影响因素,与不识字或识字很少相比,基本知识和理念维度具备率初中（OR=3.040）、高中（OR=5.496）、大专及以上（OR=13.224）均有增高,健康生活方式与行为维度具备率高中（OR=4.192）、大专及以上（OR=7.116）文化程度明显增高,健康技能维度具备率小学（OR=4.288）、初中（OR=6.595）、高中（OR=14.366）、大专及以上（OR=16.388）文化程度均增高;与家庭年收入˂5万相比, 5~10万的农村居民基本知识和理念具备率增高（OR=1.571）;与本地户籍相比,非本地户籍的基本知识和理念、健康生活方式与行为具备率均增高（OR=1.700、2.307）;与15~24岁相比,其他年龄段基本知识和理念具备率均有增高（25~34岁：OR=2.551,35~44岁：OR=2.883,45~54岁：OR=3.227,55~64岁：OR=2.518,65~69岁：OR=2.576）。结论 武汉市农村居民健康素养水平较低,应针对文化程度低的居民进行知识宣教和培训,提高整体健康素养。     

PNP-TK融合自杀基因系统对肝癌细胞杀伤作用的实验研究

目的分析PNP—TK融合自杀基因系统对HepG2肝癌细胞的杀伤作用及其对肝癌细胞的杀伤机制。方法利用重组PCR定点诱变法制备PNP—TK融合基因,将其插入真核表达载体pcDNA3．0中,构建融合基因表达载体pcDNA3．0／PNP—TK,经酶切、PCR及测序鉴定重组体,G418筛选获得稳定转染了pcDNA3．0／PNP—TK的抗性细胞克隆。RT-PCR和WesternBlotting检测PNP—TK基因在HepG2细胞中的表达。台盼兰排斥法测定细胞生长曲线,MTF法检测细胞对相应前药的敏感性及分别在一种和两种前药作用下所导致的旁观者效应。结果融合基因片段PNP—TK正确插入了pcDNA3．0载体中,pcDNA3．0／PNP—TK在肝癌细胞株HepG2中实现了表达。细胞抗性克隆对相应的前药十分敏感。在两种前药的联合作用下,pcDNA3．0／PNP—TK对肝癌细胞产生了良好的旁观者效应。结论具有双自杀基因功能的表达载体pcDNA3．0／PNP-TK对肝癌细胞HepG2有着良好的杀伤作用,有望将其应用于肝癌体内治疗。     

肺部感染铜绿假单胞菌耐药性与抗菌药物治疗效果研究

目的 分析广州地区肺部感染患者分离的铜绿假单胞菌（PA)耐药性及整合子携带情况，探讨其抗菌药物治疗效果及影响因素。方法 回顾性调查2008年9月-2010年12月广州市3所三级甲等医院呼吸内科确诊为PA肺部感染患者的病历资料。收集上述患者标本分离的PA菌株，检测其对常用抗菌药物的敏感性；采用聚合酶链反应（PCR）法扩增菌株整合子片段，分析整合子的类型；分析影响PA肺部感染患者预后的可能危险因素。结果共收集PA 114株,检出多重耐药菌47株（41.23%）；71株（62.28%）PA检出Ⅰ类整合子。患者预后：21例（18.42%）治愈，63例（55.26%）好转，30例（26.32%）死亡。除庆大霉素、阿米卡星、妥布霉素、哌拉西林及哌拉西林/他唑巴坦外，Ⅰ类整合子阳性菌株对常用抗菌药物的耐药率明显高于Ⅰ类整合子阴性菌株（均P＜0.05）。影响PA肺部感染患者预后的危险因素包括整合子阳性、多重耐药菌株、不适当的经验性治疗、联合使用3类或以上抗菌药物、混合感染、碳青霉烯类抗生素的使用，而联合使用2类抗菌药物是患者预后的保护因素。结论肺部感染患者分离的PA多重耐药率及Ⅰ类整合子携带率较高，整合子与耐药性关系密切，应加强监测。尽量避免使用碳青霉烯类抗生素进行经验性治疗；可联合使用2类抗菌药物进行抗感染治疗。     

PNP/MeP-dR系统对肝癌细胞杀伤作用的实验研究

目的探讨新型嘌呤核苷磷酸化酶/6-甲基嘌呤-2′-脱氧核糖核苷(PNP/MeP-dR)自杀基因系统对肝癌细胞的杀伤作用。方法构建PNP基因真核表达载体pcDNA3.0/PNP,脂质体介导法将其导入HepG2细胞,利用G418筛选获得稳定转染PNP基因的细胞株HepG2/PNP。采用台盼蓝拒染法测绘细胞生长曲线,MTT法和FCM检测细胞对MeP-dR的敏感性及旁观者效应,HPLC检测PNP酶活性。结果HepG2/PNP细胞对MeP-dR十分敏感,作用4d后MeP-dR对HepG2/PNP的IC50为4.5μmol/L,而100μmol/L的MeP-dR即可最大限度地杀死HepG2/PNP细胞。100μmol/L MeP-dR作用8d后,混合细胞中HepG2/PNP比例仅占5%即可导致所有细胞死亡。HPLC结果显示,PNP基因产物能够将MeP-dR转化为6-MP。结论PNP/MeP-dR系统对肝癌细胞的杀瘤效果明显优于传统的自杀基因系统。本研究为该系统应用于肝癌体内治疗打下基础。