单壁碳纳米管的肺毒性及氧化应激机制

目的 研究单壁碳纳米管(single-wall carbon nanotubes,SWCNTs)的肺毒性,并探讨其毒性机制,为安全生产和应用SWCNTs提供实验依据.方法 A549细胞用质量浓度为0、25、50、100、150、200 μg/mL的SWCNTs溶液孵育24 h,用CCK-8和乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)试剂盒分别检测SWCNTs对A549细胞活性和细胞膜的影响,Hoechst 33342和PI荧光双染法检测细胞死亡情况,透射电镜(TEM)观察细胞超微结构变化,并检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平、谷胱甘肽(glutathione,GSH)浓度和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力以评估氧化应激情况.分别将0.5 mg/mL和1 mg/mL的SWCNTs溶液通过气管灌流的方法使大鼠肺部染毒,3d后取大鼠肺脏,常规H-E染色,检测肺组织病理学变化.结果SWCNTs对A549细胞表现出明显毒性,使细胞活性降低,死亡细胞增多,细胞膜和细胞结构损伤严重,细胞内ROS水平升高,GSH浓度和SOD活力降低.体内毒性检测结果表明SWCNTs在大鼠肺组织内积累,造成肺泡壁水肿增厚.结论 体外细胞毒性检测和动物毒性检测结果表明SWCNTs具有较大的肺毒性,其主要毒性机制是氧化应激反应.     

灵芝孢子油对人肺癌细胞的生长抑制作用及超微结构的影响

目的:探讨灵芝孢子油对人肺癌细胞(A549)超微结构的影响以及对其生长的抑制作用.方法:利用CCK-8法检测灵芝孢子油对A549细胞的生长抑制作用;利用透射电镜研究灵芝孢子油对A549细胞超微结构的影响;利用乳酸脱氢酶(LDH)检测法研究灵芝孢子油对细胞膜通透性的影响;上述方法研究灵芝孢子油对体外培养的肺癌细胞A549的抑制作用.结果:CCK-8检测结果表明25 μg/ml浓度的灵芝孢子油可导致A549细胞的存活率明显下降;透射电镜结果显示,随着灵芝孢子油浓度的增加,可以观察到细胞超微结构的明显改变;LDH检测显示灵芝孢子油可使细胞的LDH释放量明显增加,且呈剂量依赖性.结论:灵芝孢子油对人肺癌细胞具有明显抑制作用.