血清糖皮质激素调节蛋白激酶3过表达对乳腺癌细胞凋亡的影响

目的探讨血清糖皮质激素调节蛋白激酶3(SGK3)基因过表达对乳腺癌细胞凋亡的影响。方法构建pEGFP-N1-SGK3重组质粒,用载体质粒pEGFP-N1和重组质粒pEGFP-N1-SGK3转染乳腺癌MCF7细胞;MTT法观察转染细胞的增殖情况,流式细胞术分析细胞凋亡情况,RT-PCR检测凋亡相关基因表达。结果利用pEGFP-N1-SGK3质粒转染乳腺癌MCF7细胞,建立表达SGK3蛋白的细胞系;通过细胞增殖实验发现,SGK3的过表达可促进MCF7细胞增殖;流式细胞术分析显示,外源性SGK3可抑制MCF7细胞凋亡的发生,并影响凋亡相关基因bad、bcl-xl的表达。结论 SGK3的过表达可抑制乳腺癌MCF7细胞凋亡。     

生物化学教学中应用PBL教学模式的探讨

目的：探讨PBL教学模式在生物化学教学中的应用效果。方法：选取齐齐哈尔医学院2009级本科专业2个教学班分别作为研究组和对照组。研究组在教学中实施PBL教学模式,对照组采用常规讲授法。待课程结束时,统计两组学生的考试成绩并进行分析。结果：研究组的学生考试成绩和对教学方法的评价均明显优于对照组（P〈0.05）。结论：应用PBL教学模式进行生理学教学效果良好,值得推广。     

“助教协助的活力小组”学习模式在生物化学教学中的应用

生物化学的内容前沿性强、发展和更新快,是现代生命科学各前沿学科的基础。为了培养适应新时代生命科学发展需要、具有国际竞争力的优秀专业人才,"激发学生学习兴趣,释放学生的学习潜力、活力和动力"的教学新理念。在教学中引用"助教协助的活力小组"学习模式,受到了很好的效果。以下简单的加以介绍。     

内皮抑素30肽对SGC-7901细胞增殖及转移能力的影响

目的研究经RGD修饰的人内皮抑素（endostatin）N-端的30肽对胃癌SGC-7901细胞增殖及转移能力的影响。方法人工合成人内皮抑素1～30位氨基酸(30肽,序列25～31由RGIRGAD改为RGDRGD)所对应的核苷酸序列,连接到质粒pTYB2中,再转化至大肠埃希菌BL21(DE3)中表达。用WST-1试剂检测30肽对SGC-7901细胞增殖的影响;细胞划痕实验和迁移实验观察30肽对细胞运动迁移的影响;明胶酶谱实验观察其对肿瘤转移相关基因MMP-2、MMP-9表达和分泌的影响。结果30肽能够有效抑制SGC-7901细胞的增殖、侵袭和迁移,同时还抑制了MMP-2和MMP-9的活性。结论30肽可能是通过下调MMP-2和MMP-9的活性而抑制SGC-7901细胞的转移,其在胃癌的临床治疗上具有潜在的应用前景。     

硬膜外腔前间隙注射胶原酶治疗腰椎间盘突出症318例

经CT或MRI证实的腰椎间盘突出症患者318例，男188例，女130例；年龄28-65岁，平均43.2岁；病程5个月-11年，平均3.8年；临床表现单节段突出283例，双节段35例；中央型突出15例，旁侧型303例。318例患者均采用硬膜外腔前间隙注射胶原酶治疗。     

RGD修饰的内皮抑素30肽对胃癌SGC-7901细胞侵袭和迁移作用的实验研究

目的 研究经RGD修饰的人内皮抑素(endostatin)N-端的30肽对胃癌SGC-7901细胞增殖及转移能力的影响.方法 人工合成人内皮抑素1 ～ 30位氨基酸(30肽,25 ～ 31序列由RGIRGAD改为RGDRGD)所对应的核苷酸序列,连接到质粒pTYB2中,再转化至大肠杆菌BL21 (DE3)中表达,同法合成人内皮抑素1～ 27位氨基酸构成的27肽作为对照.用WST-1试剂检测SGC-7901细胞的增殖情况;Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力;明胶酶谱实验观察30肽和27肽对基质金属蛋白酶MMP2和MMP9活性的影响.结果 与27肽相比,30肽能够有效抑制SGC-7901细胞的增殖、侵袭和迁移,同时抑制了MMP2和MMP9的活性.结论 30肽可能是通过下调MMP2和MMP9的活性而抑制SGC-7901细胞的转移,其在临床胃癌的治疗上具有潜在的应用前景.     

XTP3基因融合蛋白的表达纯化及多克隆抗体制备

目的构建稳定表达乙肝病毒XTP3蛋白的原核表达载体并在大肠埃希菌中诱导融合蛋白的表达,制备兔抗XTP3蛋白多克隆抗体并检测该抗体在乙肝肝癌、正常肝组织中的作用效果。方法PCR获得XTP3基因片段,插入至pET-32a( )中构建原核表达载体pET-32a( )-XTP3,测序正确后转化大肠埃希菌BL21,IPTG诱导表达。SDS-PAGE、Western blotting分析鉴定融合蛋白的表达。利用Ni 亲和柱对表达蛋白进行纯化及柱上复性。免疫新西兰兔,制备多克隆抗体并进行ELISA、Western blotting及免疫组化验证。结果成功构建pET-32a( )-XTP3表达载体并在大肠埃希菌中诱导出高水平表达的XTP3融合蛋白,目的蛋白分子量为52kD,SDS-PAGE分析表明为包涵体表达。经亲和树脂纯化后免疫新西兰兔,成功获得融合蛋白及兔抗XTP3多克隆抗体。ELISA检测证明多克隆抗体效价>1:128000。免疫组化证实本实验中XTP3多克隆抗体在肝癌组织中的表达呈明显的细胞膜阳性,特异性良好。结论成功表达、纯化了XTP3基因融合蛋白,获得高特异性、高效价兔抗XTP3多克隆抗体,为进一步研究XTP3蛋白的生物学特性奠定了基础。     

血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶3在乳腺癌分子诊断与治疗中的意义

目的研究血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶(SGK)3过表达对乳腺癌细胞生物学行为的影响及检测SGK3与乳腺癌临床病理特征的关系。方法利用真核表达载体SGK3-pEGFP-N1瞬时转染乳腺癌MDA-MB-231细胞,细胞划痕实验和流式细胞术检测SGK3过表达对细胞周期、凋亡和迁移的影响;利用组织芯片,通过免疫组化法检测分析SGK3与乳腺癌临床病理特征的相关性。结果 SGK3过表达可促进MDA-MB-231细胞迁移(P0. 05)、抑制细胞凋亡(P0. 01),但对细胞周期无明显影响。SGK3在不同TNM分级、同一分级不同淋巴结转移及孕激素受体(PR)+和PR-的浸润性乳腺癌组织中的表达差异均无统计学意义(P0. 05)。结论尽管SGK3过表达对乳腺癌恶性生物学行为有影响,且其表达与乳腺癌临床病理特征相关,但其在乳腺癌分子诊断与治疗中的意义尚需确定。     

生物化学教学中“助教协助的活力小组”学习模式的应用研究

在医学院校生物化学作为一门重要的医学基础课程,一直为广大医学生所重视.与此同时,生物化学也被学生认为是非常难懂难学的一门课程.主要原因是生物化学知识比较抽象,内容多、信息量大且发展更新快,不易记忆和理解.就学生学习方法和积极性而言,学生大多数因为生化难学而学习兴趣不高.     

蛋白激酶SGK3与乳腺癌临床病理相关性研究

摘要:目的 通过对不同类型乳腺组织和乳腺癌中SGK3的表达情况进行分析,初步探讨SGK3与乳腺癌临床病理特征的相关性。方法 利用免疫组化方法,检测SGK3在正常乳腺组织和乳腺癌组织中的表达,进一步研究SGK3在不同类型乳腺癌以及同一类型不同病理分级乳腺癌组织中的表达情况,并结合临床参数探讨SGK3与乳腺癌临床病理特征的关系。 结果 （1）免疫组化结果显示,乳腺癌组织中蛋白激酶SGK3表达量增高,与正常乳腺组织和癌旁组织相比,有差异（P值分别为0.007,0.016）。（2）SGK3在乳腺纤维腺瘤、叶状囊肉瘤以及导管内癌的表达量极低,与正常乳腺组织相比差异无统计学意义（P值分别为0.076,0.365,0.500）;而在浸润性导管癌中的表达明显增高（P值为0.041）。（3）SGK3的表达不受浸润性导管癌的分期影响,但与ER受体表达密切相关,雌激素受体（ER）阳性的浸润性导管癌与ER阴性的浸润性导管癌相比组织中SGK3的表达量明显增高（P值为0.033）。结论 SGK3在乳腺浸润性导管癌组织中呈高表达,且在ER阳性的润性导管癌组织中的表达高于ER阴性组织,SGK3有可能成为乳腺浸润性导管癌临床诊断和预后的指标。