硫化氢对实验性病毒性心肌炎小鼠的保护作用及其机制

目的探讨硫化氢(H2S)对病毒性心肌炎(VMC)小鼠的保护作用及其机制。方法将70只BALB/c小鼠随机分为正常对照组(n=10)、心肌炎组(n=20)、炔丙基甘氨酸(PAG)组(n=20)、硫氢化钠(NaHS)组(n=20),后3组小鼠腹腔接种0.1 mL内含柯萨奇病毒B3(CVB3)的Eagle液建立VMC模型,对照组仅接种Eagle液。接种后当日,PAG、NaHS组分别腹腔注射40 mg/kg PAG、50μmol/kg NaHS,其余2组腹腔注射PBS,1次/d,连续2周。第15天称体质量(BM)后处死全部小鼠,比较各组死亡率,分离血清,通过ELISA测定血清心肌肌钙蛋白I(cTnI)水平,取心脏,称心脏质量(HM),计算HM/BM,HE染色计算心肌病理积分,测定心肌匀浆液中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)活性,ELISA检测心肌组织中白介素1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,Western blot法检测心肌细胞核内核因子-κB(NF-κB)p65表达水平。结果心肌炎组HM/BM、血清cTnI水平、心肌MDA活性、胞核NF-κB p65表达水平及心肌IL-1β、IL-6、TNF-α含量较对照组增加(P0.05或0.01),而心肌SOD、GSH-Px和CAT活性较对照组减少。与心肌炎组比较,PAG组HM/BM、血清cTnI水平、心肌病理积分、心肌MDA活性、胞核NF-κB p65表达水平及心肌IL-1β、IL-6、TNF-α含量增加,心肌SOD、GSH-Px和CAT活性则减少(P0.05),但2组死亡率比较差异无显著性(P0.05)。与心肌炎组相比,NaHS组死亡率、HM/BM、血清cTnI水平、心肌病理积分、心肌MDA活性、胞核NF-κB p65表达水平及心肌IL-1β、IL-6、TNF-α含量降低(P0.05),而SOD、GSH-Px、CAT活性则升高(P0.05)。结论 H2S对VMC小鼠产生良好的保护作用,其机制可能与增强抗氧化能力及抑制炎症反应有关。     

果王素通过下调转化生长因子-β1表达抑制大鼠肺纤维化北大核心CSCD

目的:通过观察果王素对博莱霉素诱导的肺纤维化(PF)大鼠肺组织转化生长因子-β1(TGF-β1)蛋白及mRNA表达的影响,探讨果王素是否可通过调节TGF-β1抑制PF,并探究其给药浓度对大鼠PF的影响。方法:将128只SD大鼠随机分为空白组、模型组、泼尼松组、果王素低、中、高剂量组(60、120、180 mg/kg),通过向气管内注入博莱霉素建立大鼠PF模型。自造模后第2天起将泼尼松及果王素按一定配比分别予以各组大鼠灌胃,空白组和模型组每日予以等量0.9%氯化钠溶液灌胃,1次/d。空白组大鼠全部于第28天处死,余组分别于第7、14、28天各处死8只并取材,通过HE、Masson染色观察大鼠肺组织病理变化,采用免疫组化、Western blot、实时荧光定量PCR检测TGF-β1蛋白及mRNA表达。结果:果王素对PF有抑制作用,并与剂量相关,空白组大鼠肺组织TGF-β1蛋白及mRNA表达最低,其余各组大鼠TGF-β1蛋白及mRNA在7 d时达到高峰,并随时间的推移逐渐下降。同一时间点,模型组大鼠TGF-β1蛋白及mRNA在肺组织中的表达明显高于其他各组(P<0.01,P<0.05),药物干预组间,泼尼松组及果王素高剂量组TGF-β1蛋白及mRNA明显低于果王素低、中剂量组(P<0.01,P<0.05),果王素高剂量组与泼尼松组间表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:果王素可能通过下调TGF-β1的表达抑制PF。     

两种不同联合给药方法对重度慢性阻塞性肺疾病急性发作治疗的疗效观察

目的:探讨两种不同的联合给药方式对重度慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性发作患者治疗的疗效.方法:将60例COPD患者随机分为观察组和对照组各30例.两组患者均给予氧疗、抗感染、吸人异丙托溴胺等治疗,观察组在常规治疗基础上给予经准纳器口吸沙美特罗50μg/氟替卡松500 μg,1吸/次,2次/天;对照组在常规治疗基础上给予口服强的松30 mg/d,7～10天后逐渐减量停用,总疗程不超过21天,两组均用盐酸班布特罗10mg/次,2次/天治疗,均治疗4周,治疗前后根据临床表现、肺功能进行评价,并对两组患者循环血中C-反应蛋白(CRP)、皮质醇水平进行了比较.结果:观察组与对照组治疗前后病情改善总有效率分别为86.7%与90%.但两组之间比较差异无显著性(脚.05);两组患者治疗前、后肺功能各项指标FEVI/FVC(%)、FEV1(L)、FEV1占预计值百分比指标比较差异无显著性(P>0.05),但治疗4周后两组患者较治疗前明显改善,差异有显著性(P＜0.05);两组患者治疗前、后血CRP水平对比差异无显著性(P>0.05),但治疗后较治疗前均明显降低,差异有显著性(P＜0.05).两组患者血皮质醇水平治疗前后均在正常水平,两组比较差异无显著性(P>0.05).结论:两种方法治疗AECOPD均有效,且短期(4周)口服强的松与吸人氟替卡松治疗对肾上腺皮质功能均未见影响,临床上可根据患者实际情况选择不同的治疗方法.     

实验性肺纤维化大鼠血清ADAMTS-1水平的变化

目的观察含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS-1)在实验性肺纤维化大鼠血清中的变化。方法 50只SD大鼠随机分为对照组(n=10)、模型组(n=40),模型组经气管内注入博莱霉素建立大鼠肺纤维化模型,对照组相同条件下给予生理盐水,模型组分别于第7、14、28、56天随机处死10只大鼠,而对照组于第56天处死,取出肺组织行HE染色和Masson染色,采用酶联免疫吸附法检测血清ADAMTS-1水平。结果模型组各时间点血清ADAMTS-1水平显著低于对照组(P<0.01),模型组血清ADAMTS-1水平与肺纤维化程度评分呈负相关(r=0.74,P<0.05)。结论 ADAMTS-1可能参与肺纤维化发病过程,并可作为病情判断的观察指标。     

果王素下调肿瘤坏死因子α和血小板源性生长因子B减轻大鼠放射性肺损伤

目的 观察肿瘤坏死因子α(TNF-α)和血小板源性生长因子B(PDGF-B)在果王素减轻大鼠放射性肺损伤(RILI)中的作用。方法 96只雄性健康SD大鼠，随机分为空白对照组、模型组、(60、 240 mg/kg)果王素处理组，各组24只。后3组大鼠利用6 MV的X射线18 Gy分次照射全肺，构建RILI动物模型，照射后次日，后2组大鼠分别给予60 mg/kg、 240 mg/kg果王素灌胃，而以9 g/L氯化钠溶液灌胃前2组大鼠，每天均1次。后3组分别于第14、 28、 56天随机处死8只大鼠，空白对照组在第56天全部处死作为总体对照。收集血液并分离，ELISA检测血清中TNF-α和PDGF-B含量。留取肺组织，HE和Masson染色评价肺泡炎及肺纤维化(PF)情况，测定羟脯氨酸(HYP)含量，实时定量PCR和免疫组织化学染色法分别检测肺组织中TNF-α、 PDGF-B mRNA及蛋白表达。结果 与同期模型组相比，(60、 240)mg/kg果王素处理组14 d、 28 d肺泡炎和28 d、 56 d PF病变显著减轻。与空白对照组比较，模型组28 d、 56 d肺组织HYP含量增加...     

特发性肺纤维化肺功能改变29例分析

目的:探讨肺功能检查对特发性肺纤维化(IPF)早期诊断的临床意义.方法:比较29例早期IPF患者及29例成年健康志愿者的肺功能.结果:29例IPF患者肺功能各项指标:肺活量(VC)(2.02±0.58)L,肺总量(TLC)(2.84±0.68)L,弥散功能(Dko)为(12.73±3.39)mL/(min.mmHg),与健康志愿者对照组的VC(3.48±0.56)L,,TLC(4.74±0.74)L和DLco(23.48±1.83)mL/(min.mmHg)比较均显著降低(P＜0.01).结论:IPF常以限制性通气功能障碍和气体交换障碍为特征,表现为肺活量(VC)、肺总量(TLC)下降、弥散功能(DLco)减少,常规肺功能检查可早期发现IPF.     

情景模拟结合混合式教学法在诊断学教学中对提高医学生问诊能力的效果分析

目的探讨情景模拟结合混合式教学法在诊断学教学中对提高医学生问诊能力的作用。方法按随机数字表法选取 2018年 3—6月湖南医药学院 2015级本科临床医学专业两个教学班 232名学生为研究对象,将其分为实验组(112人,实施情景模拟结合混合式教学法)和对照组(120人,采用传统教学法),教学结束后,比较两组学生诊断学问诊考核成绩,并通过问卷调查、教学满意度和学生访谈进行教学效果的评价。结果实验组诊断学问诊考核成绩(31.59±4.52)分明显高于对照组(27.08±5.03)分(t＝7.163,P＜0.01),并且,实验组在问卷调查、教学满意度和学生访谈等方面对诊断学问诊教学效果的评价优于对照组(P＜0.01)。结论情景模拟结合混合式教学法可显著提高医学生问诊能力,值得在教学中推广使用。     

siRNA沉默EGFR表达减轻大鼠脑出血后脑损伤

目的探讨siRNA沉默表皮生长因子受体(EGFR)表达对大鼠脑出血后脑损伤的影响及相关机制。方法以Ⅶ型胶原酶注入苍白球构建大鼠脑出血模型,予10μL空病毒载体或EGFR siRNA慢病毒表达载体侧脑室注射,进行神经功能评分,应用HE染色观察脑组织病理改变,干湿重法测定脑组织含水量,免疫组织化学染色测定脑组织中EGFR表达,荧光实时定量PCR分析神经胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)mRNA水平,Western blot检测EGFR、GFAP、信号传导蛋白和转录激活物3(STAT3)、磷酸化STAT3(p-STAT3)蛋白表达。结果随着脑出血时间的延长,血肿周围脑组织EGFR表达逐渐上调,第7天达到高峰(P0.01)。与模型组比较,EGFR siRNA缓解脑组织病理损害,减少神经功能评分、脑组织含水量,并降低血肿周围脑组织EGFR、GFAP及p-STAT3表达水平(P0.01)。结论 EGFR基因沉默通过阻碍STAT3磷酸化抑制星形胶质细胞活化,进而减轻大鼠脑出血后脑损伤。     

中华猕猴桃果仁非饱和脂肪酸通过激活Keap1/Nrf2信号通路增强肺纤维化大鼠抗氧化能力

目的观察中华猕猴桃果仁非饱和脂肪酸(果王素)对博莱霉素致大鼠肺纤维化的影响,探讨其是否通过Kelch样ECH相关蛋白1(Keap 1)/核因子E2相关因子2(Nrf 2)信号通路发挥作用。方法随机将60只SD大鼠分为对照组、模型组、(60、120、180)mg/kg中华猕猴桃果仁非饱和脂肪酸处理组和5 mg/kg醋酸泼尼松组,每组10只。对照组大鼠以生理盐水气管内注射,其余5组大鼠则以博莱霉素A5气管内注射建立肺纤维化模型。第2天起,中华猕猴桃果仁非饱和脂肪酸处理组大鼠分别予(60、120、180)mg/kg中华猕猴桃果仁非饱和脂肪酸灌胃,泼尼松组以5 mg/kg醋酸泼尼松灌胃,其余2组予生理盐水灌胃。所有大鼠第28天处死,留取肺组织,HE和Masson染色观察肺部病变,通过试剂盒测定肺组织匀浆中羟脯氨酸(HYP)、活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量,Western blot法检测肺组织中Keap 1、Nrf 2蛋白水平。结果与模型组比较,(60、120、180)mg/kg中华猕猴桃果仁非饱和脂肪酸处理组和泼尼松组肺泡炎症和肺纤维化程度明显减轻,肺组织HYP、ROS、MDA含量、胞质Keap 1蛋白水平降低,而SOD、CAT、GSH-Px含量、胞核Nrf 2蛋白水平升高。此外,与60 mg/kg中华猕猴桃果仁非饱和脂肪酸处理组相比,(120、180)mg/kg中华猕猴桃果仁非饱和脂肪酸处理组和泼尼松组上述指标明显改善,但后三者之间比较无显著性差异。结论中华猕猴桃果仁非饱和脂肪酸能抑制大鼠肺纤维化,与激活Keap 1/Nrf 2信号通路增加抗氧化物生成有一定关系。     

miR-7靶向沉默EGFR抑制大鼠星形胶质细胞活化

目的探讨微小RNA-7(miR-7)对星形胶质细胞活化的影响及分子机制。方法培养大鼠皮层星形胶质细胞,分别用培养液(对照组)、睫状神经营养因子(CNTF,用于活化星形胶质细胞)、miR-7 mimic+CNTF、miR-7 mimic control+CNTF、miR-7 inhibitor+CNTF及miR-7 inhibitor control+CNTF处理,采用荧光实时定量PCR(q RT-PCR)检测神经胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)和表皮生长因子受体(EGFR)mRNA表达,通过Western blot检测GFAP、EGFR、信号传导蛋白和转录激活物3(STAT3)、磷酸化STAT3(p-STAT3)蛋白表达。构建野生型pGL3-EGFR及突变型p GL3-EGFR-m重组质粒,分别与miR-7 mimic共转染HEK293T细胞,检测荧光素酶报告基因活性。此外,以EGFR si RNA或STAT3抑制剂S31-201处理星形胶质细胞,再与miR-7 inhibitor和CNTF孵育,然后用q RT-PCR、Western blot检测GFAP m RNA与蛋白表达。结果 CNTF组GFAP、EGFR表达水平及pSTAT3/STAT3比值较对照组增加(P<0.01),与CNTF组比较,miR-7 mimic+CNTF组GFAP、EGFR表达水平及pSTAT3/STAT3比值降低,miR-7 inhibitor+CNTF组GFAP、EGFR表达水平及p-STAT3/STAT3比值升高(P<0.01)。与对照组比较,miR-7 mimic转染明显减少野生型EGFR荧光素酶活性(P<0.01)。EGFR si RNA或S31-201预处理几乎完全逆转miR-7 inhibitor诱导的GFAP表达上调(P<0.01)。结论 miR-7通过抑制EGFR/STAT3信号通路拮抗CNTF诱导的大鼠星形胶质细胞活化。