基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱在鼠伤寒沙门菌同源性分析中的应用价值

目的:研究基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)在鼠伤寒沙门菌同源性分析中的应用价值.方法:利用MALDI-TOF MS对分离于广州市的44株鼠伤寒沙门菌进行分型,与脉冲场凝胶电泳分型(PFGE)进行比较,并分析主要质谱型的质谱图.结果:对PFGE结果聚类分析可以将44株鼠伤寒沙门菌分为15型.在聚类相似度为80%时,44株鼠伤寒沙门菌被分为8个MALDI-TOF MS型,与PFGE分型较一致.其中MS1型(52.3%)为主要的质谱型,MS1型包含多个PFGE型.结论:MALDI-TOF MS方法分型结果显示了广州市鼠伤寒沙门菌相对集中的亲缘关系,是一种简便、快速、高通量的方法.     

组织配型对同种肾移植急性排斥反应的影响

目的：探讨组织配型与肾移植术后急性排斥反应的关系。方法分别采用补体依赖的淋巴细胞毒交叉试验筛选受者,采用ELISA方法检测受者群体反应抗体,比较分析传统HLA配型与交叉反应组（ CREGs ）配型两种配型方法肾移植术后急性排斥反应发生情况。结果109例肾移植患者中,补体依赖的交叉淋巴细胞毒试验均为阴性。群体反应抗体（PRA）阴性103例,其中7例（5.38％）发生AR;PRA阳性6例,其中3例（33.33％）发生AR。传统HLA配型0～6 MM分别占0.92％,2.75％,3.67％,22.02％,35.78％,28.44％和6.42％,相对应AR发生率分别为0、0、0、0、15.38％、9.68％和0;CREGs配型6 MM时无移植病例,CREGs配型0～5 MM分别占2.75％,8.26％,20.18％,39.45％,26.61％,2.75％,相对应AR发生率分别为0、0、4.55％、11.63％、10.34％和0。将0～4 MM组合并统计,传统HLA配型与CREGs 配型AR发生率相比较差异无统计学意义（χ2＝0.00,P＞0.05）;传统HLA配型与CREGs配型0～4 MM的比率差异有统计学意义（χ2＝36.80,P＜0.01）。结论术前PRA阳性者,AR发生率高于PRA阴性者。与传统HLA配型相比,CREGs配型能够提高受者和供者HLA匹配的概率。0～4 MM时传统HLA配型与CREGs配型对AR发生率无明显差别。     

茵陈蒿汤对免疫小鼠ABO血型抗体产生的抑制作用研究

目的:研究茵陈蒿汤对ABO血型抗体分泌细胞的抑制作用。方法:以人A型红细胞免疫BALB/c小鼠,通过间接抗人球蛋白试验,吸收放散试验和IgG型抗-A效价的检测等观察A型红细胞免疫组和茵陈蒿汤治疗组中BALB/c小鼠体内IgG型抗-A抗体的水平变化。结果:对照组BALB/c小鼠均未捡测出IgG型抗-A抗体,免疫组BALB/c小鼠均产生IgG型抗-A抗体,茵陈蒿汤治疗组中有5只没有检测到IgG型抗-A抗体,11只BALB/c小鼠产生了IgG型抗-A抗体。间接抗人球蛋白试验,吸收放散试验和IgG型抗-A效价的检测结果显示免疫组和茵陈蒿汤治疗组IgG型抗-A水平均高于对照组(P<0.05),茵陈蒿汤治疗组抗-A水平低于免疫组(P<0.05),茵陈蒿汤治疗组抗-A效价与对照组比较无差异(P>0.05)。结论:小鼠动物试验证实茵陈蒿汤可抑制ABO血型抗体的分泌。     

汉族、藏族和维吾尔族人群RHD基因启动子区检测

目的探讨汉族、藏族和维吾尔族RHD基因启动子区多态性与RhD阴性机制相关性。方法对476例汉族(200例RhD阳性、228例RhD阴性、6例弱D和42例Del型)、57例藏族(50例RhD阳性和7例RhD阴性)和120例维吾尔族(50例RhD阳性和70例RhD阴性)标本,使用PCR-SSP方法检测RHD基因的Upstream盒、Down-stream盒和hybrid盒,使用PCR-SSP法和多重PCR法检测RHD基因启动子区-1~-1 246 bp内的4个RHD基因多态性位点。结果 348例RhD阳性标本(含6例弱D和42例Del型)、76例表型为RhD阴性但RHD基因型为RHD+/RHD-杂合子和RHD+/RHD+纯合子标本中均检测到4个RHD基因特异性多态性位点;而所有229例表型为RhD阴性基因型为RHD-/RHD-纯合子标本均未检测到RHD基因启动子区多态性位点。结论汉族、藏族和维吾尔族RHD基因启动子区多态性可能与RhD阴性机制无关;本研究所建立的RHD基因启动区4个多态性位点PCR-SSP检测方法可用于RHD基因启动区多态性位点研究。     

当归多糖对抗LY294002引发的血小板凋亡的研究

目的:研究当归多糖(angelica polysaccharide,APS)对体外冷藏保存血小板的抗凋亡作用及其机制。方法:将血小板样本分为4组:4℃冷藏的血小板空白对照组、4℃冷藏保存血小板APS处理组、LY294002处理组和LY294002加APS共同处理组。采用流式细胞仪检测血小板膜糖蛋白CD41、CD61的表达及血小板凋亡率、凋亡蛋白酶Caspase-3的表达以及线粒体膜电位的变化。Western blot检测分析APS通过PI3K/AKT信号通路抗血小板凋亡的作用机制。结果:LY294002组血小板凋亡率明显提高,血小板膜糖蛋白CD41、CD61的表达活性随着LY294002作用浓度的升高逐渐下降(r=-0. 953);与空白对照组相比,LY294002组的血小板凋亡率明显升高(P0. 05),而LY294002和APS共同处理组的血小板凋亡率较前者下降(P 0. 05),这提示,APS对体外冷藏血小板具有抗凋亡作用。APS还能降低血小板凋亡蛋白酶Caspase-3的表达和抑制线粒体膜电位的降低,以及刺激血小板PI3K/AKT通路的活化。结论:APS对体外冷藏保存的血小板具有抗凋亡作用,其机制可能与活化PI3K/AKT信号通路,减少细胞凋亡蛋白酶Caspase-3的表达和稳定线粒体膜电位有关。     

SMP1基因外显子多态性研究

目的建立SMP1基因外显子检测方法以探讨SMP1基因多态性。方法根据文献报道并参考Gene-Bank中的基因序列,设计聚合酶链式反应(PCR)扩增SMP1基因7个外显子的8对特异性引物,应用PCR分段扩增SMP1基因7个外显子,PCR产物纯化后直接测序,应用DNAMAN5.2.9序列分析软件分析序列。结果 SMP1基因第1~7外显子长度分别为137、106、113、68、93、60和1 703 bp。SMP1基因第1~6外显子未发现多态性位点,但该基因第7外显子存在1329T>C和1704G>A多态性。结论本研究成功建立SMP1基因外显子检测方法并检测到了SMP1基因第7外显子存在多态性位点。     

不同突变型β-地中海贫血基因携带者血液学特征分析

目的探讨佛冈县中医院不同基因突变型β-地中海贫血(简称β-地贫)基因携带者的血液学特征及发生频率。方法应用反向斑点杂交技术检测β-地贫基因突变,用Sysmex血液分析仪测定病人平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白量(MCH)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、红细胞分布宽度(RDW)等血液学特征,应用SPSS统计软件,采用方差分析及多重比较对实验数据进行统计分析。结果215例β-地贫基因携带者中,杂合子213例,占99.06%,双重杂合子1例,占0.47%,纯合子1例,占0.47%。检出12种基因突变类型,以CD41-42,IVS-II-654,-28,CD17,CD27-28等突变型为主,比例分别为43.72%、26.98%、9.77%、7.44%和6.51%,5种突变占94.42%。与对照组相比,β+/β和β0/β的MCV、MCH、MCHC值均有显著降低,RDW值高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。5种主要突变位点病人的MCV、MCH、MCHC值均低于对照组,RDW值高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。215例β-地贫MCV/MCH分布情况如下:(1)MCV78 fl、MCH27 Pg:94.88%;(2)MCV80 fl、MCH27 Pg:95.35%;(3)MCV82 fl、MCH27Pg:95.82%;(4)MCV≥82 fl、MCH≥27 Pg:2.79%。结论佛冈县地贫以中国人发病率高的突变类型为主;β-地贫基因携带者血液学特征符合小细胞低色素性贫血,MCV、MCH降低时应高度怀疑地贫可能,但MCV、MCH正常时也不能排除轻型β-地贫。     

WS/T406-2012标准在Sysmex CS-2000i血凝仪分析性能验证中的应用

目的 评价Sysmex CS-2000i全自动血凝仪的分析性能.方法 根据中华人民共和国卫生行业标准WS/T406-2012文件及相关文献,对Sysmex CS-2000i全自动血凝仪检测PT、APTT和Fib的批内精密度、日间精密度、线性、正确度和准确度进行验证,确保分析性能满足临床需要.结果 PT、APTT、Fib的批内精密度1.44％～3.58％,日间精密度2.28％～4.88％;Fib的标本浓度在0.39～7.79 g/L范围内呈一次线性;正确度和准确度均符合WS/T406-2012标准要求.结论 Sysmex CS-2000i全自动血凝仪分析性能满足临床需要,WS/T406-2012行业标准具有较好的操作性和实用性,易于常规实验室使用和推广.     

常见类型地中海贫血患者全血细胞计数参数特点

目的 分析临床常见类型地中海贫血患者全血细胞计数参数特点,探讨其临床价值.方法 对174例地中海贫血患者及46例健康体检者全血细胞计数结果进行回顾性分析.结果 4组常见类型（静止型、中间型、轻型α-地贫和轻型β-地贫）地中海贫血患者的红细胞平均体积（MCV）和红细胞平均血红蛋白含量（MCH）均低于健康组,差异均有统计学意义.3组α-地贫患者,由静止型、中间型到轻型,红细胞血红蛋白浓度（Hb）、MCV和MCH的平均值逐渐降低,红细胞分布宽度（RDW）水平则逐渐增高.两组轻型α-和β-地贫的5个红细胞计数参数与健康组比较差异均有统计学意义;轻型α-地贫组MCV和MCH水平明显高于轻型β-地贫组.轻型和中间型α-地贫组血小板平均体积（PCV）和血小板分布宽度（PDW）两个参数同时检出率明显低于健康组.结论 4种常见类型地贫患者的MCV和MCH值均明显低于正常水平,两项指标联合分析是地贫筛查的良好指标.随着基因缺失数目的 增多,RBC与Hb、MCV和MCH离散分离状态更明显,小细胞低色素特征越来越显著,红细胞体积大小异质性增加,对血小板计数的干扰越来越严重.     

2型糖尿病疾病进程相关生化指标分析

目的探讨2型糖尿病(T2DM)发生发展过程中脂代谢、血糖水平以及胰岛素抵抗的变化及其相关性。方法分别测定49例健康体检者(A组)以及45例糖尿病前期患者(B组)、48例单纯T2DM患者(C组)、46例T2DM合并1种慢性并发症患者(D组)、44例T2DM合并2种或以上慢性并发症患者(E组)的身高、体重以及胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、空腹胰岛素(0 h Ins)等指标,计算体重指数(BMI)、胰岛素抵抗指数(Homa-IR),并进行统计学分析。结果各组BMI、HDL-C、TG、FPG、HbA1c、0 h Ins及Homa-IR差异有统计学意义(P<0.05),TC、LDL-C差异无统计学意义(P>0.05),BMI、HbA1c、TG、FPG和HDL-C是2型糖尿病并发症发生的独立危险因素(OR分别为2.346、3.654、5.219、4.561、1.813)。结论 T2DM患者血脂、血糖水平、Homa-IR和BMI显著升高,并且随着病情进展而呈现递增趋势。控制血脂和血糖水平可延缓病情发展。