乳腺癌裸鼠移植模型的制作概况

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤，1999年美国约新增176300例乳腺癌，约43700人死于该疾病。近30年来，尽管各种各样的化疗和内分泌治疗手段不断涌现，但在晚期乳腺癌病人中，有明显治疗效果的病例仅占30％～40％，显效时间仅12～18个月。进一步了解乳腺癌发生、发展的机制，开     

乳腺癌辅助内分泌治疗

内分泌治疗适用于激素敏感性肿瘤。70％乳腺癌细胞膜表面有雌激素或者孕激素受体表达，为激素敏感性肿瘤。     

早期乳腺癌术后系统性辅助治疗研究现状

乳腺癌是女性肿瘤中第二常见的致死病因,也是全球女性最常见恶性肿瘤之一~([1])。研究表明,早期乳腺癌患者只要得到及时有效的治疗是可望被永久性治愈的。迄今国内外对早期乳腺癌的概念尚无统一界定,目前较公认的是把TNM分期中的Ⅰ、Ⅱ期,甚至ⅢA期中T3N1M0界定为早期乳腺癌。手术治疗仍然是早期乳腺癌首选治疗方式之一,但术后系统性辅助治疗也越来越受到重视~([2])。全球上百个随机临床试验证实了辅助治疗在降低乳腺癌复发率、提高患者生存率方面的有效性~([3])。乳腺癌的治疗重点已经从单纯的手术治疗发展到了系统性治疗在内的综合性治疗。本文就早期乳腺癌术后的系统性辅助治疗研究现状综述如下。     

REGgamma基因对乳腺癌细胞MCF-7增殖和凋亡的影响

目的:探讨蛋白酶体激活因子REGgamma(REGγ)基因对乳腺癌细胞MCF-7增殖和凋亡的作用.方法:构建真核表达重组体PcDNA3.1-REGγ,通过脂质体转染将REGγ基因导入MCF-7,以G418(800mg/L)连续筛选获得稳定高表达REGγ基因的细胞株,以转染空载体和未转染细胞作为对照.分别利用MTT法及免疫细胞化学方法检测各组细胞PCNA的表达分析REGγ基因对细胞增殖的影响;以Caspase-3分光光度法及AnnexinV-FITC的流式细胞仪(FCM)来检测细胞凋亡的变化;以透射电镜(TEM)观察细胞超微结构的改变.结果:获得稳定转染且高表达REGγ的细胞株.经Western Blot检测转染REGγ基因的细胞(实验组),其REGγ蛋白表达明显高于对照组细胞(P＜0.05);未转染组、空载体组和实验组细胞的倍增时间分别为34.6、35.1、26.7h.提示实验组细胞倍增时间缩短;MTT法绘制生长曲线提示实验组细胞生长明显加速;免疫细胞化学检测PCNA结果显示,未转染组、空载体组和实验组细胞的染色灰度值分别为89.61±14.32、87.95±16.38、133.47±8.14,表明实验组细胞PCNA表达明显增强(P＜0.01);Caspase-3分光光度法检测显示,实验组细胞的OD值普遍低于对照组(P＜0.05);Annexin V-FITC的FCM检测显示,实验组细胞的凋亡率明显低于对照组(P＜0.01);TEM观察实验组细胞表现为核仁肥大,线粒体、高尔基体丰富或扩张,未见凋亡小体形成.结论:REGγ基因具有促进乳腺癌MCF-7细胞增殖并抑制其凋亡的作用.     

CXCR4及其配体SDF-1与乳腺癌

趋化因子是一类多肽超家族的低分子量细胞因子。CXCR4是趋化细胞因子SDF-1／CXCL12（基质细胞衍生因子-1）的受体。两者结合在乳腺癌的生长、侵袭、转移中有重要作用。利用分子生物学技术，阻断SDF-1／CXCR4反应轴，可能成为肿瘤治疗的一个新靶点。     

靶向Livin的siRNA提高MDA-MB-231细胞对阿霉素敏感性的可能机制

目的:采用RNA干扰技术下调Livin基因的表达,观察其提高乳腺痛细胞对阿霉素化疗的敏感性及机制.方法:构建3个靶向Livin的siRNA真核表达载体,转染乳腺癌细胞MDA-MB-231后,通过实时定量PCR,Western Blot技术检测干扰前后Livin和Caspage-3的表达;采用MTT法检测细胞增殖的变化以及细胞对阿霉素的半数抑制浓度(IC50),流式细胞法检测细胞周期,TUNEL法检测其诱导细胞对阿霉素化疗增敏作用,并观察细胞超微结构变化.结果:成功构建了针对Livin基因的3个特异性siRNA表达载体,si-Livin2对Livin的mRNA和蛋白抑制效率最高,分别为76.4%和70.2%.同时Cagpase-3的mRNA和蛋白表达升高约157.1%和38.6%(P<0.05).si.Livin2转染48 h后,与未转染组相比,细胞增殖活力受到抑制,si-Livin2联合阿霉素使细胞周期阻滞于G0/G1期(P<0.05),显著提高了细胞对阿霉素敏感性,其凋亡率达到(38.35±2.64)%,IC50降低为(2.46±0.87)mg/L,差异具有统计学意义(P<0.05).透射电镜下可见细胞胞质浓缩,染色质聚集为小团块,电子密度增高.结论:靶向Livin siRNA真核表达载体可以有效地下调MDA-MB-231细胞Livin基因的表达,并且通过上调Cagpage-3的表达抑制细胞增殖,显著增强其对阿霉索的敏感性.