人同种异体移植炎症因子-1的基因克隆及其在小鼠成纤维细胞中的表达

目的构建人同种异体移植炎症因子-1(allograft inflammatory factor-1,AIF-1)基因的真核表达载体并在小鼠成纤维细胞系(NIH3T3)中表达,为进一步研究AIF-1蛋白的功能奠定基础。方法利用基因重组技术,构建带有AIF-1基因的2种重组真核表达载体:pcDNA3.1(-)/AIF-1与pEGFP-C1/AIF-1。利用脂质体法将2种重组质粒分别转染NIH3T3细胞,用荧光倒置显微镜及Western blot方法观察及鉴定AIF-1在细胞中的稳定表达及瞬时表达。结果酶切分析及DNA序列测定证实,AIF-1基因片段被分别克隆入真核表达载体pcDNA3.1(-)与pEGFP-C1。荧光显微镜观察到NIH3T3细胞中有绿色荧光分布。Western blot结果表明,转染重组质粒的NIH3T3细胞中,AIF-1表达量明显增高。结论成功构建了2种重组真核表达载体:pcDNA3.1(-)/AIF-1与pEGFP-C1/AIF-1,经转染NIH3T3细胞株获得了AIF-1蛋白的瞬时表达及稳定表达。     

非酒精性脂肪肝发病机制的研究进展

脂肪肝是由多种疾病和病因引起的肝脏脂肪性变,当肝脏对脂肪合成能力增加和(或)转化入血的能力下降时,脂类物质(主要为三酰甘油)在肝细胞内堆积过多。一般来说正常肝脏中脂肪占肝脏湿重的3%~5%,如果脂肪含量超过肝湿重的5%,或是组织学上50%以上的肝实质脂肪化时,即称为脂肪肝。     

实时荧光PCR检测癌基因MDM2在急性白血病中的表达

目的应用实时荧光PCR技术,检测癌基因MDM2在急性粒细胞白血病(AML)中的表达并分析其与AML发生、分型及疗效的关系.方法以Sybr GreenI为荧光指示剂,β-actm作内参照,建立检测MDM2 mRNA表达的实时荧光PCR反应体系.PCR反应完毕作熔解曲线分析.分析MDM2 mRNA的表达与AML的发病、FAB分型及疗效的关系.结果①通过对实验参数的优化,适宜的反应条件为退火温度51℃,Mg2+浓度3 mmol/L,牛血清白蛋白(BSA)浓度0.1 mg/ml,循环次数45次.批内、批间变异系数分别为8.81%和15.39%.②AML组MDM2mRNA的表达明显高于正常对照组(P＜0.01);AML各亚型M1、M2与M3组MDM2mRNA表达量组间差异无显著性意义(P＞0.05);完全缓解组、部分缓解组、未缓解组3组之间MDM2mRNA表达差异有显著性意义(P＜0.01),且呈逐渐上升趋势.结论采用Sybr GreenI的Lightcycler实时荧光PCR方法检测MDM2 mRNA快速、简便、稳定性好.MDM2 mRNA的表达与AML的发生及临床疗效有重要关系.     

2017年北美及欧洲儿科胃肠肝脏病和营养学会婴儿胆汁淤积性黄疸评估指南的胆道闭锁评估解读

胆汁淤积(cholestasis)按病因可分为胆管性(梗阻、肝外胆管扩张或肝内胆管过小)和肝细胞性(膜转运体缺陷,遗传或代谢性障碍)[1].胆汁淤积性黄疸在足月产婴儿发病率约为1/2 500,临床上常与新生儿内科性黄疸相混淆[2].婴儿胆汁淤积性黄疸常见的病因包括胆道闭锁(25％～40％)、遗传性疾病(25％)、胆总管结石或胆总管囊肿导致的肝外梗阻、代谢障碍(酪氨酸血症Ⅰ型、半乳糖血症、先天性胆汁酸代谢障碍)、全垂体功能减退、Alagille综合征、感染及肠外营养相关的肝脏疾病[3].     

机器人辅助腹腔镜手术治疗新生儿肠旋转不良3例

<正>先天性肠旋转不良是胚胎发育过程中肠管旋转和固定的解剖异常,自1932年Ladd^[1]首次描述Ladd’s术以来,手术的基本原则一直没有改变。Zee等^[2]1995年首次报道腹腔镜Ladd’s术,之后传统腹腔镜手术在小儿微创外科中发挥越来越大的作用^[3～6]。近年来,机器人手术不仅逐渐应用于小儿,更有应用于新生儿的报道,如Meehan等^[7]报道1例体重2.4 kg的女婴因十二指肠闭锁行机器人辅助腹腔镜修复手术,取得了成功。虽然有机器人辅助腹腔镜手术治疗十二指肠梗阻的成功尝试,但由于新生儿体重较轻,操作空间受限,在新生儿实施机器人手术仍然存在技术障碍和学术争议^[8～10]。2020年10月～2022年12月我院应用第4代达芬奇Xi机器人辅助腹腔镜完成Ladd’s术3例,现报道如下。     

循环护理干预措施对流动性肺结核干预效果及患者依从性的影响

目的：探讨循环护理干预措施对流动性肺结核干预效果及患者依从性的影响。方法选择2012年1月~2014年1月西安市结核病胸部肿瘤医院收治的250例肺结核患者,按随机数字表法将其分为观察组(125例)与对照组(125例)。观察组予以循环护理干预,对照组予以常规护理干预。记录并比较两组患者自我护理能力、胸片肺部病灶状况、依从性行为。结果观察组与对照组护理干预后自我护理技能、自我责任感、健康知识水平以及自我概念等自我护理能力较护理前明显提高,差异有统计学意义(P<0.05),且观察组提高程度大于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组患者钙纤维化与吸收好转的比例显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),浸润扩散的比例显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。护理干预后,观察组按时服药、定期复查、合理膳食、劳逸结合、消毒隔离、保持情绪乐观等行为的依从率均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论循环护理干预措施可提高流动性肺结核患者的自我护理技能与依从性,改善治疗效果,值得在临床上予以推广。     

姜黄素对四氯化碳诱导大鼠肝纤维化的影响

目的:观察姜黄素(Cur)预防给药对四氯化碳(CCl4)诱导大鼠肝纤维化的影响,并探讨其相关的分子机制.方法:64只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(10只),模型对照组(14只)和水飞蓟宾组(10只),Cur低、中、高剂量组(各10只).模型对照、水飞蓟宾和Cur组均采用皮下注射体积分数40%CCl4复制肝纤维化模型,水飞蓟宾组大鼠同时给予0.5 g/L水飞蓟宾,Cur低、中、高剂量组大鼠同时分别给予1、2、4 g/L的Cur灌胃7周.HE染色观察各组大鼠肝组织的病理形态,进行肝纤维化分级;血清生化学检测谷氨酸氨基转移酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)及碱性磷酸酶(ALP)含量,计算白球蛋白比值(A/G);放射免疫法测定透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢNP)、层粘连蛋白(LN)以及胶原Ⅳ(C-Ⅳ)的含量变化;免疫组织化学染色法检测肝组织过氧化物酶增殖体激活受体γ(PPAR-γ)和Collagen Ⅰ的含量.结果:Cur预防给药可明显降低ALT、AST的活性,升高A/G,同时降低血清HA、LN、PⅢNP、C-Ⅳ含量(F=11.535,19.927,4.831,16.415,17.596,19.692,21.535,P＜0.05);病理形态显示Cur对大鼠的肝纤维化进展有明显的抑制作用;Cur预防给药使受试动物肝组织PPAR-γ表达明显增加、Collagen Ⅰ的表达明显减少(F=6.519,7.541,P＜0.05).结论:Cur预防给药能明显抑制CCl4诱导的大鼠肝纤维化形成,可能与激活PPAR-γ,减少Collagen Ⅰ的产生,预防细胞外基质的过量沉积有关.     

胰岛素单克隆抗体制备及在2型糖尿病患者胰岛素测定中的应用

目的制备胰岛素单克隆抗体，用此抗体检测2型糖尿病患者血清胰岛素水平。方法以交联胰岛素-牛血清清蛋白为免疫原，免疫Balb／c小鼠，用杂交瘤技术制备得到4株稳定分泌胰岛素抗体的单克隆细胞株，对单抗效价、亚类、亲和常数进行了分析。利用所得单抗，通过竞争性抑制酶联免疫吸附法（ELISA）随机检测90例2型糖尿病患者血清和90例正常人血清中胰岛素的含量。结果制备的单抗亲和常数达10^11，除1株属IgGzh（k）外，其余3株为IgG1（k），检测发现2型糖尿病患者血清胰岛素含量低于正常人水平。结论2型糖尿病患者血清胰岛素平均低于正常人水平，可能由于胰腺功能衰竭所致，仍可用补充胰岛素缓解病情。约10％患者血清胰岛素含量高于正常人平均水平，可能由于体内胰岛素拮抗所致，不宜用胰岛素治疗。     

巨噬细胞表型改变在先天性巨结肠相关性小肠结肠炎中的研究

目的通过检测先天性巨结肠患儿结肠组织中巨噬细胞表型的改变,探讨巨噬细胞活化与巨结肠相关性肠炎发病之间的关系。方法收集先天性巨结肠患儿(肠炎组4例,非肠炎组6例)结肠远段及近段标本,行HE染色、评估各段肠管炎症损伤程度,CD68和iNOS免疫荧光双染法评估M1型巨噬细胞活化状况,CD68和Arg-1免疫荧光双染法评估M2型巨噬细胞活化状况,RTqPCR检测各组肠管iNOS及Arg-1的mRNA表达水平。结果免疫荧光染色显示,肠炎组近段结肠iNOS/C/D68阳性细胞的百分比(73.12±2.48)%明显高于肠炎组远段结肠(54.19±1.98)%、非肠炎组近段结肠(49.35±2.70)%及远段结肠(43.18±4.21)%;而肠炎组近段结肠Arg-1/CD68阳性细胞的百分比(33.15±4.81)%明显低于远段结肠(49.32±3.98)%;非肠炎组近段结肠Arg-1/CD68阳性细胞的百分比(45.23±1.95)%亦低于远段结肠(56.52±2.79)%,差异有统计学意义(P0.05)。RT-qPCR结果显示,肠炎组近段结肠iNOS表达明显升高,而Arg-1表达则在肠炎组及非肠炎组的远段结肠升高(P0.05)。结论先天性巨结肠相关性小肠结肠炎的发生可能与巨噬细胞向M1型转化有关。     

宁神温胆汤治疗以阴性症状为主的精神分裂症患者2年随访观察

正本观察旨在探讨宁神温胆汤和非经典抗精神病药对以阴性症状为主的精神分裂症患者的维持治疗效果、安全性、社会功能康复和服药依从性的影响。报告如下。1一般资料选取2013年6月至2014年12月入住本院精神科的精神分裂症患者317例。随访2年,宁神温胆汤组(观察组)158例完成随访157例,男85例,女72例;年龄18～60(38.5±12.1)岁;总病程3～24(14±10)年;住院1～4(1.98±1.5)次。非经典药物组(对照组)159例完成随