调脂养心冲剂调节血脂、抗氧化的实验研究

目的：本实验以雄性Wistar大鼠为动物模型，研究调脂养心冲剂的降血脂、抗氧化、抗自由基、降低过氧化脂质的作用。方法：将60只雄性Wistar大鼠随机分为正常组和高脂模型组，正常对照组12只继续基础饲料喂养，其它48只喂饲高脂饲料以造成高血脂模型，造模4周后根据血清总胆固醇（TC）值分层随机分为4组，分别给予高脂饲料，高脂饲料＋调脂养心冲剂低、中、高剂量（分别为50mg/kg、100mg／kg、200mg／kg）喂养。于第10周采尾血测TC、TG（甘油三酯）、和高密度脂蛋白胆固醇（HDL—C），测定血清和肝组织T—AOC、SOD、GSH—PX、MDA。结果：所有剂量组的TC水平都显著低于高脂模型对照组（P〈0．01或P〈0．05）；调脂养心中、高剂量组TG水平显著低于高脂模型对照组（P〈0．01或P〈0．05），且存在着明确的剂量-效应关系。调脂养心各剂量组HDL—C水平较高脂模型组为高，但差异无统计学意义（P〈0．05）。高剂量SOD、各剂量组GSH—PX的活力与高脂模型组相比均明显升高（P〈0．05），高剂量组MDA的活力明显下降（P〈0．05）。结论：调脂养心冲剂对高血脂大鼠具有调节血脂、抗机体组织脂质过氧化损伤的作用。     

葛芩片预处理心肌保护作用机理研究

目的探讨葛芩片预适应增强心肌保护作用的机理。方法采用改良推管法建立大鼠在体心肌缺血预处理模型,原位末端标记法检测细胞凋亡;免疫组化法检测蛋白激酶C(PKC)表达;羟胺法测定血清超氧化物歧化酶(SOD)活性;TBA法测定血清丙二醛(MDA)含量。结果缺血再灌注组心肌凋亡细胞数量显著增加(P<0.01)。预适应组、葛芩片低、中、高剂量预适应组细胞凋亡数均较缺血再灌注组显著减少(P<0.01);葛芩片中、高剂量组细胞凋亡数较预适应组显著减少(P<0.01或P<0.05)。缺血再灌注组PKC表达明显增多(P<0.01);预适应组、葛芩片中、高剂量组PKC表达较缺血再灌注组显著增高(P<0.01)。葛芩片高剂量组MDA含量较缺血再灌注组、预适应组、葛芩片低剂量预适应组显著降低(P<0.01或P<0.05);SOD活性较缺血再灌注组和预适应组显著升高(P<0.01)。结论葛芩片预适应增强作用与其抑制细胞凋亡、提高心肌细胞抗氧化能力有关。     

半枝莲多糖对肝癌小鼠差异表达蛋白质影响的实验研究

目的：比较分析H22肝癌小鼠与半枝莲多糖（SBPS）干预后的血清之间差异表达的蛋白,为进一步筛选出SBPS抑制肿瘤活性的靶位蛋白奠定基础。方法：建立动物模型,运用蛋白质组学技术中的双向凝胶电泳技术与计算机辅助的图像分析技术,对肿瘤组和SBPS组血清进行蛋白分离,建立图谱并用ImageMaster 5.0软件进行比较分析,通过比对分析筛选出差异表达蛋白。结果：肿瘤组与SBPS组比较发现18个差异表达的蛋白点,其中在SBPS组6个表达上调,1个表达下调,1个在SBPS组特异表达,10个在SBPS组表达缺失。结论：SBPS可以通过调节H22肝癌血清中蛋白质的表达,来实现对肝癌的治疗作用。     

启发-互动式教学法在生物化学教学中的实践

生物化学是生命科学中的重要学科,生物化学教学是培养学生创新思维和实践能力的重要手段,合理的教学方法是决定教学成功的关键.通过尝试将启发、互动运用于生物化学教学中,提高了学生的学习兴趣及分析和解决问题的能力,以达到生物化学教学目标.     

树舌多糖GF抑制肝癌细胞SMMC7721增殖及对CDK2基因表达的影响

目的:探明树舌多糖GF(Ganoderma appanatum polysaccharides GF,GAPSGF)对肝癌细胞SMMC7721增殖及CDK2表达的影响。方法:不同浓度树舌多糖GF处理肝癌细胞SMMC7721,采用MTT法检测树舌多糖GF对肝癌细胞SMMC7721增殖抑制作用;实时定量聚合酶链反应(Real-TimePCR)检测CDK2 mRNA表达;蛋白印迹法(Western blot)检测CDK2蛋白表达情况。结果:树舌多糖GF对肝癌细胞SMMC7721具有明显的生长抑制作用。其中树舌多糖GF2.5μg/mL组与树舌多糖GF10μg/mL组作用显著,且CDK2的mRNA和蛋白表达下降。结论:树舌多糖GF可能通过降低CDK2表达,抑制肝癌细胞SMMC7721增殖。     

板蓝根基因组DNA提取方法的比较

目的:建立并优化板蓝根基因组DNA的提取方法。方法:以板蓝根为实验材料,分别采用CTAB法、改进的CTAB法和试剂盒法(硅胶膜技术)对其基因组DNA进行提取和纯化,然后对其提取产物做光密度、琼脂糖凝胶电泳检测。结果:紫外光谱检测表明,常规的CTAB法的A 260/A 280比较低,不在理想值之间,而改进的CTAB法和试剂盒法均在理想值之间。琼脂糖电泳检测证实,常规的CTAB法提取的DNA条带最弱,其它两种方法的DNA条带很清晰,DNA没有降解,无拖尾现象。     

学生课堂不看教材对教学效果影响的调查研究

在教学过程中如何正确使用好教材对于学生的学习效果的影响尚欠研究,我们认为其对提高学习效果至关重要。为此就要求学生课堂不看教材的可行性和对教学效果影响等进行试验,经研究分析发现学生课堂不看教材是可行的并可提高学生分析问题和解决问题的能力以及教学效果。     

树舌多糖GF对siRNA干扰沉默CDK2基因表达的辅助作用

目的：探讨树舌多糖GF辅助siRNA干扰沉默CDK2基因表达的作用。方法：本实验采用人肝癌细胞SMMC7721为研究对象，将中药树舌多糖GF2．5μg·mL-1与siRNA干扰序列191联合应用，采用Real-timePCR方法检测CDK2基因mRNA水平表达情况。结果：树舌多糖GF2．5μg·mL-1与191序列合用比单纯应用191序列抑制率提高3％。结论：树舌多糖GF2．5μg·mL-1与191序列合用比单纯应用191序列抑制率提高3％，表明树舌多糖GF对RNAi技术沉寂肝癌CDK2基因有一定的辅助作用。     

小分子干扰RNA沉默肝癌细胞CDK2基因对RB、CyclinE、E2F1基因表达的影响

【目的】观察小分子干扰RNA(siRNA)沉默细胞周期素依赖性蛋白激酶(CDK2)基因后,细胞周期相关基因RB、CyclinE、E2F1在肝癌细胞SMMC7721中mRNA的表达。【方法】将前期研究中已构建成功并筛选出的最有效干扰抑制CDK2基因的siRNA序列片段,采用Lipofectamine TM2000脂质体转染法转染肝癌细胞株SMMC7721后分6组:重组质粒组190、重组质粒组191、SMMC7721肝癌组、转染试剂组、阴性对照组、空质粒组。采用实时荧光定量PCR法检测RB、CyclinE、E2F1 mRNA水平。【结果】CDK2的siRNA转染SMMC7721细胞后,RB基因mRNA表达上调,CyclinE、E2F1基因mRNA表达下调。【结论】抑制CDK2基因的表达能使肝癌细胞SMMC7721中RB基因mRNA表达上调,CyclinE、E2F1基因mRNA表达下调,提示肝癌细胞中RB、CyclinE、E2F1基因的表达与CDK2基因的表达具有明显的相关性。     

树舌多糖GF对肝癌细胞的增殖抑制作用及对RB基因mRNA表达的影响

目的:研究树舌多糖GF对肝癌细胞的增殖抑制作用以及对RB基因mRNA表达的影响.方法:利用CCK-8法观察树舌多糖GF对肝癌细胞增殖抑制作用,并筛选出有效剂量;以SMMC7721为研究对象,在mRNA水平探究其对RB基因表达的影响.结果:CCK-8法表明,树舌多糖GF各剂量组和对照组比较,OD490nm均明显降低,有显著性差异(P＜0.01),其中树舌多糖GF2.5 μg/mL、5μg/mL、10μg/mL剂量组对SMMC7721细胞增殖的抑制效果最强,抑制率分别是20.01％、20.47％、24.44％.结论:树舌多糖GF可明显上调RB基因的mRNA表达水平,从而实现对肝癌细胞的增殖抑制作用.