微生物群体多样性在法庭地理学上的应用前景

法庭地理学(Forensic Geology)是一门基于土壤物证在法庭科学中的重要意义而新建立的学科分支,主要是对现场采集的土壤物证进行检验和分析,从而为案件的侦破提供线索[1].     

法庭科学中的土壤检验方法及其应用

土壤是一个复杂的生物系统 ,其中包含多种金属、动植物残体、花粉 ,以及微生物群体等 ,并受特定的地形、气候、形成初期的质地等非生物因子 ,以及微生物环境、人类活动等生物因子的影响。因此 ,不同的土壤样品间在组分及各组分的含量存在相当大的差异 ,如各种金属、矿物质等。在一定时期内 ,这些差异具有相对稳定性 ,使土壤可以作为一种物证应用于法庭科学。人类以各种形式研究土壤并将之应用于案件调查中已有上千年的历史[1] 。土壤检验可为犯罪嫌疑人和犯罪现场是否具有关联提供极为重要的证据 ,并为案件的侦破提供方向和范围。国外有些学…     

利用人体外周血痕sjTREC含量推断个体年龄

目的验证人外周血中信号结合T细胞受体删除DNA环(signal joint T-cell receptor excision DNAcircle,sjTREC)水平与年龄的相关性公式,探讨其在鉴定实践中的应用价值。方法收集已知年龄的健康无关个体外周血痕样品30例,室温放置4周后,分别提取血痕DNA。通过实时荧光定量PCR技术,定量测定外周血痕DNA中sjTREC含量,并选择人TATA盒结合蛋白(TATA box binding protein,TBP)序列作为内参基因。采用年龄推断公式Age=-7.1815Y-42.458±9.42(Y=dCtTBP-sjTREC)推算血痕的供体年龄,并与供体实际年龄作比较,验证方法准确性。结果在收集的30例血痕样品中均能检测到目的基因sjTREC和内参基因TBP。外周血痕sjTREC含量随供体年龄的增长而降低(P0.01)。采用本方法推断血痕个体年龄的准确率为76.67%。结论利用sjTREC含量推断血痕个体年龄的方法简单、快速、灵敏、种属特异性好,具有重要的应用前景。     

尿斑的DNA检验1例

1案件简价2006年1月,南方某市一女子被杀;警方在现场勘查中提取到一件部分被液体浸泡的有色毛衣(经当地鉴定该液体为尿液)。为确定这份尿斑为何人所留,办案单位于半年后将以上检材送检,要求进行DNA鉴定。2检验方法检材为现场提取的毛衣1件。在毛衣被液体浸泡之处(有黄色斑迹)分别剪取2处1cm2大小的斑迹(编号为1、1R)各置于1.5ml空离心管中,加入500μl磁珠裂解液(Promega公司)和20μl PK(5mol/L),56℃保温1h,13000r/min离心3min,吸取上清,移入干净的离心管中,此后依照DNA IQTMsystem进行DNA提取,方法详见试剂盒说明书,最后用20μl的…     

细胞mRNA检测鉴别外周血和月经血

目的探讨鉴别月经血和外周血的一种新方法。方法采集月经血和外周血样本,试剂盒提取样本RNA,反转录试剂盒反转录后得到cDNA,利用挑选的引物进行PCR扩增,检测若干个特定基因mRNA的表达情况。结果发现在外周血中可检测到SPTB(β-血影蛋白)、PBGD(卟胆原脱氨酶)基因mRNA,但检测不到MMP-7(基质金属蛋白酶-7)基因mRNA;而在月经血中三种基因mRNA都可以检测到。结论检测SPTB mRNA、PBGD mRNA、MMP-7 mRNA的表达有可能鉴别外周血和月经血。     

接触DNA检验成功率的影响因素探讨

人在接触物体后,会在物体表面留下少量的接触DNA,对它的检验是目前法医DNA检验的热点和难点。在不同情况下,接触DNA的STR检验成功率差异较大。影响接触DNA检验成功率的主要因素有个体差异、载体属性、接触时间、遗留时间、检验时能否突出重点部位、检验策略的选取和结果分析等,本文详细综述了接触DNA检验成功率的影响因素。     

葡萄胎的DNA检验

目的探讨一例强奸案中的葡萄胎样本的DNA检验及结果分析。方法用Identifiler试剂盒对葡萄胎样本和受害人血样进行荧光复合STR基因座扩增并分型。结果该例的葡萄胎在15个STR基因座上分型均为纯合子,应属于单精子受精的完全性葡萄胎。结论葡萄胎类型多种,对应着不同的DNA分型,在实际案件的检验中应引起注意。     

微量DNA:容易忽略的生物物证

PCR技术的出现,大大提高了法医DNA分析技术的灵敏度,尤其是STR复合扩增技术的应用,不仅如同DNA指纹技术一样能够进行同一认定,而且使其灵敏度达到了纳克级以下的水平,大大提高了其解决微量、降解DNA的分析能力.Findlay等[1]成功地分析了低至单个细胞水平的模板DNA;Van Hoofstat等[2]利用DNA技术分析现场遗留指纹进行检验;Barbaro等[3]利用DNA技术对毛干进行检验;Schmerer等[4]和Burger等[5]分别用60和50个循环分析古代骨骼DNA;Van Oorschot和Jones[6]利用PCR检验,从电话话筒、钢笔、手提箱把手等提取的检材样品中得到DNA分型;Wickenheiser[7]从被盗汽车的方向盘上提取DNA进行STR分型,从而认定罪犯.以上研究报道的结果表明,现有的DNA技术能够对微量DNA进行检验.     

脱落毛发及毛干DNA的STR分型研究

目的探讨脱落毛发及毛干细胞核DNA提取、含量和STR分型问题。方法对脱落毛发或毛干进行DNA提取和定量,使用低扩增体系、增加循环次数和多次平行扩增等方法扩增DNA样本,采用叠加比较的方法分析STR分型。结果15cm脱落毛发样品DNA含量大于0．3ng的样品占52．8％,STR分型成功率为55．6％;15cm毛干样品DNA含量大于0．3ng的样品占30．6％,STR分型成功率为25％。结论采用增加循环次数、多次平行扩增等LCN—STR分型方法和Mini—STR试剂盒有助于脱落毛发及毛千的STR基因座分型获得。     

土壤细菌群体多样性的T-RFLP分析应用探讨

目的探讨土壤细菌群体多样性的末端限制性片段长度多态性（terminal restriction fragment length polymorphism，T-RFLP）分析在法庭科学应用的相关问题。方法依据不同土壤中的细菌群体存在多样性和差异，联合利用细菌16SrDNA序列、末端限制性片段长度多态性（terminal restriction fragment length polymorphism，T-RFLP）方法对5个来源不同的土壤样品和4个同一来源土壤样品的细菌群体多样性进行比较分析，计算土壤样品间的相似系数。结果不同来源的5个土壤样品间相似系数，最大者为0．44，最小为0．3；同一来源的4个土壤样品相似系数，最大为0．87，最小为0．76。结论不同来源土壤的细菌群体多样性存在差异。