机械牵张应力对成骨细胞的影响研究进展

正常骨骼处于一个吸收与生长重建的连续过程，成骨细胞与破骨细胞的生理活性保持着动态平衡，机械力学刺激是必不可少的条件之一。大量研究表明：机械力学刺激过低时，如宇航失重和长期卧床、肢体制动的人员均可导致骨密度、骨钙含量、骨基质蛋白、骨形成速度的降低；而绝经后妇女进行适当的活动锻炼、增加骨骼载荷，可减少其骨质疏松的发生。体内力学环境复杂，而离体实验可以通过设计特定的加载方式，来控制各种变量（力学的不同类型、大小、频率、时间和细胞的不同种系等），观察细胞对力学刺激的响应。体内实验及临床应用，发现适当的牵张应力在骨折修复、正畸牙移动以及牵拉成骨（颌骨发育不足的矫治、骨缺损的整复、肢体延长）等中，能刺激骨组织自身生长与重建。成骨细胞是其中重要的感受与效应细胞．可通过力敏感离子通道、G蛋白与酪氨酸激酶、整合素受体与细胞骨架等多种途径，感受体内外力学刺激，并将力学刺激信号转化为细胞生物化学信号，介导力相关敏感基因表达，合成各种酶类等活性物质，激活信号网络级联反应，参与一系列复杂的生理病理活动。国内外有关机械牵张应力对体外培养成骨细胞影响的研究，为牵张应力在骨科的应用提供了大量的理论和实验依据。     

Cajal间质细胞在先天性巨结肠和巨结肠同源病结肠中的分布研究

目的研究先天性巨结肠（Hirschsprung’s disease，HD）和巨结肠同源病（allied Hirschsprung’s disease，AHD）肠壁内Cajal间质细胞（interstitial cells of Cajal，ICCs）的分布状态，探讨HD和AHD的发病机制。方法选择确诊为HD和AHD的患者各20例，取巨结肠根治术吻合口远端的全层肠壁作为实验组，另取16例正常结肠标本作为对照组。用鼠抗人c—kit单克隆抗体（CD117）标记ICCs，Image Pro-Plus图像分析系统检测ICCs。结果对照组中大量ICCs分布在肌间神经丛周围和环纵肌层内，ICCs包绕神经丛周围，肌层间ICCs连续分布；HD组远端肠管中肌层间和各肌层内ICCs明显减少甚至缺如，与对照组比较差异有统计学意义，P〈0．01；AHD组远端肠管中神经丛大小不一，ICCs分布差异大，大多数神经丛区ICCs减少，环肌层内ICCs明显减少，与AHD组和对照组比较差异有统计学意义，P〈0.01。HD组远端结肠中ICCs减少比AHD组显著，差异有统计学意义，P〈0．01。结论HD、AHD病变肠管中除了神经节细胞的异常外，同时存在ICCs异常；ICCs在HD和AHD的分布不同可能与两者临床症状差异有关；肠管中ICCs数量可能与临床症状及预后有一定关系。     

体外小儿骨髓间充质干细胞对牵张应力早期应答反应的研究

目的 观察体外小儿骨髓间充质干细胞(MSCs)对周期性牵张应力的早期应答反应.方法 分离并培养小儿MSCs,利用体外细胞牵张应力装置对第三～六代细胞加载短期力学信号,检测各组细胞内Oa2+以及早期反应基因蛋白(c-fos、c-jun和c-myc)的表达情况.结果 应力干预MSCs后,细胞内Ca3+浓度在受力1min后即增高,荧光强度是对照组的164.63%,3、5min升高更明显,干预10 min后Ca2+浓度升高的幅度有下降趋势;c-fos、c-jun和c-myc基因蛋白在未受力组细胞内不表达或微量表达,加载力学信号后,表达发生了明显的变化,随时间的延长,均表现为增强-持续-回复原来水平.结论 周期性牵张应力影响MSCs内Ca2+的浓度及早期反应基因蛋白(c-fos、c-jun和c-myc)的表达,推测c-fos、c-jun和c-myc参与了MSCs响应力学的信号传导途径,可能依赖Ca2+通道的活化来调控.     

先天性巨结肠症术后小肠结肠炎发生与合并神经节细胞减少症的相关性分析

目的探讨先天性巨结肠症（HD）合并神经节细胞减少（HYP）与术后肠炎发生的相关性。方法对97例在我院行巨结肠根治术的患儿进行随访，随访时间1．5～8年，平均3．4年。分为两组：A组70例，为HD；B组27例，为HD合并HYP。对其排便功能与术后小肠结肠炎（EC）的发生情况进行分析比较。结果A组术后发生肠炎有8例（11．4%），B组发生肠炎有11例（40．7％），两组相比较差异有统计学意义（P〈0．005）。按照李正的评分系统，A组排便功能评分为优者比率为85．7％，明显高于B组的62．9％（P〈0．05）。A组便秘复发率为2．9％（2／70），B组为14．8％（4／27），但两者之间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论HD合并HYP患儿术后较HD更易发生小肠结肠炎，完全切除HYP肠管可降低EC的发生率，减轻肠炎发生的程度。     

机械力学对体外骨髓间充质干细胞的影响

目的:分析力学刺激体外骨髓间充质干细胞所产生增殖分化等生物学效应的影响及其力化学信号转导途径。资料来源:因特网上检索PubMed数据库中2000-01/2006-06期间有关力学刺激对骨髓干细胞作用效应进展的英文文章,检索词“stem cel1,marrow mesenchymal stem cells,mechanical stimulation,stress”,同时检索CNKI中国知网医学文献数据库2000-01/2006-06期间的相关文章,检索词为“干细胞、骨髓间充质干细胞、机械刺激、应力”。资料选择:对资料进行筛选,选取相关文章查找全文。纳入标准:①骨髓间充质干细胞相关生物学特性。②体外细胞加载的应力分类及相应力学装置的特点。③应力对细胞影响的研究。④能获取文章的全文。排除标准:①较陈旧的文献。②重复研究。资料提炼:共收集关于86篇体外骨髓干细胞及力学干预的相关文献。其中30篇符合纳入标准。资料综合:①骨髓干细胞具有高度增殖及多向分化能力,可通过体外培养、干预作为细胞组织工程的理想种子细胞。②力学刺激是体外调节细胞生物学效应的重要途径,其中力学分类有:流体切应力、静止压应力、张应力、离心力以及单个细胞的吸吮力等,介绍各种力以及相应的力学装置的特点。③骨髓干细胞加载各种应力干预后产生的生物学效应,以及细胞应力学刺激的机制、信号转导途径。结论:力学刺激可影响骨髓间充质干细胞生物学特性,在适当的力学刺激条件下,促进细胞的增殖与分化,为骨组织工程提供新的技术手段,同时也为临床应用牵拉成骨的骨再生过程提供理论依据。     

尺骨冠状突重建的研究进展北大核心CSCD

尺骨冠状突是肘关节的重要结构,对维持肘关节稳定性起重要作用,冠状突高度的丢失则可能导致肘关节不稳定。冠状突骨折的诊断及修复在临床上备受关注,但是对于影响肘关节稳定性的冠状突骨折缺损的重建,目前国内外文献报道不多。冠状突缺损导致的肘关节不稳定,并且大多合并肘关节其他损伤,临床处理困难,疗效不确切,本文就冠状突重建的进展作一综述。     

组合皮瓣修复小腿及足踝部大面积软组织缺损

目的 探讨应用组合皮瓣修复小腿及足踝部大面积软组织缺损的临床应用价值和手术技巧. 方法 2005年1月至2008年12月采用组合皮瓣移植治疗36例小腿及足踝部大面积软组织缺损患者,其中采用游离股前外侧肌皮瓣组合携带健侧胫后血管的单桥式皮瓣修复14例,游离股前外侧肌皮瓣组合腓肠神经营养血管皮瓣修复11例,游离背阔肌皮瓣组合带健侧胫后血管的单桥式皮瓣修复6例,游离胸脐皮瓣组合局部转移腓肠肌皮瓣修复3例,游离股前外侧穿支皮瓣组合游离胸脐皮瓣修复1例,游离股前外侧肌皮瓣、游离胸脐皮瓣分别组合携带顺、逆行健侧胫后血管的双桥式皮瓣修复1例. 结果 本组有3例术后出现血管危象并进行了血管探查,解除动脉危象后1例游离皮瓣成活,1例游离皮瓣边缘坏死经换药后创面愈合,另1例静脉栓塞探查术后游离皮瓣部分坏死.其余33例患者移植组织令部成活,创面一期修复,总成功率为97.2%(35/36).术后随访4～36个月,平均16个月,皮瓣质地柔软,外形良好,患肢足踝功能恢复满意. 结论 采用不同形式的组合皮瓣移植,为小腿及足踝部大面积软组织缺损的修复提供了一个可行且有效的技术方法 ,手术虽有一定风险,但可有效降低伤残率,恢复肢体功能,缩短疗程.     

经皮加压钢板微创内固定治疗股骨转子间骨折的初步体会并文献复习

目的 探讨初步应用PCCP内固定系统治疗股骨转子间骨折的临床疗效. 方法总结大陆首例PCCP治疗的股骨转子间骨折的手术技术,术中骨折闭合复位后,C型臂定位切口位置,安放钢板,冉按一定顺序打科颈螺钉以及锁钉.术后逐月随访,分析患者恢复状况,并对国外应用PCCP系统的文献进行复习比较,评价目前PCCP系统治疗骨折的优缺点. 结果 本例患者骨折部位复位良好,PCCP钢板固定牢固,手术历时90 min,手术出血约100 mL,术后3个月患肢髋关节活动自如(伸屈0～150°),Harris系统评分为91分. 结论 PCCP系统对骨折固定牢固可靠、微创,术后患者恢复较快,是治疗股骨转子间骨折的一种理想选择.     

新生儿细小结肠畸形病因分析及诊断治疗

目的探讨新生儿细小结肠症的常见病因、病理特点及合理的诊疗措施。方法对经钡剂灌肠造影和手术探查证实为新生儿细小结肠症的18例病历资料回顾性分析。结果全组18例,原发于结肠神经节细胞缺如5例,继发于近端肠管病变13例,出生后呕吐、腹胀、胎便排出异常等是其主要临床表现,11例行肠切除吻合,7例行肠造瘘(半年~1年后行二期手术),14例存活恢复良好,4例死亡。结论新生儿细小结肠症应尽早行手术恢复大便通畅。     

大鼠骨髓间充质干细胞体外向肠神经细胞分化及胶质细胞源神经营养因子表达的变化

目的 探讨大鼠骨髓间充质干细胞向肠神经分化的条件及胶质细胞源神经营养因子(glial cellline-derived neurotrophic factor,GDNF)及其受体RET基因表达的变化.方法 体外培养大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs),传至第四代,进行诱导分化.以10ng/ml GDNF和10%FBS的稀释胎肠培养基(fetal gut culture medium,FCCM)以及仅含有10 ng/ml GDNF的L-DMEM诱导7 d,对照组为含10%FBS的L-DMEM完全培养液,免疫组化的方法鉴定细胞的神经特异性烯醇化酶(neural specific enolase,NSE)、血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide,VIP)及一氧化氮合酶(nit ric oxide synthase,nNOS)的表达.RT-PCR检测GDNF及RET mRNA的变化,Westem Blot方法检测GDNF蛋白的表达情况.结果 BMSCs能在体外成功培养及纯化,诱导7 d后,实验组均可见NSE、VIP及nNOS的表达,两实验组的阳性率有统计学差异,而对照组为阴性.RT-PCR检测示,BMSCs向肠神经细胞诱导后,GDNF表达显著增强,并促使RET基因表达Western Blot结果提示,诱导后的细胞GDNF在蛋白水平上表达增强.结论 GDNF联合FCCM可诱导BMSCs分化为肠神经细胞,在向神经细胞分化的过程中,能促进GDNF表达的增强,并促使RET基因的表达,GDNF-RET信号通路在肠神经分化过程中可能发挥着重要作用.