同型半胱氨酸对高血压患者脑卒中复发风险的影响

目的探讨高血压合并脑卒中患者的血浆同型半胱氨酸（Hcy）水平与其他危险因素对于脑卒中复发的影响。 方法分析徐州市中心医院心内科和徐州医科大学附属医院神经外科自2012年5月至2013年12月收治的1623例高血压脑卒中患者的基线资料，中位随访4.9年，根据随访事件中是否发生脑卒中分为复发组（312例）与未复发组（1311例）。Kaplan-Meier生存分析比较不同危险因素脑卒中复发率的差异，单因素与多因素Cox回归模型分析影响脑卒中复发的独立危险因素，以及危险因素之间的交互作用。 结果复发组年龄、空腹血糖、Lg Hcy的水平，以及糖尿病、房颤的患病率均高于未复发组（P<0.05）。Kaplan-Meier生存分析显示，糖尿病、房颤、年龄≥60岁、空腹血糖≥7.0 mmol/L、Hcy≥15 μmol/L的脑卒中复发率明显升高（Log-rank检验，P<0.05）。多因素Cox回归模型分析显示，高龄、Lg Hcy水平升高，以及房颤、糖尿病是脑卒中复发的独立危险因素。Lg Hcy分别与糖尿病、空腹血糖、年龄存在交互作用。 结论血浆Hcy水平升高既是高血压合并脑卒中患者卒中复发的独立危险因素，又通过与糖尿病、高龄、空腹血糖水平升高的交互作用显著增加脑卒中复发风险。     

表达白细胞介素18的条件增殖腺病毒在肾癌Ketr-3细胞中的生物活性及抗肿瘤作用

目的 观察表达白细胞介素18(IL-18)基因的条件增殖腺病毒在肾癌Ketr-3细胞中的生物活性及其对Ketr-3细胞的杀伤作用.方法 通过荧光显微镜观察表达绿色荧光蛋白的条件增殖腺病毒(ZD55-EGFP)在肾癌Ketr-3细胞中的感染和增殖情况.分别将表达IL-18的条件增殖腺病毒(ZD55-IL-18)及表达IL-18的普通腺病毒(Ad-IL-18)感染人肾癌Ketr-3细胞系,通过Western blot法检测病毒E1A和IL-18蛋白的表达;免疫细胞化学染色检测IL-18抗原表达;TUNEL法检测Ketr-3细胞的凋亡情况;噻唑蓝(MTT)比色法检测Ketr-3细胞存活情况.结果 ZD55-EGFP能有效感染肾癌Ketr-3细胞并在其中大量增殖.Westem blot检测结果 发现ZD55-IL-18能在肿瘤细胞内表达E1 A并有效介导IL-18表达,在病毒感染Ketr-3细胞48 h后,ZD55-IL-18、Ad-IL-18处理组的IL-18蛋白表达量分别为255.6±3.1、118.7±2.90免疫组织化学检测显示ZD55-IL-18、Ad-IL-18处理组的IL-18抗原阳性率分别为(82.4±3.2)%和(23.4±1.9)%.TNUEL检测结果 显示ZD55-IL-18、Ad-IL-18处理组的细胞凋亡率分别为(52.2±3.5)%和(25.5±1.9)%.病毒感染4 d后,MTT检测结果 显示ZD55-IL-18、Ad-IL-18处理组细胞存活率分别为(32.6±2.3)%和(73.3±2.5)%,表明ZD55-IL-18对Ketr-3细胞有显著的杀伤作用.结论 ZD55-IL-18能在Kerr-3细胞中高效特异性表达IL-18基因并显示出良好的抗肿瘤作用.     

肿瘤坏死相关凋亡诱导配体对前列腺癌及膀胱癌细胞增殖、凋亡的作用

目的:研究重组并纯化的肿瘤坏死因子凋亡诱导配体(TRAIL)蛋白对前列腺癌及膀胱癌细胞增殖及凋亡的影响。方法:将不同浓度的TRAIL蛋白与培养的前列腺癌细胞(PC-3细胞)和膀胱癌细胞(5637细胞)共孵育24 h后,采用细胞增殖实验及流式细胞术检测肿瘤细胞的增殖及凋亡。结果:PC-3细胞株中,与未处理组比较,TRAIL蛋白浓度在20、40、80、160 ng·ml-1时细胞增殖率均有显著性差异;而在5637细胞株中,与未处理组比较,TRAIL蛋白浓度在5、10、20、40 ng·ml-1时细胞增殖率均有显著性差异。流式细胞实验结果也证实,随TRAIL蛋白浓度的增高,两种肿瘤细胞凋亡率增加。结论:重组并纯化TRAIL蛋白可通过抑制前列腺癌及膀胱癌细胞的增殖,诱导其凋亡而产生抗肿瘤的作用。     

3种建立人肾癌皮下荷瘤裸鼠模型方法比较

目的建立3种人肾癌皮下荷瘤裸鼠模型,优选建模方法。方法采用Bal/c裸鼠,分别通过直接注射细胞悬液(方法一)、肿块包埋(方法二)和经过引瘤后原代细胞培养注射细胞悬液(方法三)3种方法建立人肾癌皮下荷瘤裸鼠模型,并取瘤组织进行病理检查。结果方法一成瘤率为53.3%,成瘤时间平均为(14.5±1.64)天,2周时肿瘤平均大小为(147.2±8.7)mm3;方法二成瘤率为93.3%,成瘤时间平均为(10.5±0.87)天,2周时肿瘤平均大小为(198.3±17.2)mm3;方法三成瘤率为76.7%,成瘤时间平均为(11.2±0.87)天,2周时肿瘤平均大小为(182.4±5.6)mm3,3组的瘤组织病理检查无明显差别。结论经过引瘤后原位细胞培养,然后注射细胞悬液,是建立肾癌模型和进行生物治疗研究的合理方案。     

胫骨下端恶性骨肿瘤切除后大段异体骨重建

目的应用大段异体骨移植及踝关节融合的保肢方法治疗胫骨下端恶性肿瘤和侵袭性肿瘤，并从预后、术后并发症及功能等几个方面加以评价。方法自1998年1月至2005年12月应用大段异体骨移植及踝关节融合的保肢方法治疗胫骨下端肿瘤患者11例；包括骨肉瘤8例，骨巨细胞瘤2例，软骨肉瘤1例。对骨肉瘤患者行新辅助化疗，按照Enneking分期，手术行边缘切除或广泛切除，应用大段深低温冷冻保存同种异体骨重建，钢板螺钉或带锁髓内钉固定。结果术后随访18-78个月，平均47个月。其中8例骨肉瘤患者随访28-78个月，平均50个月。11例均获得良好的骨愈合，开始出现骨愈合时间为术后3-18个月，平均8个月。无异体骨反应继发感染，无内固定失败。异体骨骨折1例，复发2例，肺转移3例，保肢率为81．8％。术后功能评定采用骨骼肌肉系统肿瘤手术治疗后重建功能评估系统（MSTS系统），评分为16～27分，平均24-3分。结论胫骨下端虽然软组织覆盖较薄，血运相对较差，但保肢术后肿瘤复发率不高，异体骨感染、不愈合、骨折率较低。固定方式以髓内固定为佳。大段异体骨移植及踝关节融合的保肢方法术后功能良好，给患者带来较大的心理安慰，是一种较好的保肢方式。     

CHA2DS2-VASc评分在心力衰竭患者血栓栓塞风险预测中的应用

目的分析不同纽约心脏协会（NYHA）心功能分级心力衰竭患者的血栓栓塞风险差异及CHA₂DS₂-VASc评分对于心力衰竭患者血栓栓塞事件的预测价值。 方法回顾性分析4 360例心力衰竭住院患者的CHA₂DS₂-VASc评分，根据心功能的受损状况将其分为NYHA Ⅰ级组（1 180例）、NYHA Ⅱ级组（1 168例）、NYHA Ⅲ级组（1 187例）和NYHA Ⅳ级组（825例）。采用Logistic回归模型分析NYHA心功能分级对心力衰竭患者罹患血栓栓塞疾病风险的影响，NYHA心功能分级与CHA₂DS₂-VASc评分之间的线性相关度用Spearman相关系数表示，采用受试者工作特征（ROC）曲线的曲线下面积（AUC）判定CHA₂DS₂-VASc评分对于心力衰竭患者发生血栓栓塞风险的预测价值。 结果4组患者间年龄（F = 106.490，P<0.001）、女性（H = 79.101，P< 0.001）、年龄亚组（H = 256.557，P<0.001）、高血压（H = 8.092，P = 0.044）、糖尿病（H = 8.060，P = 0.045）、血栓栓塞疾病（H = 41.427，P<0.001）、血管疾病（H = 40.567，P < 0.001）、高脂血症（H = 260.762，P < 0.001）及心房颤动（H = 306.597，P < 0.001）比例的比较，差异均有统计学意义。且与NYHA Ⅰ级组比较，女性比例，NYHA Ⅱ~Ⅳ级组患者中65~74岁与≥ 75岁比例，以及患糖尿病、血栓栓塞疾病、血管疾病、心房颤动比例均显著升高（P均< 0.05）。Logistic回归模型校正危险因素后发现，NYHA Ⅲ级[比值比（OR）=1.500，95%置信区间（CI）（1.126，1.999），P = 0.006]与NYHA Ⅳ级[OR = 1.688，95%CI（1.239，2.300），P = 0.001]均是心力衰竭患者发生血栓栓塞的独立危险因素。心功能级别与CHA₂DS₂-VASc评分两变量之间呈弱相关（r = 0.193，P < 0.001）。ROC曲线分析结果显示CHA₂DS₂-VASc评分[AUC = 0.902，95%CI（0.890，0.915），P < 0.001]对于心力衰竭患者血栓栓塞风险的预测价值较高。 结论心力衰竭患者NYHA心功能分级越高，血栓栓塞风险越高。合并血栓栓塞高危因素时，可采用CHA₂DS₂-VASc评分系统评估栓塞风险的同时给予恰当的抗凝治疗，降低栓塞事件发生率。     

双调控溶瘤腺病毒介导超抗原SEA基因靶向膀胱肿瘤表达

目的 构建携带SEA基因的选择性增殖腺病毒,体外实验观察SEA基因的表达及其刺激淋巴细胞对肿瘤的杀伤功能.方法 构建一种由端粒酶(hTERT)和缺氧反应元件(HIF)双重启动的携带SEA的选择性增殖腺病毒,通过逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测SEA在肿瘤细胞内mRNA表达,免疫荧光定位SEA表达于肿瘤细胞,Western blot测定蛋白表达,显微镜下动态观测淋巴细胞与肿瘤细胞共培养.酶联免疫吸附试验(ELISA)检测白细胞介素(IL)-4分泌.结果 琼脂糖电泳252 bp处可见清晰条带;免疫荧光及Western blot用考马斯亮蓝染色显示在27 kDa附近可见蛋白清晰表达;淋巴细胞与肿瘤细胞共培养12、24、48 h实验组肿瘤细胞明显少于对照组,ELISA检测IL-4分泌量实验组均高于对照组(t=2.585 P＜0.05).结论 携带SEA基因的选择性腺病毒成功构建并表达目的基因,证明对肿瘤细胞的杀伤作用.     

应用前侧皮瓣的半骨盆截肢术

 目的 探讨应用前方带股血管蒂的股四头肌肌皮瓣覆盖臀后部创面的半骨盆截肢术(前侧皮瓣半骨盆截肢术)的手术适应证、手术方法、患者预后和并发症情况。方法 自2009年4月至2010年10月,北京积水潭医院骨肿瘤科对10例患者采用前侧皮瓣半骨盆截肢术,男9例,女1例;年龄30~62岁,平均45岁。软骨肉瘤7例、上皮样肉瘤1例、多形性脂肪肉瘤1例、梭形细胞肉瘤1例。结果 9例患者获得随访,随访时间12~30个月,平均21.5个月。术后仅1例出现轻度皮缘坏死,无伤口感染者。局部复发3例(33.3%),2例软骨肉瘤、1例上皮样肉瘤。死亡3例(33.3%),包括复发的2例、另1例软组织脂肪肉瘤患者因肺转移死亡;1例复发患者带瘤存活;2例患者肺转移带瘤存活;余3例未见复发和转移。结论 前侧皮瓣半骨盆截肢术适用于：(1)臀后部软组织肿块侵及皮肤皮下或反应区到达皮下;(2)骨盆恶性肿瘤复发需行半骨盆截肢,原手术切口污染臀部软组织,无法使用常规后侧皮瓣;(3)臀部皮肤软组织因放疗等原因影响后侧皮瓣血运。此手术的必要条件是髂外血管到股血管通畅良好,可顺利游离且不在肿瘤反应区内。适应证明确的情况下,前侧皮瓣覆盖较常规后侧半骨盆截肢更便于操作和覆盖,便于获得更好的外科边界,术后并发症少。     

双调控溶瘤腺病毒携带SEA基因靶向鼠膀胱癌的表达

目的:研究hTERT和HIF启动子双调控的溶瘤腺病毒能否感染鼠膀胱癌细胞并表达治疗基因,为动物实验提供依据.方法:以不同浓度溶瘤腺病毒感染鼠膀胱癌细胞,生物倒置显微镜下动态观察细胞形态变化,RT-PCR检测SEA在细胞内mRNA表达,Western blot检测SEA蛋白表达.结果:镜下可见细胞感染腺病毒并最终裂解,RT-PCR和Western blot分别检测到实验组mRNA和蛋白的表达.结论:携带SEA基因的hTERT/HIF双调控溶瘤腺病毒可在鼠膀胱癌细胞内复制增殖并表达SEA基因,可用于治疗鼠膀胱癌的动物实验研究.     

Subchondral Bone grafting reduces degenerative change of knee joint in patients of giant cell tumor of bone

Background Giant cell tumors (GCTs) most commonly occur around the knee.The most beneficial procedure for this disease has been extensive curettage with reconstruction.However,since many GCTs may compr...