金黄地鼠前列腺分泌蛋白对输卵管液糖蛋白的影响

目的：在整体水平探讨前列腺分泌蛋白对金黄地鼠输卵管液中糖蛋白的影响。方法：金黄地鼠雄鼠依据手术方式的不同分为3组，分别为假手术组（SH）、附属性腺全去组（TX）和腹前列腺组（VP）（仅存前列腺）。收集与各手术组交配后不同时间点（交配后0.5、2、4、6h）的输卵管液（每一时间点及每一组，n=3），输卵管液蛋白经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，考马斯亮蓝或阿仙蓝染色分析，应用蛋白电泳印迹后与系列某一种特异性糖基专一性结合凝集素反应，分析糖蛋白的变化。结果：不同组雄鼠交配及不同时间点收集输卵管液蛋白电泳谱类似，约15条主要条带。凝集素结合谱示，麦胚凝集素（WGA）结合的相对分子质量（Mr）为32000、35500、47000、52000糖蛋白见于6hVP组输卵管液，而6h TX组可见Mr为81000、128000条带；与豌豆凝集素（PSA）结合Mr为37500、32000糖蛋白仅见于6h VP组，而6h TX组缺乏；仅6hVP组可见与双花扁豆凝集素（DBA）结合Mr为52000、47000糖蛋白，而6h TX组缺乏。而0.5、2、4h时间点收集的输卵管液各凝集素结合谱相似。结论：前列腺分泌蛋白可影响修饰交配6h后的输卵管液中含乙酰氨基葡萄糖、N-乙酰半乳糖胺／半乳糖和甘露糖糖链的糖蛋白。这些糖蛋白可能在胚胎的发育过程中起作用。     

金黄地鼠前列腺分泌蛋白对输卵管液糖蛋白的影响

目的:在整体水平探讨前列腺分泌蛋白对金黄地鼠输卵管液中糖蛋白的影响。方法:金黄地鼠雄鼠依据手术方式的不同分为3组,分别为假手术组(SH)、附属性腺全去组(TX)和腹前列腺组(VP)(仅存前列腺)。收集与各手术组交配后不同时间点(交配后0.5、2、4、6h)的输卵管液(每一时间点及每一组,n=3),输卵管液蛋白经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,考马斯亮蓝或阿仙蓝染色分析,应用蛋白电泳印迹后与系列某一种特异性糖基专一性结合凝集素反应,分析糖蛋白的变化。结果:不同组雄鼠交配及不同时间点收集输卵管液蛋白电泳谱类似,约15条主要条带。凝集素结合谱示,麦胚凝集素(WGA)结合的相对分子质量(Mr)为32000、35500、47000、52000糖蛋白见于6h VP组输卵管液,而6h TX组可见Mr为81000、128000条带;与豌豆凝集素(PSA)结合Mr为37500、32000糖蛋白仅见于6h VP组,而6h TX组缺乏;仅6h VP组可见与双花扁豆凝集素(DBA)结合Mr为52000、47000糖蛋白,而6h TX组缺乏。而0.5、2、4h时间点收集的输卵管液各凝集素结合谱相似。结论:前列腺分泌蛋白可影响修饰交配6h后的输卵管液中含乙酰氨基葡萄糖、N-乙酰半乳糖胺/半乳糖和甘露糖糖链的糖蛋白。这些糖蛋白可能在胚胎的发育过程中起作用。     

金黄地鼠腹侧前列腺来源蛋白结合精子表面的实验研究

目的:探讨前列腺分泌蛋白是否可结合于精子表面。方法:以金黄地鼠作为研究对象,应用间接免疫荧光和亲和素标记的蛋白转印方法检测前列腺分泌蛋白是否可结合于精子。制备的抗前列腺粗提取物多克隆抗体,间接免疫荧光技术检测体外与前列腺分泌物孵育的附睾精子,以及体内分别与含前列腺及去除前列腺雄鼠交配后收集的子宫腔内和输卵管腔内精子的前列腺成分抗原。前列腺提取物经电泳分离转膜后和生物素标记附睾精子膜蛋白作用,测定在体外前列腺分泌蛋白能否与附睾精子膜结合。实验分为对照组、附属性腺全去组、腹侧前列腺组、去除腹侧前列腺组。结果:前列腺抗原成分的免疫反应局限在精子体中部表面,而精子头、颈部未见阳性反应。在体外(80±5)%附睾精子与前列腺分泌蛋白结合,在体内与对照组雄鼠交配后收集的子宫腔内精子与前列腺分泌蛋白结合精子阳性率为(30.0±4.6)%,与去除腹侧前列腺组(3.6±1.4)%比较差异有显著性(P<0.01),在体内与对照组雄鼠交配后收集的输卵管腔内精子与前列腺分泌蛋白结合精子阳性率为(16.0±3.6)%,与去除腹侧前列腺组精子(3.2±1.4)%比较差异有显著性(P<0.01)。前列腺分泌蛋白的电泳印记膜与生物素标记附睾精子膜蛋白孵育后显色分析结果可见5条阳性反应带。结论:金黄地鼠的前列腺分泌蛋白可结合于精子体中部表面,前列腺分泌蛋白中至少有5个组分可与精子膜蛋白结合。     

金黄地鼠腹侧前列腺在体修饰精子膜蛋白作用研究

【目的】在整体水平探讨前列腺分泌蛋白对金黄地鼠精子膜蛋白的影响。【方法】雄性鼠手术分为4组，分别为附属性腺全去组，腹前列腺摘除组，去除其他附属性腺仅保留腹前列腺组和假手术组，每组动物6只。收集与保留前列腺及去除组的雄性鼠交配后的子宫腔精子，抽提精子膜蛋白，膜蛋白经聚丙烯酰胺凝胶（SDS-PAGE）和二维电泳凝胶分析，比较前列腺存在与否精子膜蛋白组分的异同。【结果】与不同组雄鼠交配后收集的子宫腔精子膜蛋白SDS-PAGE电泳谱主要条带类似，含腹前列腺组的精子膜组分中相对分子质量15k、29k、38k、55k和91k多肽的量较去除腹前列腺组的子宫腔精子膜相应组分增加。二维电泳结果示与含腹前列腺组雄鼠交配后收集的子宫腔精子膜蛋白较无腹前列腺组的精子膜蛋白多出10个蛋白斑点（MM／IP分别为16k／8．60、16．5k／9．2、28k／5．88／6．10、29k／5．98、32k／6．35／6．50／7．20、61k／5．90、83k／6．40），另外蛋白斑点量增加有11个．【结论]腹前列腺可修饰和调节精子膜蛋白．进而这些蛋白可能对雄性生殖力及胚胎的发育起作用。     

金黄地鼠腹侧前列腺在体修饰精子膜蛋白作用研究

 【目的】 在整体水平探讨前列腺分泌蛋白对金黄地鼠精子膜蛋白的影响?【方法】 雄性鼠手术分为4组,分别为附属性腺全去组,腹前列腺摘除组,去除其他附属性腺仅保留腹前列腺组和假手术组,每组动物6只?收集与保留前列腺及去除组的雄性鼠交配后的子宫腔精子, 抽提精子膜蛋白, 膜蛋白经聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)和二维电泳凝胶分析,比较前列腺存在与否精子膜蛋白组分的异同?【结果】 与不同组雄鼠交配后收集的子宫腔精子膜蛋白SDS-PAGE电泳谱主要条带类似,含腹前列腺组的精子膜组分中相对分子质量15 k?29 k?38 k?55 k和91 k多肽的量较去除腹前列腺组的子宫腔精子膜相应组分增加?二维电泳结果示与含腹前列腺组雄鼠交配后收集的子宫腔精子膜蛋白较无腹前列腺组的精子膜蛋白多出10个蛋白斑点(MM/IP 分别为16k/8.60?16.5k/9.2?28k/5.88/6.10?29k/5.98?32k/6.35/6.50/7.20?61k/5.90?83k/6.40),另外蛋白斑点量增加有11个?【结论】 腹前列腺可修饰和调节精子膜蛋白,进而这些蛋白可能对雄性生殖力及胚胎的发育起作用?