酪氨酸激酶Syk在肝癌中的表达及与血管生成的关系

目的探讨酪氨酸激酶Syk在肝细胞性肝癌中的表达及对肿瘤微血管生成的影响。方法采用RT-PCR检测Syk mRNA在肝细胞性肝癌及癌旁正常组织中的表达，免疫组化SABC法检测标本中CD34的表达反映肿瘤的微血管密度（MVD）。结果24例癌旁正常组织中Syk mRNA均表达阳性，32例肝细胞性肝癌中Syk mRNA表达率为46.9％（15／32），其中低分化组阳性表达率23．1％（3／13），明显低于高分化组阳性表达率63．2％（12／19）（P〈0．05）。肿瘤微血管密度（MVD）检测：低分化组（Ⅲ级Ⅳ级为49．2±3.6，54±4.3），明显高于高分化组（Ⅰ级Ⅱ级为13．6±4．5，32.3±3．2）与正常组织（5．9±1．7），有显著统计学意义（P〈0．05）。Syk mRNA的表达与CD34的表达明显负相关（r=-0.97）。结论肝细胞性肝癌中Syk基因的缺失对癌组织血管的生成起重要的作用。     

肝细胞在多孔状乳酸/乙醇酸共聚材料的培养

肝细胞的体外培养 ,在肝病研究中发挥着日益重要的作用。尤其在生物人工肝支持系统 (BLSS)和肝细胞移植中 ,肝细胞的数量和质量至关重要。虽然肝细胞在体内具有巨大的增殖潜能 ,但肝细胞在体外增殖能力差 ,并很快失去其生化功能 ,故在一定程度上限制了肝细胞培养的广泛开展[1 3 ] 。我们与中山大学合作采用高压气体发泡技术制备而成一种新型的多孔状乳酸 /乙醇酸共聚材料 (PLGA) ,观察乳鼠肝细胞在该材料的培养情况。一、动物及试剂1.动物 :1～ 3d龄SD乳鼠 (6～ 7g/只 ) ,2 0只 ,雌雄不限 ,由华中科技大学同济医学院实验动物中心提供。2…     

胃十二指肠溃疡出血胃切除术后大出血的外科治疗

目的 总结胃十二指肠溃疡出血行胃大部切除术后大出血再手术治疗的经验。方法 对我院1980年至2002年间收治的26例胃切除术后大出血再手术患者的临床资料进行回顾分析。结果 本组有6例术前行急诊胃镜检查，11例行术中胃镜检查，2例采用超选择性动脉造影。11例球部旷置溃疡出血或球后溃疡出血者，采取旷置溃疡切除或十二指肠球部及降部纵行切开、直视下缝合出血点，同时阻断十二指肠周围血管手术；13例吻合口出血者，局部缝扎止血、切除原吻合口，再作毕Ⅱ式重建或行空肠胃Roux-en-Y吻合；还有2例行再次胃切除手术。治愈24例(92．3％)；死亡2例(7．7%)，均为术后再出血者。结论 术前采用超选择性血管造影及术中胃镜检查，有利于明确出血部位及原因；选择恰当的手术方式对防止术后再出血非常重要。     

肝门部胆管癌的治疗进展

肝门部胆管癌的治疗进展同济医科大学附属协和医院普外科（４３００２２）丁显仲，郑启昌综述熊叔陶，张寿熙校肝门部胆管癌是指发生在肝总管上段和左右主肝管及其汇合部的恶性肿瘤，又称近端胆管癌（ＰＢ－ＤＴ）。本文就近年来肝门部胆管癌的治疗进展作如下综述。１．肿...     

mRNA差异显示法筛选和克隆胃癌相关基因

目的 :筛选和克隆胃印戒细胞癌与正常胃黏膜细胞差异表达基因片段。方法 :采用mRNA差异显示法 (mRNAdifferentialdisplayPCR ,DD PCR) ,对比胃印戒细胞癌组织与正常胃黏膜组织mRNA的表达差异 ,克隆胃印戒细胞癌差异片段 ,经过RNA的斑点杂交、测序以及序列分析和同源性比较。结果 :胃印戒细胞癌与正常胃黏膜中存在明显的基因表达差异 ,发现与胃癌相关的差异表达条带 16条 ,其中 7条为缺失表达条带 ,9条为过度表达条带。对其中 4条差异表达条带进行克隆、测序 ,经序列分析及同源性比较和RNA的斑点杂交 ,表明确认其中 1条为GenBank/BLAST中尚未收录的片段。结论 :胃印戒细胞癌的mRNA差异显示证明 ,该EST序列可能在胃癌的发生发展中具有一定作用     

肝组织多药耐药基因高表达与结肠癌肝转移的相关性研究

目的　探索早期检测肝组织多药性耐药基因对结肠癌肝转移的预测价值。方法　取裸鼠 4 0只 ,用人结肠癌SW4 80细胞系制作裸鼠原位结肠癌肝转移模型。模型建立的第 10天肝活检取左右肝叶各2mm3 组织 ,用实时荧光定量PCR方法检测多药耐药基因 (multidrugresistancegene,mdr- 1mRNA)的表达 ;模型建立的第 5周观察裸鼠肝脏是否形成肉眼转移灶。结果　经实时荧光定量RT -PCR检测肝活检组织mdr- 1基因 ,在存活的 36只裸鼠中 2 2例高表达 ,平均CT值 (Cyclethreshold ,即反应管内的荧光信号到达设定的域值时所经历的循环数 )为 2 5 90 1,平均拷贝数为 4 2 7× 10 7/ugRNA ,并高表达的 2 2只裸鼠均有肉眼肝转移灶形成 (10 0 % ) ;mdr - 1基因低表达 (平均CT值 33 36 8,平均拷贝数 2 11× 10 5)及无表达的 14只裸鼠中 ,仅 1例形成肉眼肝转移灶 (7 1% ) ,其余 13例均无肉眼肝转移灶形成 (P <0 0 1)。结论　结肠癌肝活检肿瘤细胞mdr- 1mRNA基因高表达与异时的肝转移灶形成有明显的相关性 ,提示检测结肠癌肝组织多药性耐药基因的高表达可以预测异时的肝转移灶形成。     

瘤内注射pSTbAT-脂质体复合物对裸鼠移植瘤抑制效应的实验研究

目的:构建血管生成抑制因子arresten基 因的真核表达载体,并观察瘤内注射质粒DNA 脂质 体复合物对裸鼠移植瘤生长的影响。方法:利用 PCR方法,由重组质粒pGEM Arr中扩增出基因;将 该基因定向克隆于真核表达载体中。20只裸鼠皮 下注射HepG 2细胞,成瘤后以成功构建的质粒 DNA 脂质体复合物瘤内注射,治疗后采用免疫组化 方法检测肿瘤血管密度,并利用arresten基因瘤内注 射的方法对抑制肿瘤的效果进行分析。结果:我们 成功构建arresten基因真核表达载体(pSTbAT)。实 验组肿瘤生长速度较对照组慢(实验组平均15.3个 阳性血管/10个视野,对照组平均112.5个阳性血 管/10个视野)。结论:瘤内注射arresten基因质粒 DNA复合物能抑制裸鼠移植瘤的血管生成,并能抑 制移植瘤的生长。     

The Origin of Neointimal Smooth Muscle Cells in Transplant Arteriosclerosis from Recipient Bone-marrow Cells in Rat Aortic Allograft

In order to investigate the origin of neointimal smooth muscle cells in transplant arterio- sclerosis in rat aortic allograft, sex-mismatched bone marrow transplantation was performed from male Wistar rats to female Wistar rats. Four weeks after transplantation, the aortic transplant model was established by means of micro-surgery in rats. The recipients were divided into 4 groups: female Wistar-female Wistar aortic isografts, female SD-female Wistar aortic allografts, male SD-male Wis- tar aortic allografts, female SD-chimera Wistar aortic allografts. Eight weeks after transplantation, aortic grafts were removed at autopsy and processed for histological evaluation and immunohisto- chemistry. The results indicated that excessive accumulation of α-SMA-positive smooth muscle cells resulted in significant neointima formation and vascular lumen stricture in rat aortic allografts. Neointima assay revealed that the neointimal area and NIA/MA ratio of transplanted artery were sig- nificantly increased in all of aortic allograft groups as compared with those in aortic isograft group (P<0.01). Neointimal smooth muscle cells were harvested from cryostat sections of aortic allograft by microdissection method. The Sry gene-specific PCR was performed, and the result showed that a dis- tinct DNA band of 225 bp emerged in the male-male aortic allograft group and chimera aortic al- lograft group respectively, but not in the female-female aortic allograft group. It was suggested that recipient bone-marrow cells, as the origin of neointimal smooth muscle cells, contributed to the pathological neointimal hyperplasia of aortic allograft and transplant arteriosclerosis.     

人IκBα真核表达载体的构建及其在大鼠肝移植缺血-再灌注损伤中的作用

目的:构建人IκBα真核表达质粒,探讨对大鼠肝移植缺血-再灌注损伤的保护作用。方法:应用RT-PCR和重叠延伸PCR技术,得到点突变的人IκBα,定向克隆至PcDNA3.0真核表达载体。将SD大鼠原位肝移植模型分为三组:Ⅰ组为空白对照组,Ⅱ组为PcDNA3.0空载体转染组,Ⅲ组为PcDNA3.0-IκBα转染组。分别于术后2、12、24和72 h取材。用RT-PCR测定肝组织中核转录因子(NF-κB)p65、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)mRNA的表达及肝功能变化。结果:经酶切和DNA序列测定鉴定,证实重组质粒构建正确;Ⅲ组与Ⅰ组、Ⅱ组相比:NF-κBp65、TNFα、ICAM-1 mRNA的表达水平及肝酶学指标均明显降低(P<0.05)。结论:真核表达质粒PcDNA3.0-IκBα构建成功,IκBα通过抑制NF-κBp65 mRNA的表达及其核移位减轻大鼠肝移植缺血-再灌注损伤。     

联合脏器切除治疗进展期胃癌的临床分析

目的探讨联合脏器切除治疗进展期胃癌的地位，总结分析手术经验。方法对1994年1月-2005年12月十二年间该院施行联合脏器切除的47例进展期胃癌的临床资料进行回顾性分析。结果联合脾脏切除14例，联合脾、胰体尾切除19例，联合部分横结肠切除5例，联合胰十二指肠切除2例，联合肝左外叶不规则切除3例，联合双侧卵巢切除2例，联合胆囊切除1例，联合脾、胰体尾加部分横结肠切除1例。围手术期死亡1例，占2．1％，随访42例，1、3、5年生存率分别为72．1％、34．9％和11．6％，中位生存时间为25．28个月。而同期随访的该院52例仅行姑息性手术（包括未联合其他脏器切除的姑息性胃切除术、胃空肠吻合术、空场造瘘术等）或剖腹探查术的进展期胃癌患者的1、3、5年生存率分别为44．2％、11．5％和0．0％（均P〈0．01）。中住生存时间为7．37个月。而与同期该院316例行标准胃癌根治术的患者相比术后并发症显著增多（P〈0．05），住院天数相应较长。结论通过严格选择适应证，充分术前准备，加上良好的手术技巧和有效的术后处理，联合脏器切除可以挽救或明显延长一部分进展期胃癌患者的生命。