血管内皮抑素微泡联合聚焦超声抗结肠癌肿瘤血管生成的实验研究

目的评估靶向载血管内皮抑素微泡联合改良聚焦超声定向辐照抑制结肠皮下易位原位结肠癌肿瘤血管生成的治疗效果。方法将65只结肠皮下易位原位结肠癌肿瘤的Balb／c裸鼠模型随机分为5组,每组13只：A组为空白对照组,裸鼠肿瘤未行任何治疗组;B组为单纯超声辐照组,仅行超声辐照,未使用任何造影剂;C组为超声辐照联合SonoVue裸微泡治疗组;D组为超声辐照联合Targestar．SA裸微泡治疗组;E组为超声辐照联合包载血管内皮抑素的微泡治疗组。分别于辐照前、辐照后1、14和28d测量肿瘤体积,绘制肿瘤体积生长曲线。实时超声造影检查,脱机分析峰值强度（PI）、局部血容量（RBV）和局部血流量（RBF）等造影参数。实验结束后切除肿瘤组织行光镜及电镜病理学检查,并通过CD34免疫组织化学检测评估肿瘤坏死面积（NA）和微血管密度（MVD）。结果辐照前各组肿瘤体积的差异无统计学意义（P〉O．05）;辐照后28d,C组、D组和E组肿瘤体积明显小于A组和B组,且E组明显小于c组和D组（均P〈0．01）。辐照前各组PI、RBV和RBF的差异均无统计学意义（均P〉0．05）;辐照后28d,C组、D组和E组PI、RBF和RBV较辐照前明显降低且明显低于A组和B组（均P〈0．05）,E组明显低于C组和D组（均P〈0．05）。电镜观察显示,C、D、E组肿瘤细胞核膜消失,核染色质溶聚,呈簇状不规则排列,线粒体空泡化和微血管内皮损伤出血,以E组最为明显,而A和B组鲜见。免疫组织化学染色显示,治疗后28d,E组肿瘤组织NA明显高于其他各组,而MVD则明显低于其他各组（均P〈0．01）。结论靶向载血管内皮抑素微泡联合改良聚焦超声定向辐照可以破坏结肠皮下易位原位结肠癌肿瘤微血管,并抑制肿瘤新生血管生成,增强结肠癌的治疗效果．将来可能是具有临床应用前景的结肠癌治疗新方法。     

低位直肠癌外科治疗进展

目前,我国结直肠癌的发病率为(3.1～10.7)/10万,其中直肠癌占56%～70%,而低位直肠癌的比例高达70%～80%[1],由于我国直肠癌的主要特点是低位直肠癌多,肿瘤位于距肛缘5 cm以下,这给结直肠外科医生带来许多挑战.近20年,随着人们对直肠癌生物学特性的深入研究,先进医学仪器的应用及患者对术后生活质量要求的提高,使直肠癌外科治疗模式发生了根本性的变化,手术方式已发生了变革,从传统的单纯追求根治术挽救生命的观点转变为在根治性切除肿瘤的同时,力求保留肛门功能以提高术后生活质量.本文就低位直肠癌外科治疗相关进展进行综述.     

粪便多基因联合检测在结直肠癌早期筛查中的应用

目的 研究联合检测粪便中sFRP2、Vimentin和HPP1基因甲基化状态在结直肠癌早期筛查中的应用。 方法 将杭州市第三人民医院2017年10月—2019年10月期间收治的结直肠癌患者60例为结直肠癌组,由腺瘤性息肉患者60例及正常健康人30例组成非结直肠癌组(90例),收集清晨粪便标本,提取粪便DNA,并进行亚硫酸氢盐修饰处理,采用甲基化特异性PCR检测sFRP2、Vimentin和HPP1基因甲基化状态,分析其与结直肠癌临床病理特征的关系,比较3个基因联合检测诊断敏感度及特异度。 结果 在结直肠癌患者中,检测sFRP2、Vimentin和HPP1单基因甲基化敏感度分别为46.7%、43.3%、53.3%,特异度分别为73.3%、75.6%、76.7%;联合组以3个基因中任1个基因甲基化表达阳性判为阳性,联合检测诊断结直肠癌的敏感度为83.3%,特异度为46.7%,敏感度均高于sFRP2、Vimentin和HPP1单基因甲基化检测。3个基因甲基化状态与结直肠癌患者的性别、年龄、肿瘤部位、淋巴结转移及TNM分期均无关(均P>0.05)。 结论 在结直肠癌患者粪便DNA中sFRP2、Vimentin和HPP1基因异常甲基化发生率明显高于非结直肠癌患者,联合检测粪便多基因筛查结直肠癌优于单基因检测,在结直肠癌早期筛查应用中具有重要意义。      

多基因联合提高结直肠癌甲基化检测阳性率的研究

目的探讨联合检测Vimentin、sFRP1和HPP1基因甲基化对提高结直肠癌甲基化阳性率的意义。方法收集90例结直肠癌（结直肠癌组）和60例腺瘤性息肉（腺瘤组）患者及20例结直肠正常组织（正常对照组）标本,提取组织标本的DNA,采用甲基化特异性PCR（MSP）检测Vimentin、sFRP1和HPP1基因甲基化状态。分析其与结直肠癌的关系及甲基化阳性率。结果结直肠癌组Vimentin、sFRP1和HPP1基因甲基化率分别为66．7％（60／90）、68．9％（62／90）和72．2％（65／90）;腺瘤组则分别为53.3％（32／60）、55．0％（33／60）和50．0％（30／60）;正常对照组分别为0、0和5．0％（1／20）。结直肠癌组3个基因甲基化阳性率均高于腺瘤组和正常对照组（P〈O．05）。3个基因甲基化联合检测诊断结直肠癌和腺瘤的阳性率分别为93．3％（84／90）和76．7％（46／60）,高于单个基因检测的甲基化阳性率（P〈0．05）。3个基因甲基化状态与本组结直肠癌患者的性别、年龄、肿瘤部位、淋巴结转移、远处转移及TNM分期无关（P〉0．05）。结论Vimentin、sFRP1和HPP1基因启动子甲基化水平在结直肠癌组织中升高．其联合检测明显提高了结直肠癌甲基化检测阳性率．有可能成为结直肠癌早期诊断的甲基化检测方案。     

结肠镜辅助经肛手套平台微创手术治疗直肠早期肿瘤的疗效分析

目的探讨结肠镜辅助经肛手套平台微创手术治疗直肠早期肿瘤的疗效。方法选择行结肠镜检查时发现的17例直肠早期肿瘤患者,均采用结肠镜辅助经肛手套平台微创手术治疗,观察患者的手术时间、住院时间、手术效果、术后并发症、肿瘤病理结构以及随访情况等。结果全部患者顺利完成肿瘤切除手术,术中未发生大出血、肠穿孔中转开腹等情况。手术时间30~140（45.0±12.6）min。术后患者恢复均较好,3例患者出现少量便血,自行好转;2例患者术后第2天低热,给予对症处理后好转;均无肛门疼痛等其他术后并发症。肿瘤到肛缘的距离为5~20（6.5±2.2）cm。术后检查肿瘤直径1.2~3.5（2.6±0.89）cm;病理结果提示绒毛状腺瘤7例、管状腺瘤5瘤、管状绒毛状腺瘤3例、锯齿状腺瘤2例;其中4例伴低级别上皮内瘤变,2例伴高级别上皮内瘤变;送检标本的边缘及基底部肿瘤组织均为阴性。平均住院时间为4~8（5.0±1.9）d。术后随访10~32个月,均无局部复发,且未发现远期并发症。结论结肠镜辅助经肛手套平台微创手术可以用于直肠早期肿瘤的治疗,这拓展了结肠镜的临床用途。     

结直肠癌患者血清中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白检测的临床意义

目的探讨结直肠肿瘤患者血清中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白（NGAL）检测的临床意义。方法收集杭州市第三人民医院2007年12月至2012年12月间100例结直肠癌、125例结直肠腺瘤和133例健康志愿者的血清标本,通过双抗体夹心酶联免疫吸附试验检测血清NGAL水平。分析血清NGAL水平与结直肠癌临床病理特征的关系;通过受试者工作特征曲线分析确定血清NGAL诊断结直肠癌的最佳截点值,并与血清CEA和CA19—9的诊断价值进行比较。通过单因素和多因素预后分析,明确血清NGAL水平与结直肠癌患者预后的关系。结果结直肠癌患者血清NGAL水平中位数为67．96μg／L,明显高于结直肠腺瘤患者（32．09μg／L）和健康对照者（23．33μg／L）（均P〈0．01）。血清NGAL水平与结直肠癌分化程度、TNM分期、淋巴结转移及脉管侵犯有关（均P〈0．05）。取49．78μg／L作为血清NGAL诊断结直肠癌的最佳截点值,其灵敏度为81％,特异度为88％。对于Ⅰ期和Ⅱ期结肠癌患者,血清NGAL的灵敏度（78．9％和88．0％）高于CA19．9（31．6％和48．0％）和CEA（36．8％和52．0％）,差异均有统计学意义（均P〈0．05）。NGAL阳性和阴性患者术后生存期中位数分别为13月和42月,差异有统计学意义（P〈0．05）。多因素预后分析证实,血清NGAL可作为结直肠癌患者的独立预后因素（HR=2．060,95％CI：1．023～4．150,P=0．043）。结论血清NGAL可作为结直肠癌的早期诊断标记物,同时可作为恶性生物表型标记用于结直肠癌的危险度评估,筛选高危患者,其表达上调提示不良预后。     

低位直肠癌外科治疗进展

目前,我国结直肠癌的发病率为（3.1～10.7）/10万,其中直肠癌占56%～70%,而低位直肠癌的比例高达70%～80%[1],由于我国直肠癌的主要特点是低位直肠癌多,肿瘤位于距肛缘5 cm以下,这给结直肠外科医生带来许多挑战.近20年,随着人们对直肠癌生物学特性的深入研究,先进医学仪器的应用及患者对术后生活质量要求的提高,使直肠癌外科治疗模式发生了根本性的变化,手术方式已发生了变革,从传统的单纯追求根治术挽救生命的观点转变为在根治性切除肿瘤的同时,力求保留肛门功能以提高术后生活质量.本文就低位直肠癌外科治疗相关进展进行综述.     

改良纵切横缝术治疗PPH后吻合口重度狭窄的临床疗效分析

目的开展并探讨改良纵切横缝术治疗吻合器痔上黏膜环形切除钉合术（PPH）后吻合口重度狭窄的临床疗效。方法回顾性分析2008年6月至2019年6月杭州市第三人民医院肛肠科收治的PPH后吻合口重度狭窄患者114例，其中采用改良纵切横缝术的38例患者为治疗组，采用扩肛术的38例患者为对照1组，采用纵切横缝术的38例患者为对照2组，比较3组患者术后1周及术后3个月的总有效率；术后2周生活质量评分、直肠静息压；术后第1、7、14天肛门疼痛[采用视觉模拟评分法（VAS）评估]；术后2周出现水肿、感染、出血等情况。结果术后1周，治疗组总有效率高于对照1组（P＜0.01）；术后3个月，治疗组总有效率均高于对照1组、对照2组（均P＜0.01）。术后2周治疗组生活质量评分均高于对照1组、对照2组（均P＜0.05）。术后2周治疗组直肠静息压均低于对照1组、对照2组（均P＜0.05）。治疗组术后第1、7、14天肛门疼痛VAS评分均低于对照1组、对照2组（均P＜0.05）；术后2周治疗组肛门水肿、感染及出血发生率均低于对照1组、对照2组（均P＜0.05）。结论改良纵切横缝术对PPH后吻合口重度狭窄治疗有较好的疗效。     

结直肠癌Toll样受体4单核苷酸多态性的研究

目的通过分析结直肠癌患者Toll样受体4（TLR4）基因编码区Asp299Gly和Thr399Ile两个位点突变发生情况．探讨TLR4基因单核苷酸多态性在大肠肿瘤发病中的作用。方法选取手术并经病理确诊的102例结直肠癌患者为病例组．以同期行肠镜检查的患者87例为对照组。采用位点特异性引物PCR和测序的方法检测TLR4基因SNP发生情况．比较两组的差异以及TLR4基因突变和肿瘤患者年龄、性别及肿瘤分化程度与病理分期的关系。结果结直肠癌患者TLR4基因编码区Thr399lle突变的发生率明显高于对照组（HR=4．112,P=0．027）,而Asp299Gly突变在病例组和对照组差异无统计学意义（P〉0．05）：Thr399lle突变与肿瘤的分化程度有关（P=0．003）。结论结直肠癌患者TLR4Thr399lle突变的发生率明显增高．其可能与结直肠癌的发病有一定关系。     

结肠镜单人操作法的学习曲线

目的探讨结肠镜单人操作法的学习曲线。方法600例受检者按检查先后顺序分为6组,每组100例;按第一（第1组）、二（第2~3组）、三（第4~6组）阶段进行普通结肠镜检查。按成功率稳定在80%为标准评价操作者是否掌握结肠镜单人操作法并划分学习曲线期、平台期;观察操作时间、进镜长度、腹部按压或体位变换比例及受检者疼痛评分的差异。结果第1~6组结肠镜检查成功率分别为22.0%、53.0%、78.0%、79.0%、78.0%、86.0%,操作时间分别为（25.0±6.7）、（17.4±5.6）、（17.2±4.6）、（12.3±4.3）、（12.2±4.0）、（10.5±2.9）min,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。结肠镜检查成功的396例受检者中,学习曲线期153例,平台期243例;与平台期组比较,学习曲线期组进镜长度、操作时间均明显较长（均P＜0.05）,受检者疼痛视觉评分（VAS）明显较高（P＜0.05）,腹部按压或体位变换比例更高（P＜0.05）。结论结肠镜单人操作300例左右可达到相对熟练阶段。