转TNF—a基因肿瘤浸润淋巴细胞的构建及其生物学特性的研究

目的用肿瘤坏死因子(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)基因转染人肝癌肿瘤浸润淋巴细胞(Tumor infiltrating lymphocyte,TIL),构建转基因TIL,对其生物学特性进行研究,为肝癌基因治疗奠定基础.方法用逆转录病毒载体将TNF-α基因导入人肝癌肿瘤浸润淋巴细胞,构建一种新型的抗肿瘤效应细胞-转基因TIL.对转基因TIL的增殖能力和细胞表型进行检测,用RT-PCR检测目的基因的表达,TNF-α试剂盒检测TNF-α分泌量,用MTT法检测转基因TIL体外抗肿瘤活性.结果转基因TIL的增殖活性及细胞表型与IL-2活化的TIL相似,转基因TIL 可持续表达TNF-α,其分泌量每24 h达370 pg/5×105 cells.转基因TIL对肝癌细胞株BEL7404 具有较高的杀伤活性.结论转基因TIL维持较高的稳定性,可持续表达TNF-α,具有良好的体外抗肿瘤作用,对肝癌治疗具有良好的应用前景.     

转基因细胞毒性T淋巴细胞的生物学特性及其对荷瘤裸鼠的抗肿瘤作用

背景：肿瘤患者体内的抗肿瘤免疫受到抑制。增强细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphOCyte，CTL)的活性是提高过继免疫治疗效果，促进肿瘤康复的有效途径之一。目的：对转导肿瘤坏死因子(TNF-α)基因的CTL的生物学特性及抗肿瘤活性进行研究，探讨细胞因子基因疗法和过继免疫治疗肿瘤的新途径。设计：随机区组实验研究。地点和对象：实验在广西医科大学医学实验中心完成。从人肝细胞癌组织中分离淋巴细胞，用BEL7404和IFN-r诱导得到CTL。BALB／c裸小鼠28只。雄性，4∽6周龄，体质量18～20g，购自北京医科大学实验动物科学部(SPF级，合格证书：医动字第01-3048号) 干预：用重组反转录病毒载体介导对CTL进行TNF-a基因转导。于每只裸鼠右前肢腋窝皮下注射注射BEL7404建立荷瘤裸鼠模型，28只裸鼠按体质量分为4组，每组7只。观察转基因CTL对肿瘤原位(右前肢腋窝)及异位(左前肢腋窝皮下)注射治疗效果，分别用生理盐水注射治疗作对照。主要观察指标：①检测TNF-a基因转导前后CTL的生长形态，增殖能力。TNF-a分泌量、细胞表型。②体外不同作用时间和效靶比浓度对BEk7404的杀伤效应。③各实验组的肿瘤生成时间，生长速度及肿瘤生成率。结果：转基因CTL的生长形态、增殖活性及细胞表型与CTL相似，但具有持续、高效表达TNF-a的能力，72h表达量达410ng／L。转基因CTL对BEL7404具有较高的体外杀伤作用，其杀伤活性与作用时间及效靶细胞比正向相关。当效靶比达20：1时，杀伤活性接近100％。效靶比浓度为5：1和20：1时转基因CTL的杀伤活性高于CIL(q=7．9658，4．1897．P<0．05)。转基因CTL对荷瘤裸鼠肿瘤生长部位进行过继免疫后，移植瘤的生成延迟、生长减慢，成瘤率降低，与异位注射及生理盐水对照组相比差异有显著意义(P<0．05)。结论：转基因CTL可持续表达的TNF-a，具有良好的抗肿瘤活性。转基因CTL构建为肿瘤过继免疫治疗提供新型的效应细胞，对防治肿瘤转移和复发，促进肿瘤康复具有积极的意义。     

转基因细胞毒性T淋巴细胞的生物学特性及其对荷瘤裸鼠的抗肿瘤作用

背景肿瘤患者体内的抗肿瘤免疫受到抑制.增强细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic Tlymphocyte,CTL)的活性是提高过继免疫治疗效果,促进肿瘤康复的有效途径之一.目的对转导肿瘤坏死因子(TNF-α)基因的CTL的生物学特性及抗肿瘤活性进行研究,探讨细胞因子基因疗法和过继免疫治疗肿瘤的新途径.设计随机区组实验研究.地点和对象实验在广西医科大学医学实验中心完成.从人肝细胞癌组织中分离淋巴细胞,用BEL7407和IFN-r诱导得到CTL.BALB/c裸小鼠28只,雄性,4～6周龄,体质量18～20 g,购自北京医科大学实验动物科学部(SPF级,合格证书医动字第01-3048号)干预用重组反转录病毒载体介导对CTL进行TNF-α基因转导.于每只裸鼠右前肢腋窝皮下注射注射BEL7404,建立荷瘤裸鼠模型,28只裸鼠按体质量分为4组,每组7只.观察转基因CTL对肿瘤原位(右前肢腋窝)及异位(左前肢腋窝皮下)注射治疗效果,分别用生理盐水注射治疗作对照. 主要观察指标①检测TNF-α基因转导前后CTL的生长形态,增殖能力,TNF-α分泌量、细胞表型.②体外不同作用时间和效靶比浓度对BEL7404的杀伤效应.③各实验组的肿瘤生成时间,生长速度及肿瘤生成率.结果转基因CTL的生长形态、增殖活性及细胞表型与CTL相似,但具有持续、高效表达TNF-α的能力,72 h表达量达410 ng/L.转基因CTL对BEL7404具有较高的体外杀伤作用,其杀伤活性与作用时间及效靶细胞比正向相关.当效靶比达201时,杀伤活性接近100%.效靶比浓度为51和201时转基因CTL的杀伤活性高于CIL(q=7.965 8,4.189 7,P＜0.05).转基因CTL对荷瘤裸鼠肿瘤生长部位进行过继免疫后,移植瘤的生成延迟、生长减慢,成瘤率降低,与异位注射及生理盐水对照组相比差异有显著意义(P＜0.05).结论转基因CTL可持续表达的TNF-α,具有良好的抗肿瘤活性.转基因CTL构建为肿瘤过继免疫治疗提供新型的效应细胞,对防治肿瘤转移和复发,促进肿瘤康复具有积极的意义.     

转TNF-α基因肿瘤浸润淋巴细胞的构建及其生物学特性的研究

目的:用肿瘤坏死因子(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)基因转染人肝癌肿瘤浸润淋巴细胞(Tumor infiltrating lymphocyte,TIL),构建转基因TIL,对其生物学特性进行研究,为肝癌基因治疗奠定基础.方法:用逆转录病毒载体将TNF-α基因导入人肝癌肿瘤浸润淋巴细胞,构建一种新型的抗肿瘤效应细胞-转基因TIL.对转基因TIL的增殖能力和细胞表型进行检测,用RT-PCR检测目的基因的表达,TNF-α试剂盒检测TNF-α分泌量,用MTT法检测转基因TIL体外抗肿瘤活性.结果:转基因TIL的增殖活性及细胞表型与IL-2活化的TIL相似,转基因TIL 可持续表达TNF-α,其分泌量每24 h达370 pg/5×105 cells.转基因TIL对肝癌细胞株BEL7404 具有较高的杀伤活性.结论:转基因TIL维持较高的稳定性,可持续表达TNF-α,具有良好的体外抗肿瘤作用,对肝癌治疗具有良好的应用前景.     

尼卡地平复合艾司洛尔对高血压患者气管拔管反应的影响

目的研究尼卡地平和艾司洛尔联合用药预防高血压患者气管拔管反应的效果。方法选择40例择期腹腔镜胆囊切除术合并高血压病史的患者,术毕具备拔管条件时随机分为对照组(A组)和观察组(B组),每组20例,拔管前A组静注等量生理盐水,B组静注尼卡地平0.02mg/kg和艾司洛尔0.1mg/kg,比较两组患者麻醉诱导前(T0)、用药后5min(T1)、拔管即刻(T2),拔管后5min(T3)和10min(T4)的收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、心率(HR)变化。结果 T1与T0比较A组监测指标无明显变化,B组呈下降趋势,两组HR值差异有统计学意义(P<0.05);T2时段两组HR、SBP、DBP均上升,A组较B组升高幅度更大,监测值差异有统计学意义(P<0.05);T3、T4时段两组监测值均逐渐下降,SBP、DBP两组差异有统计学意义(P<0.05)。结论拔管前静注尼卡地平和艾司洛尔可有效抑制高血压患者拔管时不良心血管反应的发生。     

舒芬太尼与瑞芬太尼静脉麻醉用于小儿扁桃体摘除术的临床观察

目的 观察舒芬太尼与瑞芬太尼全凭静脉麻醉在小儿扁桃体摘除术中及术后镇痛镇静作用,比较两种药物对麻醉苏醒期质量的影响.方法 选择择期进行扁桃体摘除术小儿患者34例,随机分为舒芬太尼组(SF组)和瑞芬太尼组(RF组).SF组以舒芬太尼0.3μg/kg快速诱导,RF组以瑞芬太尼1.5μg/kg快速诱导,两组均以瑞芬太尼0.15μg·kg-1 ·min-1术中维持,手术结束停药.分别观察两组术中术后血流动力学指标及术后患儿镇痛镇静程度.结果 两组在术中血流动力学指标无明显差异(P>0.05).SF组镇静评分高于RF组,躁动评分低于RF组(P<0.01).结论 舒芬太尼和瑞芬太尼静脉麻醉用于小儿扁桃体摘除术能有效地抑制小儿气管插管时的心血管反应,维持术中血流动力学稳定,舒芬太尼在麻醉术后提供充分镇痛镇静,降低术后躁动发生率,提高麻醉苏醒期质量和麻醉安全性.     

依托咪酯乳剂与丙泊酚在无痛整形隆鼻术中的效果比较

目的 探讨依托咪酯脂肪乳剂与丙泊酚在无痛整形隆鼻手术麻醉中应用的有效性和安全性.方法 选择ASA Ⅰ~Ⅱ级女性患者60例,随机分为丙泊酚组(P组)和依托咪酯脂肪乳剂组(E组),每组30例,比较两组入室给药前(T0)、手术开始即时(T1)、手术结束时(T2)的收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、心率(HR)、脉搏血氧饱和度(SpO2)和苏醒时间及麻醉不良反应.结果 与E组比较,P组在T1时SBP、DBP、SpO2下降明显(P＜0.05);与T0比较,两组在T1各监测指标均呈下降趋势(P＜0.05),除P组SpO2外,其余指标在正常范围;两组T2与T0比较差异无统计学意义(P＞0.05);苏醒时间E组(6.14±1.35 )min,P组(5.95±2.14)min,两组差异无统计学意义(P＞0.05).P组5例术前有注射痛,2例发生呼吸抑制;E组有4例出现短暂的肌肉阵挛.两组术后2 h调查,对手术过程满意.结论 依托咪酯脂肪乳剂或丙泊酚均可安全有效用于无痛整形隆鼻手术,与丙泊酚相比,依托咪酯脂肪乳剂对循环和呼吸影响较轻,不良反应少.     

三氧化二砷及6种抗癌药物对肝癌细胞株作用的对比研究

目的研究三氧化二砷(As2O3)对肝癌细胞的抑制作用.方法应用MTT法检测不同浓度的As2O3对人肝癌细胞株BEL-7404和SMMC-7721的抑制率,并与6种常用抗癌药新生霉素、阿霉素、丝裂霉素、5-氟脲嘧啶、顺铂及环磷酰胺的抑瘤率进行比较. 结果与6种抗癌药相比,As2O3抑瘤作用最强(P<0.01或P<0.05),但并非As2O3浓度越高对细胞株的抑制率就越高.在6个浓度梯度中,1.0 μg/ml以上的As2O3对BEL-7404的抑瘤作用间差异无显著性意义(P>0.05),对于SMMC-7721,各浓度的As2O3的抑瘤作用间差异也无显著性意义(P>0.05).结论 As2O3体外试验能有效抑制肝癌细胞株BEL-7404和SMMC-7721的生长; 如果应用As2O3治疗肝癌,应做不同浓度As2O3的药敏试验,以选择浓度最低而且有效的剂量,以减少As2O3的毒副作用.     

珍珠美容霜加氯霉素治疗痤疮200例

痤疮是一种多因素引起的毛囊皮脂腺慢性炎症性疾病。青春期及青春后期常见，发病率高，易反复发作且好发于面部，治疗不当易形成色素沉着甚至瘢痕，是影响人们生活质量的主要疾病之一。1997年12月至2002年12月我们用自配的珍珠美容霜加氯霉素治疗痤疮200例，取得良好的疗效，现将结果报告如下。     

精子发生相关新基因KLHL-10在无精子症及少弱精子症患者中突变筛查分析

目的:探讨精子发生相关新基因KLHL-10突变与无精子症及少、弱精子症之间的关系。方法:收集临床上不明原因的、非阻塞性无精子症及少、弱精子症患者(分别为11例、196例和118例)共325份外周血标本以及100份正常生育男性的外周血标本,抽提其DNA,采用PCR技术、变性高效液相色谱技术以及测序等手段对全部DNA样本进行KLHL-10基因的突变筛查。结果:在少精子症患者组及正常生育男性组中各发现1例及3例在1号外显子有C88→A的新的杂合突变,系同义突变;在少精子症患者组、弱精子症患者组及正常生育男性组中各检出3例、1例及4例在2号外显子有C424→A的新的杂合突变,也系同义突变;尚未发现有该基因的错义突变或微缺失。结论:KLHL-10基因错义突变或微缺失不是引起本组无精子症及少、弱精子症患者的主要致病原因,该基因在男性不育症的诊断价值有待进一步确定。