重型肝炎甲胎蛋白水平与预后的关系

重型肝炎预后是人们十分关注的问题，影响预后的因素很多，除了病原、病程、治疗经过等因素外，病人本身免疫力及肝脏再生能力是决定其预后的关键，本文探讨甲胎蛋白水平与预后的关系如下。     

Fas配体对HepG2细胞凋亡的影响

细胞凋亡 (apoptosis)与肿瘤的发生、增殖与转移有着较为密切的关系 ,而Fas Fas配体 (FasLigand ,FasL)被认为是传导细胞凋亡信号的“死亡信号传递分子”。其中FasL主要存在于免疫活性细胞 ,通过与靶细胞膜Fas结合 ,导致靶细胞凋亡。为研究FasL在肝癌细胞凋亡过程中的作用 ,我们首先采用ELISA法对慢性乙型肝炎、肝硬化与肝癌患者血清中Fas及可溶性FasL(sFasL)水平进行了初步检测 ,结果显示肝癌患者血清中sFas明显升高 ,而FasL的浓度又明显低于慢性肝炎及肝硬化者 ,提示在肝癌的发生中 ,FasL及Fas与肝癌细胞凋亡有重要关系。我们…     

tRNA~(val)-CTE复合核酶真核表达载体构建

目的构建tRNA^val—CTE复合核酶真核表达载体，为进一步研究打下基础。方法用RT—PCR法扩增CTE DNA；合成含tRNA^val启动子和HCV5-NCIK区195住的核酶以覆内切酶KpnⅠ和EcoRⅤ序列，通过退火连接到pPUR质粒的BamHⅠ和EcoRⅠ的酶切位点之间，构建质粒pPHCV—Rz；用KpnⅠ和EcoRⅤ双酶切后，将CTE cDNA定向插入表达载体pPHCV—Rz多克隆位点中，构建成重组表达质粒，并用酶切分析和序列测定进行了鉴定。结果酶切鉴定和测序证实tRNA^val启动子和HCV5-NCIK区195住的核酶基因以覆CTE cDNA被正确克隆入真核表达载体pPUK。结论tRNA^val-CTE复合核酶真核表达载体的成功构建，为开展利用tRNA^val-CTE复合核酶切割HCV RNA的研究奠定了基础。     

心型脂肪酸结合蛋白对脂多糖所致心肌细胞损伤的保护作用

目的：探讨心型脂肪酸结合蛋白(heart-fatt y acid binding protein,H-FABP)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS) 所致心肌细胞损伤的保护作用。方法：以原代培养的新生大鼠心肌细胞为模型,通过基因转染方式改变H-FABP表 达水平,采用Western印迹、定量PCR检测原代培养中H-FABP的表达。分别检测心肌细胞培养液中TNF-α,IL-1β,乳 酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)含量以及细胞存活率来反映LPS诱导的心肌细胞损伤与炎症反应。结果：LPS处 理24 h能增加H-FABP表达。SiRNA降低H-FABP后,显著促进LPS引起的心肌细胞存活率下降、LDH释放以及TNF-α和 IL-1β释放。相反,H-FABP过表达能显著抑制LPS引起的心肌细胞损伤与炎症反应。结论：H-FABP对LPS引起的心肌 细胞损伤具有保护作用。     

COVID-19患者早期咽拭子病毒载量与临床特征的关联分析

目的：探讨新型冠状病毒肺炎（coronavirus disease 2019,COVID-19）患者早期咽拭子病毒载量与临床症状及肺部影像学表现的关系。方法：回顾性分析2020年1月24日至2月9日在中南大学湘雅二医院确诊的30例COVID-19患者早期咽拭子病毒核酸载量与临床症状、肺部影像学特征的具体关联。结果：30例COVID-19患者就诊时,4例患者（13.33%）未出现临床症状,23例患者（76.67%）出现发热;20例患者（66.67%）出现COVID-19影像学改变,10例患者（33.33%）影像学无明显异常。COVID-19无症状患者的咽拭子病毒核酸Ct值与有症状患者相比差异无统计学意义;相比于影像学无异常的患者,出现肺炎影像学表现的患者咽拭子病毒核酸Ct值更大（P=0.001）,体温更高（P=0.014）;通过logistic回归模型校正性别和年龄后,咽拭子病毒核酸Ct值与出现肺炎影像学特征呈独立正相关（OR=1.34,95%CI=1.07~1.66,P=0.009）。结论：早期无临床症状的COVID-19患者与有症状患者的咽拭子病毒载量水平相当;COVID-19患者早期咽拭子病毒载量与肺部影像学特征呈负向关联。     

乙肝病毒标志物定量检测与肝脏损害的相关性研究

目的：探讨乙肝病毒标志物定量检测与肝脏损害的关系。方法：采用人院时第一份血清，应用时间分辨免疫荧光分析法（TRIFA）测定696例乙肝患者病毒标志物的含量，同步监测肝功能。结果：HBeAb与ALT呈负相关（r=-0．346，P〈0．05），HBeAg与TBIL呈负相关（r=-0．230，P〈0．05），而乙肝病毒标志物定量与AST、PAB、ALB、PT无关。结论：不能完全以乙肝病毒标志物的定量来判断患者肝功能的好坏。     

前列地尔脂微球载体制剂注射液配合血浆置换治疗重型肝炎临床研究

目的:评价前列地尔脂微球载体制剂注射液(Lipo-PGE1)配合血浆置换治疗重型肝炎的疗效。方法:将102例重型肝炎患者随机分为试验组和对照组。试验组53例(亚急性重型肝炎6例,慢性重型肝炎47例)在内科综合治疗基础上加用血浆置换及Lipo-PGE1;对照组49例(亚急性重型肝炎3例,慢性重型肝炎46例)仅用内科综合治疗加用血浆置换。测定两组患者治疗前后血清总胆红素(TBIL)、谷丙转氨酶(ALT)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子(TNF-α)和内毒素浓度。结果:试验组和对照组治疗后血清TBIL,ALT,IL-6,TNF-α和内毒素较治疗前均明显降低(P<0.05或P<0.01);其中试验组IL-6和TNF-α还显著低于对照组[IL-6:(28.5±18.4)vs.(38.9±12.4)ng.L-1,P<0.01;TNF-α:(168.46±10.24)vs.(258.39±11.42)ng.L-1,P<0.01]。试验组总有效率(治愈及好转)为73.6%,显著优于对照组46.9%(P<0.01)。结论:Lipo-PGE1配合血浆置换是治疗重型肝炎的有效方法。     

人细胞间黏附分子1cDNA的克隆及表达载体的构建

目的 构建人细胞间黏附分子-1真核表达重组体pcDNA3．1hisB-ICAM-1。方法 设计、合成ICAM-1基因序列特异性引物，从肝癌组织中提取总RNA，以此为模板经RT-CR扩增人ICAM-1的cDNA片段；然后将其克隆到pGEM-T Easy Vector，构建中介重组体(pGEM-ICAM-1)，再克隆，构建真核表达重组体pcDNA3．1HisB-ICAM-1，经菌落PCR和限制性酶切有目的片段出现，进行DNA序列分析。结果 RT-PER扩增得到人成熟ICAM-1的cDNA片段大小为1622bp，中介重组体(pGEM-ICAM-1)，酶切后与真核表达载体连接，根据酶切鉴定和DNA序列分析得到真核表达重组体pcDNA3.1HisB-ICAM-1；结论：成功构建了真核表达重组体pcDNA3．1HisB-ICAM-1。