体内诱导多能干细胞与机体的损伤修复及再生

细胞单向分化的假说在近年来受到挑战,越来越多的证据表明,高度分化的细胞可以在一定条件下转化为干细胞。而近来发现了两例小鼠体内由机体损伤干细胞缺失引起的高度分化细胞去分化形成干细胞的证据。这表明,哺乳动物可以不依赖外源干细胞的导入,而是由自体细胞的去分化成为多能性干细胞、增殖与再分化而起到修复损伤的作用。对于自体去分化再生机制的探究可能会引起一些具有挑战性的观念,这对于损伤修复,治疗肿瘤和众多难愈疾病有着重要的理论意义和极大的应用前景。     

老年鼠六种组织细胞的细胞核与染色质DNaseⅠ的消化敏感？…

为探讨衰老的机理,作者研究了老年鼠和断奶乳鼠的心、肝、脾、肺、肾、脑等６种组织细胞的细胞核和染色质对ＤＮＡ酶Ⅰ（ＤＮａｓｅⅠ）的消化敏感性。结果显示：①老年鼠的心、肝、脾、肺、肾、脑等６种组织细胞的细胞核和染色质对ＤＮａｓｅⅠ的消化敏感性均较断奶乳鼠相应的组织低;②老年鼠的心、肝、脾、肺、肾、脑等６种组织的消化敏感性各不相同,脑组织的消化敏感性最低（Ｐ〈０．０１）;③断奶乳鼠脑组织的消化敏感性也较     

含碱性成纤维细胞生长因子和表皮生长因子培养基先后作用培养建立大鼠胚胎神经干细胞克隆的实验

背景体外培养获得神经干细胞的有效方法是干细胞实验研究中很值得关注的问题.目的观察应用含有不同生长因子的培养基体外培养神经干细胞的有效方法.设计单一样本观察.单位四川大学生命科学院细胞生物学实验室.材料孕14 d SD大鼠10只,DMEM/F12 11,碱性成纤维细胞生长因子,表皮生长因子;巢蛋白抗体IgG,β-微管蛋白Ⅲ抗体Ig G,胶质纤维酸性蛋白抗体Ig G,生物素标记二抗和三抗、异硫氰酸荧光素标记二抗.方法实验于1999/2001在四川大学生命科学院细胞生物学实验室完成.①从胎鼠前脑取出脑组织,采用酶消化、机械吹打、离心、培养原代神经干细胞克隆.②神经干细胞以2×108L-1密度接种培养,分4组,每组6瓶细胞,DMEM/F12组加入DMEM/F12(11)培养基含体积分数为0.1的小牛血清;碱性成纤维细胞生长因子组培养基为含20μg/L碱性成纤维细胞生长因子;表皮生长因子组培养基含30μg/L表皮生长因子;碱性成纤维细胞生长因子+表皮生长因子组先用含碱性成纤维细胞生长因子的培养基培养2 h后再换成含表皮生长因子的培养基培养.培养24 h后更换培养瓶,培养14 d后显微镜下计数原代克隆数,免疫组化法检测干细胞特殊标记蛋白巢蛋白的表达.主要观察指标①神经干细胞的原代克隆.②单细胞克隆培养结果.③诱导分化结果.结果①从胎鼠脑中分离的细胞具有连续传代形成克隆的能力,免疫荧光化学显示细胞球内细胞巢蛋白表达阳性.②采用含碱性成纤维细胞生长因子和表皮生长因子培养基先后作用培养的方法形成神经干细胞克隆率最高(0.630%).③培养的神经干细胞克隆能诱导分化成神经元和神经胶质细胞.结论①结果证实培养分离的细胞是神经干细胞.②采用含碱性成纤维细胞生长因子和表皮生长因子培养基先后作用培养的方法是获得神经干细胞的有效方法.     

对铬作业工人银染核仁形成区,姊妹染色单体互换及微核的研究

Ag-NOR, SCE and micronucleus test of peripheral blood lymphocyte obtained from 31 chromate producers had been studied. We found that (1) in the workers who had been exposed over eight years, the frequency of Ag-NOR, Ag-AA and SCE were 6.905 +/- 1.100, 0.380 +/- 0.652 and 8.190 +/- 3.727, but in the control group, 6.512 +/- 1.595, 0.215 +/- 0.529 and 7.171 +/- 2.683, respectively. So there was considerably significant difference between the exposed and the unexposed (P less than 0.01); (2) the frequency of micronuclei was 3.71 +/- 1.419% in the exposed group; however, in the control group it was 0.333 +/- 0.479%. So there was also remarkably significant difference between them (P less than 0.001). The observations lead the authors to conclude that the genetic material of the workers who have been working over eight years may be damaged because of being exposed to chromate.     

老年人与青年人染色体脆性位点的比较

作者研究了４５例老年人和２９例青年人外周血淋巴细胞在ＦＵＤＲ和咖啡因诱导下，外周血淋巴细胞染色体的畸变及脆性位点的表达。结果：①老年组染色体畸变率为２４７５％，青年组为４２２％，两者差异显著（Ｐ＜００１）；②老年组脆性位点表达率为４５９３％，青年组为２３０２％，明显低于老年组（Ｐ＜００１）；③染色体断裂点与脆性位点符合率老年组为７９９８％，青年组为９２％，说明脆性位点与染色体畸变密切相关     

印度人近端着丝粒染色体银染核仁形成区(NOR)的群体异态

70个正常印度人(35个男性,35个女性)近端着丝粒染色体的核仁形成区(NOR)用银染NSG和RFA显带技术检验     

老年人与青年人染色体脆性位点的比较

作者研究了４５例老年人和２９例青年人外周血淋巴细胞在ＦＵＤＲ和咖啡因诱导下，外周血淋巴细胞染色体的畸变及脆性位占的表达。结果：１．老年组染色体畸变率为２４．７５％，青年组为４．２２％，两者差异显著。２．老年组脆性全点表达率为４５．９３％，青年组为２３．０２％，明显低于老年组；３．染色体断裂点与脆性位点符合率老年组为７９．９８％，青年组为９２％，说明脆性位点与染色体畸变密切相关。     

用鸡红细胞取代Hela细胞进行细胞融合的实验研究

为了探讨更经济、简便、有效的细胞融合方法 ,作者用鸡红细胞和Hela细胞为材料 ,聚乙二醇 (mw =4 0 0 0 )为诱导剂 ,诱导鸡红细胞 ,Hela细胞融合。结果鸡红细胞和Hela细胞融合率分别为2 2 %和 2 0 % ,两者无显著差异 ,但鸡红细胞更优于Hela细胞     

建立大鼠胚胎神经干细胞克隆的实验研究

为了获得神经干细胞克隆,作者从胚胎大鼠脑前区取出神经组织,经酶消化,机械吹打,有限稀释法培养具有单细胞克隆能力的细胞群,再利用单细胞克隆技术连续传代培养获取亚克隆,采用免疫细胞化学技术检测并鉴定神经干细胞和分化后成熟神经细胞特异抗原的表达.发现从胎脑分离的细胞群具有形成连续克隆能力,并表达特异的神经干细胞蛋白(Nestin);诱导分化后的细胞表达神经元和星形神经胶质细胞的特异抗原(Tubulin和GFAP).因而认为分离细胞克隆具有自我更新和多分化潜能,表达神经干细胞蛋白,有较强的体外增殖和分化成成熟神经细胞的能力,是中枢神经系统的干细胞.     

芫花、甘遂、大戟、甘草等药物配伍组成C、L、T、G丸的诱变实验研究

<正> 十八反是中药药性基本理论之一,但是对于其存、废的争论,从汉至今尚未停息。在实验方面,以往的研究基本上仍是以健康动物的急性或亚急性实验为主,有关遗传毒理方面的研究,一直未见报道,为了评价十八反药物配伍的安全性,提供遗传毒理方面的资料,我们选用芫花、甘遂、大戟、甘草等药配伍组成C、L、T、G、丸,应用鼠伤寒沙门氏菌加哺乳动物肝微粒体酶检测系统,以及枯草杆菌重组修复试验对该丸进行了诱变性测试,现报告于后: