Isolation of Side Population Cells and Detection of ABCG2 from SW480

Objective:Side population cells(SP cells)are a new type of stem cells.They mainly express ABCG2/BCRP1 and have the ability to eliminate DNA dye Hoechst33342.Many studies showed that side population cells were able of self-renewal,differentiation and carcinogenesis in cancers.Our investigation aimed at isolation of side population cells and ABCG2 positive subpopulation from colon cancer cell line SW480 and identification of their characteristics of cancer stem cells.Methods:side population cells and non-side population cells of colon cancer cell line SW480 were isolated with DNA dye Hoechst33342 and their cell cycles were measured by flow cytometry.Expression of ABCG2 of SW480 was measured by immunohistochemistry and immunofluorescence,and its proportion was measured by flow cytometry.Results:SW480 contained 2.29% side population cells.The fraction of side population cells decreased greatly to 0.40% by treatment with verapamil.The fraction of side population cells in S-G2M cell cycle was 16.14%,which was much lower than the fraction(34.05%)of non-side population cells in S-G2M.In SW480,ABCG2 positive cells,which proportion was 9.66%,were small,circular or oval,lack of psuedopods,similar to poor differentiation.On the contrary,the ABCG2 negative cells were large,polygonal,with many psuedopods,similar to high differentiation.Conclusion:our assay identified that side population cells did exist in SW480 and had a quiescence characteristic of stem cells.ABCG2 positive subpopulation occupied about 9.66% of SW480 and may have the ability to promote cell self-renewal and inhibit cell differentiation.Therefore,to isolate ABCG2 positive subpopulation from side population cells may be an alternative to study colorectal cancer stem cells.     

乳腺癌哨兵淋巴结活检相关问题探讨

统治了乳腺癌外科近100年的Halsted手术主要包括乳房切除及全腋窝清扫两大部分。20世纪后期,乳腺癌外科治疗发生了第1次变革,即从乳房切除到保留乳房手术;20世纪末到本世纪初,发生了第2次变革即从腋窝清扫(ALND)到以保留腋窝为最终目标的哨兵淋巴结活检手术。所谓哨兵淋巴结(SLN)就是接受来自肿瘤的淋巴引流的第1个或者数个淋巴结(LN)。SLN概念主要基于腋窝LN有序转移理论,即腋窝淋巴结转移以递增的形式从腋窝的较低水平到较高水平(LevelⅠ→Ⅱ→Ⅲ)。据此,SLN是最有可能首先发生转移的,如果SLN没有转移,腋窝其它LN应该是没有转移…     

CD44+/CD24-/low在乳腺癌中表达及其临床意义

目的 观察乳腺癌中CD44+/CD24-/low的表达与临床病理特征的关系及其对预后的影响.方法 应用双染免疫组织化学检测144例乳腺癌与30例乳腺良性肿瘤或正常乳腺组织中CD44+/CD24-/low的表达,收集并分析患者的临床病理和随访资料.结果 CD44+/CD24-/low在乳腺良性肿瘤或正常乳腺中表达率为0%～8%,乳腺癌中表达率为0%～75%.67例(46.5%)乳腺癌患者CD44+/CD24-/low表型的细胞>10%,余77例(53.5%)≤10%.CD44+/CD24-/low的表达高低在淋巴结转移(P<0.01)、病理分期(P<0.01)、HER-2表达(P<0.01)以及复发(P<0.01)上差异有统计学意义.CD44+/CD24-/low高表达的肿瘤复发时主要表现为远处转移,尤其是骨转移.CD44+/CD24-/low高表达和低表达的5年无病生存率为65%和82%(P<0.01),5年总生存率为68%和86%(P<0.05),差异有统计学意义.结论 CD44+/CD24-/low的表达可能与乳腺癌的转移有关,有可能作为评估乳腺癌患者预后的参考指标.     

双侧乳头状甲状腺微小癌淋巴结转移及外科处理

目的 研究双侧乳头状甲状腺微小癌患者颈部淋巴结转移的频率及方式,提供最佳外科治疗策略.方法 分析2006年3月至2008年8月58例双侧乳头状甲状腺微小癌的性状,颈部淋巴结转移频率、方式及外科治疗.结果 58例患者中行双侧甲状腺腺叶全切除44例.一侧腺叶全切除加对侧腺叶次全切除14例.颈中央区(Ⅵ区)淋巴结清扫加双侧颈内静脉淋巴结链(Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ区)切开探查47例,颈Ⅵ区淋巴结清扫加单侧颈部淋巴结清扫10例,双侧颈部淋巴结清扫1例.患者肿瘤平均直径为(6.28±2.23)mm,共26例(44.8%)发生颈部淋巴结转移,双侧乳头状甲状腺微小癌具有明显颈部淋巴结转移倾向(P＜0.05).88.5%(23/26)患者仅有颈Ⅵ区淋巴结转移,3.8%(1/26)发生颈内静脉旁Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ区跳跃性转移;7.7%(2/26)发生颈Ⅵ区伴其他区域转移.结论 双侧乳头状甲状腺微小癌具有很高的淋巴结转移发生率,颈Ⅵ区是淋巴结转移好发部位,对于双侧乳头状甲状腺微小癌患者应进行常规颈Ⅵ区淋巴结清扫.     

乳腺癌根治术后皮瓣坏死的简易处理

目的 探讨乳腺癌根治或改良根治术后大块皮瓣坏死的理想处理方法。方法 1998～2002年我院乳腺外科行乳腺根治或改良根治365例,较大范围皮瓣坏死(≥3×3cm)40例(11％),进行简单清创后直接将坏死皮瓣切除缝合。结果 40例病人中39例经过坏死皮瓣切除缝合后成功(97.5％),其中 2例术后皮瓣再次坏死,行再次上述手术而治愈。1例病人再坏死皮瓣小而浅,经过数次换药后迅速愈合。结论 就乳腺癌根治或改良根治术后较大皮瓣发生坏死而言,局部坏死皮瓣切除加立即缝合是一种经济、简单、实用的方法。     

70岁以上老年乳腺癌患者前哨淋巴结活检的研究

鉴于老年患者体质、伴发疾病以及预期寿命的考虑,外科医生对老年乳腺癌患者的手术范围尤其是腋窝淋巴结清扫与否一直存在争议.自2006年1月到2008年10月,我们对43例年龄大于70岁的老年乳腺癌患者进行了前哨淋巴结活检(sentinel lymph node biopsy,SNLB)替代腋窝清扫研究,并进行了随访,现报告如下.     

胃腺癌癌巢和癌间质中巨噬细胞的分布及其与患者预后关系

目的了解胃腺癌组织中巨噬细胞（tumor associated macrophages,TAMs）浸润情况,探讨TAMs分布及其与预后的关系。方法采用免疫组织化学SP法,检测92例胃腺癌癌巢和癌间质中CD68^＋巨噬细胞数,结合随访资料分析TAMs与患者术后无复发生存率关系。结果胃腺癌间质及癌巢组织中均有大量TAMs浸润,且癌间质中TAMs表达高于癌巢（9．78个／HFP与4．00个／HFP,P=0．000）;Ⅰ＋Ⅱ期癌巢内TAMs高于Ⅲ＋Ⅳ期（4．73个／HFP与3．27个／HFP,P=0．001）,Ⅰ＋Ⅱ期癌巢TAMs／癌间质TAMs比值高于Ⅲ＋Ⅳ期（0．58个／HFP与0．29个／HFP,P=0．004）,而Ⅰ＋Ⅱ期癌间质TAMs低于Ⅲ＋Ⅳ期（8．85个／HFP与11．03个／HFP,P=0．000）。结论Cox风险比例回归模型显示,癌巢TAMs和癌巢／癌间质TAMs比值越大,患者无复发生存率越高,而癌间质TAMs越大患者无复发生存率越小。癌巢TAMs、癌间质TAMs及癌巢／癌间质TAMs比值可作为临床评估胃腺癌患者的预后指标。     

腹腔镜结直肠肿瘤切除术中转开腹手术的原因分析

经腹腔镜行结直肠肿瘤切除术121例,中转开腹手术12例,原因分别为肿块术前定位不准确、肿瘤肠段切除后两断端吻合长度不够、术中出血、肥胖、输精管断裂、肿瘤与周围组织粘连难以分离各1例,骨盆狭窄、Endo-GIA切割吻合直肠残端失败、肿瘤在盆腔广泛浸润转移各2例.认为实施腹腔镜结直肠肿瘤切除术时,正确的术前评估、严格掌握手术指征、提高手术技巧将有助于避免不必要的中转开腹手术.     

Survivin,caspase-8在人体乳腺增生、乳腺癌癌前病变和乳腺癌中的表达程度分析

目的探讨survivin、caspase-8在人体乳腺增生、乳腺癌癌前病变和乳腺癌中的表达程度及其意义,为乳腺相关疾病的诊断和治疗提供科学依据。方法选取温州医科大学附属第一医院肿瘤外科手术切除病理标本人乳腺增生、乳腺癌癌前病变和乳腺癌病例蜡块标本,用免疫组化法(SP)检测survivin和caspase-8在各病理类型组织中表达的情况。结果在乳腺增生乳腺癌癌前病变和乳腺癌中survivin表达的阳性率分别为(89.00±1.38)%、(89.85±1.55)%和(85.72±1.10)%),3组两两比较差异均有统计学意义(P<0.05);caspase-8在乳腺增生、乳腺癌癌前病变和乳腺癌表达的阳性率分别为(75.03±1.32)%、(73.59±1.08)%和(72.80±1.17)%,3组两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 Survivin在3种乳腺相关疾病中的表达程度由高到低依次为乳腺癌癌前病变>乳腺增生>乳腺癌;caspase-8在3种乳腺相关疾病中的表达程度由高到低依次为乳腺增生>乳腺癌癌前病变>乳腺癌。Survivin和caspase-8的联合检测有助于对3种疾病的诊断提供参考依据。     

miR-155在乳腺癌组织中的表达及其临床意义

目的 探讨miR-155在乳腺癌中的表达及其临床意义.方法 收集2009年2月至6月乳腺癌手术切除标本45例,应用实时荧光逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测肿瘤组织及正常乳腺组织标本中miR-155的表达水平,探讨其表达与乳腺癌临床病理参数间的关系.结果 茎环RT-PCR检测miR-155表达的敏感性和特异性良好;miR-155在乳腺癌中相对表达量的中位值为0.360,显著高于其在正常乳腺组织中的表达(中位值0.135,P<0.05);miR-155的表达增高与TNM分期较晚(Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ期的中位值分别为0.316、0.358和0.417)、淋巴结转移(转移组和非转移组的中位值分别为0.383和0.355)、高增殖指数(Ki67≤10%组和>10%组的中位值分别为0.353和0.387)、雌激素受体阳性(阳性组和阴性组的中位值分别为0.367和0.318)及孕激素受体阳性(阳性组和阴性组的中位值分别为0.398和0.335)有关(P值均<0.05).结论 miR-155在乳腺癌组织中表达增高,尤其是在雌、孕激素受体阳性的乳腺癌组织中表达增高更为明显.miR-155与乳腺癌的增殖、侵袭及转移密切相关,其可能成为乳腺癌治疗、预后判断的潜在生物学指标.