雌二醇通过调节上皮细胞系的旁分泌促进前列腺间质细胞增殖和分化

目的： 研究雌二醇通过调节上皮细胞的旁分泌对前列腺间质细胞增殖、分化和胞外基质蓄积的作用。方法： 雌二醇处理前列腺增生上皮细胞系BPH-1，用收集的条件培养液（CM）培养人前列腺间质细胞，MTT法检测细胞的增殖；用实时定量RT-PCR检测细胞中smoothelin、纤维黏连蛋白、Ⅳ型胶原和转化生长因子-β₁（TGF-β₁）mRNA的表达水平；用Western blotting检测细胞平滑肌肌球蛋白重链（SM-MHC）的表达；用放射性免疫法和ELISA分别检测Ⅳ型胶原、纤维黏连蛋白和TGF-β₁的蛋白水平。结果： 雌二醇能够上调BPH-1细胞中TGF-β₁的表达和分泌；经雌二醇刺激的BPH-1 CM能促进间质细胞的增殖；雌二醇刺激的BPH-1 CM对平滑肌细胞特异蛋白（smoothelin和SM-MHC）表达的促进作用较未经雌二醇刺激者更加明显；TGF-β₁中和抗体可以抑制BPH-1 CM对间质细胞中Ⅳ型胶原和SM-MHC的促表达作用。结论： BPH-1 可通过分泌TGF-β₁促进间质细胞的分化和胞外基质的蓄积；雌二醇可通过上调BPH-1 TGF-β₁的分泌进一步促进间质细胞的分化；雌二醇还可通过调节BPH-1分泌的某种活性因子促进间质细胞的增殖。     

2型糖尿病胰岛素抵抗与胰岛素受体酪氨酸激酶域基因突变关系的研究

2型糖尿病胰岛素抵抗与胰岛素受体酪氨酸激酶域基因突变关系的研究     

普通棉耳狨猴仙台病毒感染的报道

仙台病毒在分类上属副粘病毒科、副粘病毒属、副流感病毒 1型。仙台病毒过去的名称包括新生儿肺炎病毒 ,日本血凝病毒和Ｄ型流感病毒等。在国内普通实验小鼠群中仙台病毒感染非常普遍 ,而未见仙台病毒感染普通狨猴的报道。 1999年夏季 ,天津某高校一个狨猴实验室中暴发仙台病毒感染 ,动物发病率达 80 % ,病死率约 10 %。流行大约持续了一个月。狨猴发病初始均表现为精神不振 ,嗜睡 ,惧冷 ,食欲下降。继续发展表现为鼻腔出现分泌物 ,呼吸加快 ,发热 ,气喘 ,呼吸困难 ,多数病狨从发病至死亡在 3- 15ｄ。解剖发现病死狨猴肺叶呈杨梅色 ,切开时…     

2型糖尿病患者SLC22A1,SLC22A2基因多态性与二甲双胍胃肠道不良反应的关系

 目的 探讨2型糖尿病(T₂DM)患者SLC22A1 1222A＞G位点及SLC22A2 808G＞T位点基因多态性与二甲双胍胃肠道不良反应之间的关系。方法 随机选取130例就诊于我院内分泌科初次接受二甲双胍治疗的T₂DM患者,从患者外周血白细胞中提取DNA,应用等位基因特异引物PCR反应(Allele-specific PCR,AS-PCR)及凝胶成像技术进行基因分型,分析1222A＞G及808G＞T位点多态性与二甲双胍胃肠道不良反应的关系。结果 SLC22A1 1222A＞G位点存在AA、AG、GG三种基因型,突变频率为64.62%,A等位基因与二甲双胍胃肠道不良反应的发生相关(P＜0.05);SLC22A2 808G＞T位点存在GG、GT、TT三种基因型,突变频率为11.15%,该位点不同基因型患者发生二甲双胍胃肠道不良反应的概率不存在统计学差异(P＝0.559);二甲双胍胃肠道反应阳性组患者年龄大于胃肠道反应阴性患者(P＝0.037);二甲双胍胃肠道反应阳性组患者收缩压高于胃肠道反应阴性患者(P＝0.017)。结论 T₂DM患者SLC22A1 1222A＞G基因多态性与二甲双胍胃肠道不良反应的发生相关,SLC22A2808G＞T基因多态性与二甲双胍胃肠道不良反应的发生无关;老龄及高收缩压可能是造成二甲双胍胃肠道不良反应的危险因素。     

癃必消胶囊对体外培养的人前列腺增生间质细胞Fibronectin和Collagen IV基因表达的影响

目的 研究中药癃必消胶囊对体外培养的人前列腺增生间质细胞Fibronectin和Collagen IV基因表达的影响.方法 把含癃必消胶囊的药物血清加入到体外培养的人前列腺增生间质细胞中、采用实时定量RT-PCR等相关技术,检测Fibronectin和Collagen IV在体外培养的人前列腺增生间质细胞中的表达.结果 癃必消胶囊能降低体外培养的前列腺增生间质细胞Collagen IV基因的表达,对Fibronectin基因的表达无明显规律.结论 癃必消胶囊通过抑制前列腺间质细胞Collagen IV基因的表达达到治疗前列腺增生的目的.     

BPH-1通过分泌前列腺素E2促进前列腺间质细胞芳香化酶的表达

目的：研究前列腺上皮细胞旁分泌对间质细胞芳香化酶表达的影响。方法：用前列腺上皮细胞系（BPH-1, LNCap, DU145, PC3）条件培养液（CM）处理间质细胞，用RT-qPCR和Western blotting检测芳香化酶表达水平。用RT-qPCR和ELISA检测上皮细胞系环氧合酶2（COX-2）的表达及其CM前列腺素E2(PGE2)浓度。用添加COX-2特异性抑制剂NS-398的培养液培养BPH-1，检测其CM和PGE2对间质细胞芳香化酶表达影响。结果：良性前列腺增生上皮细胞系BPH-1 CM能促进间质细胞芳香化酶mRNA和蛋白的表达，而前列腺癌细胞系PC3、DU-145和LNCap对芳香化酶的表达没有影响。BPH-1 COX-2 mRNA表达水平和PGE2分泌水平远高于其它癌细胞系。添加NS-398培养BPH-1的CM，其PGE2浓度明显降低。PGE2可明显诱导间质细胞芳香化酶的表达。结论：BPH-1通过分泌PGE2促进前列腺间质细胞芳香化酶的表达。     

良性前列腺增生组织中基质细胞的增殖和凋亡

目的：探讨良性前列腺基质增生组织中细胞增殖及凋亡状态的改变。方法：采用双抗体免疫组化方法，对6例良性前列腺增生和4例正常前列腺组织标本中平滑肌细胞的增殖状态进行研究；采用免疫组化和TUNEL相结合的方法，在连续的组织切片上观察基质细胞凋亡状态的变化。结果：在增生的前列腺组织中，处于增殖状态的平滑肌细胞比例远远高于正常前列腺组织，处于凋亡状态的基质细胞比例低于正常前列腺组织。结论：良性前列腺增生组织中，平滑肌细胞的增殖增加和基质细胞的凋亡减少同时发生。     

聚合酶链反应单链构象多态性和银染技术筛查胰岛素受体基因突变

目的建立聚合酶链反应单链构象多态性（ＲＣＲＳＳＣＰ）和银染技术筛查胰岛素受体基因突变方法。方法选择８９例非胰岛素依赖型糖尿病患者,ＰＣＲ扩增编码胰岛素受体酪氨酸激酶域的外显子（外显子１７～２１）,进行ＳＳＣＰ电泳,银染色后,对突变样品进行序列分析。结果发现１１例外显子１７和１例外显子２０的异常电泳条带,外显子１７的突变经顺序分析,为ＣＡＣ１０５８→ＣＡＴ１０５８的杂合和纯合多态性突变。结论ＰＣＲＳＳＣＰ结合银染技术是一种操作简便、经济、灵敏度高、适合于临床大样本基因突变筛查的方法。     

一株致普通棉耳狨猴严重下呼吸道感染的副粘病毒种系进化分析

目的探讨副粘病毒Tianjin株的种系进化地位。方法将副粘病毒Tianiin株HN核苷酸、氨基酸序列与GenBank发布的副粘病毒相应序列进行比较，构建种系进化树，阐明副粘病毒Ti枷in株在副粘病毒科中的分类地位。结果基于HN核苷酸序列的种系进化分析表明，副粘病毒Tianjin株属于副粘病毒科、副粘病毒亚科、呼吸道病毒属，与仙台病毒亲缘关系最近。Tianjin株与仙台病毒BBl株HN核苷酸、氨基酸序列同源性分别为94．8％、95．1％，与其他仙台病毒，在84．8％～88．7％和89．6％～91．7％之间。Tianiin株与BBI株HN核苷酸序列的差异明显大于同一进化分支内的仙台病毒之间的差异。Eanjin株HN蛋白存在18个独特的氨基酸残基变异。结论结合种系进化分析结果、病毒的宿主来源和致病特点，提示副粘病毒Tianjin株不属于仙台病毒现有的3个进化分支而自成独立的一支。     

C-myc反义寡核苷酸对肺癌细胞生长增殖及其端粒酶活性抑制作用的观察

目的：探讨硫代磷酸修饰型反义核酸封阻C-myc基因，抑制癌细胞代谢、生长的作用。方法：培养端粒酶高活性的人肺癌细胞系LTEP-a-2，合成针对C-myc基因的硫代反义寡核苷酸封条和随机序列寡核苷酸片断，导入LTEP-a-2细胞系，作用72h，分析反义封条对细胞端粒酶，琥珀酸氧化脱氢酶(SDH)，DNA合成和细胞增殖的作用。结果：C-myc反义封条PS-ODN12 5μmol／L抑制LTEP-a-2细胞34．87％的端粒酶活性；10μmol／L抑制62．71％端粒酶活性；20μmol／L抑制89．18％端粒酶活性。反义封条PS-ODN9 20μmol/L仅抑制LTEP-a-2增殖(39．22％～85．29％)和SDH活性(42％～80％)作用。其对DNA合成亦有抑制作用(71．49％～87．35％)。随机序列硫代修饰寡核苷酸PS-ODN9 20μmol／L仅抑制LTEP-a-2细胞2．37％端粒酶活性，抑制4．5％的细胞增殖和4％SDH活性。结论：C-myc反义封条对肺癌细胞LTEP-a-2的增殖、端粒酶活性有特异性抑制作用，并呈剂量依赖关系。