miR-5701抑制胶质瘤细胞迁移和细胞周期的分子机制研究

目的 研究微小RNA(miRNA)-5701通过下调TXNDC5基因表达抑制胶质瘤细胞迁移和诱导其细胞周期停滞。方法 实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测胶质瘤细胞株(LN382、U251、SNB-19、U87MG)及正常脑胶质细胞HEB中miR-5701表达水平。培养SNB-19细胞分为两组,转染阴性对照序列(NC组)和miR-5701拟似物(miR-5701组)。RT-qPCR检测miR-5701的表达水平。划痕实验检测SNB-19细胞迁移能力,流式细胞术检测SNB-19细胞周期。RT-qPCR和Western blot法检测TXNDC5基因的表达水平。通过GEPIA数据库分析胶质瘤组织和癌旁组织中TXNDC5基因表达差异。双荧光素酶报告基因实验验证miR-5701靶向TXNDC5。结果 与HEB细胞比较,胶质瘤细胞株中miR-5701表达水平明显降低(P<0.05)。NC组和miR-5701组miR-5701表达分别为1.66±0.40和13.75±1.61,与NC组比较,miR-5701组miR-5701表达明显增加(P<0.01)。NC组和miR-5701组SNB-19细胞划痕愈合率分别为76.43%±4.38%和40.15%±7.46%,NC组显著高于miR-5701组(P<0.05)。NC组和miR-5701组G0~1期细胞比例分别为48.24%±2.22%和67.38%±2.95%,与NC组比较,miR-5701组G0～1期比例显著增加(P<0.01)。与NC组比较,miR-5701组TXNDC5基因表达水平显著下降(P<0.01)。胶质瘤组织中TXNDC5基因表达明显高于癌旁组织(P<0.01)。TXNDC5基因mRNA第215~235碱基是miR-5701的结合位点(P<0.01)。结论 miR-5701在胶质瘤细胞株中表达下调,过表达miR-5701能够抑制胶质瘤SNB-19细胞的迁移能力及诱导细胞周期停滞,靶向抑制TXNDC5基因表达是miR-5701作用的分子机制。     

山萘酚对脂肪酸诱导的胰岛微血管内皮功能损伤的保护效应及多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1的作用机制

目的 探讨山萘酚对脂肪酸诱导的胰岛微血管内皮功能损伤的保护效应及多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1(PARP-1)的作用.方法 以小鼠胰岛微血管内皮MS-1细胞为研究对象,将细胞分为正常对照组、溶剂(DMSO)对照组、脂肪酸组(0.25 mmol/L软脂酸+0.5mmol/L油酸)、山萘酚组(50 μmol/L)、脂肪酸+山萘酚组、PARP-1抑制剂(8μmol/LBYK204165)+脂肪酸组和PARP-1抑制剂+脂肪酸+山萘酚组,分别检测各组细胞活力、凋亡水平、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)及氧化应激相关指标的改变.结果 脂肪酸处理后,MS-1细胞存活率下降,细胞凋亡率升高(P＜0.05);同时,脂肪酸也增加了细胞内NO的含量,升高了总NOS(tNOS)、诱导型NOS(iNOS)和结构型NOS(cNOS)的活性(P＜0.05);促使脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量增加,抗氧化物质谷胱甘肽(GSH)和超氧化物歧化酶(SOD)的水平下降(P＜0.05);并增强了PARD-1、iNOS和cNOS的mRNA和蛋白表达水平(P＜0.05).而山萘酚干预后,各项指标的水平均得以改善(P＜0.05);而且,利用PARPP-1抑制剂BYK204165预处理1h,山萘酚对脂肪酸的拮抗效应更为显著,各项检测指标与正常对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 脂肪酸可直接引起胰岛微血管内皮功能损伤,而山萘酚具有拮抗脂肪酸毒性的作用,且抑制PARP-1的表达水平能增强山萘酚的保护效应.     

神经外科住院医师规范化培训基地建设标准与探索

以新桥医院神经外科基地建设为例,围绕基地建设的要求和评估指标进行详尽分析和讨论,提出了神经外科基地建设的具体目标、举措和实施环节。研究通过对新桥医院神经外科基地建设的细化解读与实施方案,总结经验、克服不足,将有助于提高我国住院医师规范化培训基地建设。     

开胸手术后伤口持续输注局麻药和PCIA的镇痛效果

目的比较开胸手术后伤口持续输注局麻药和PCIA的镇痛效果。方法择期开胸非心脏手术患者60例,ASAⅠ或Ⅱ级,随机均分为两组:伤口持续输注局麻药镇痛组(A组)和PCIA组(B组)。A组患者缝皮前在切口皮下处放置镇痛泵导管,继之通过导管快速给予0.5%罗哌卡因5ml,术毕48h内以2ml/h持续输注0.5%罗哌卡因。B组患者手术结束前30min缓慢静注舒芬太尼3μg,术毕接PCA泵以2ml/h(3μg/kg舒芬太尼配置成100ml)持续泵注。分别记录患者术后2、8、12、24、36、48h安静和活动时VAS评分、Ramsay镇静评分、术后需哌替啶镇痛例数、不良反应、住院时间及总体满意率等。结果两组患者术后不同时点安静时和活动时VAS评分差异无统计学意义。与A组比较,术后不同时点A组Ramsay镇静评分明显升高(P0.05)。术后A组无一例患者发生不良反应,明显低于B组嗜睡26例(87%)、头晕11例(37%)(P0.05)、呼吸抑制2例(6%)。A组满意率29例(97%),B组25例(83%),患者术后需哌替啶镇痛A组8例(26.7%),B组7例(23.3%),两组差异均无统计学意义。结论伤口持续输注局麻药镇痛和PCIA具有同样的镇痛效果,但伤口持续输注局麻药镇痛不良反应发生率低。     

脂肪酸合成酶抑制剂胖大海提取物对营养性肥胖大鼠的减肥作用

目的研究胖大海提取物对营养性肥胖大鼠的减肥作用。方法利用高脂营养饲料制备大鼠肥胖模型,观察胖大海提取物10、30和100 mg/kg 3个不同剂量对肥胖大鼠的减肥效果及对肝脏脂肪酸合成酶的影响。于实验结束时测定体质量、机体脂肪、食物消耗量、血清生物化学指标及肝脏脂肪酸合成酶活性指标,实验持续45 d。结果胖大海提取物100 mg/kg组大鼠体脂显著低于模型对照组(P<0.05);实验期间各剂量组大鼠的食物消耗量均低于模型对照组,且100 mg/kg组与模型对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。给予胖大海提取物组大鼠肝脏脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FAS)活性低于模型对照组,其中胖大海提取物30和100 mg/kg,2组与模型对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论胖大海提取物可抑制脂肪酸合成酶活性,抑制肥胖大鼠摄食量。     

超声引导在颈内静脉穿刺置管术中的应用

1一般资料近期在临床上遇到10例经传统的依靠解剖标志插管失败,后改行经超声引导下颈内静脉穿刺置管病例.其中4例为探测不到颈内静脉,6例为导丝送入受阻.分析其原因,其中4例患者常规插管前体检发现颈部有异常体征:1例为甲状腺肿大,1例为颈部有烧伤疤痕组织,1例为肥胖颈部短粗,1例为颈部饱满,颈外静脉扩张.     

丙泊酚在急性脑损伤中的神经保护作用

丙泊酚是临床最常用的镇静麻醉药,在急性脑缺血动物实验中表明其具有神经保护作用,对脑生理学产生正面影响(丙泊酚虽减少脑血流量但是维持与脑的氧代谢速率的耦合以及降低颅内压)。在所谓的"多模式神经保护"中起重要作用,是治疗急性脑损伤的一个整体策略,包括脑灌注的维持、体温控制、预防感染以及严格的血糖控制。     

SMILE手术矫正近视临床疗效观察

目的探讨SMILE矫正近视的安全性、有效性、可预测性及稳定性等。方法前瞻性研究。符合屈光手术常规适应证的94例（170眼）近视患者人选,行常规SMILE手术。患者年龄为18～44岁,平均（26．8±4．7）岁,术前等效球镜度（SE）-3．25～9．13D,平均（-6．20±1.37）D,散光0．00—3．25D,中位数-0．75（0．75）D,角膜厚度484～600μm,平均（554．7±27．5）μm。常规检查包括UCVA、BCVA、屈光度、眼压及角膜地形图、像差、裂隙灯显微镜检查等。术后随访6—24个月。采用配对t检验、线性回归分析进行统计分析。结果所有病例手术顺利。术后2年UCVA≥1．0、〉10．8的眼数分别为97％、100％。100％的术眼BCVA达到或高于术前BCVA,35％BCVA提高1行,10％BCVA提高2行。术后SE为（-0．01±0．45）D．87％术眼SE在±0．50D以内,100％术眼SE在±1．00D以内。术后总高阶像差、球差、彗差均方根值与术前比较均增加（拉-6．861、-2．078、-5．672,P〈0．05）,分别增加（0．15±0．12）μm、（0．04±0．11）μm、（0．14±0．14）μm。结论SMILE矫正近视临床效果肯定,具有较好的有效性、安全性、可预测性及稳定性：术后高阶像差、球差、彗差均增加,球差增加较少。     

姜黄素对人过氧化物酶体增殖物激活受体γ_1激活作用的研究

目的测定姜黄素(CUR)与人过氧化物酶体增殖物激活受体γ_1(h PPARγ_1)的亲和力和内在活性,确定CUR是否为h PPARγ_1的天然配体。方法通过放射性标记配基竞争结合实验和反式激活报告基因分别检测CUR与h PPARγ_1的结合活性和功能活性。结果 CUR与h PPARγ_1结合的半数抑制浓度(IC_(50))为(8.82±0.74)μmol/L,抑制常数(Ki)为0.72μmol/L;CUR对h PPARγ_1的半数有效浓度(EC_(50))为7.3μmol/L,最大活性倍数(E_(max))为43.3。结论 CUR不仅能与h PPARγ_1受体结合,而且能激活h PPARγ_1,可能是h PPARγ_1的天然配体。