槲皮素诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡的研究

目的:观察槲皮素(quercetin)体外对肝癌SMMC-7721细胞的生长抑制和诱导凋亡作用,并探讨线粒体在诱导凋亡机制中的作用。方法:以10、30、60和100μmol/L槲皮素作用于体外培养的SMMC-7721细胞,MTT法检测细胞生长抑制率;Annexi-V/PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡情况;吖啶橙(acridine or-ange,AO)染色法观察细胞凋亡时形态变化;JC-1染色法检测细胞线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential)变化。结果:槲皮素体外能抑制肝癌SMMC-7721细胞的生长(P<0.01),诱导细胞发生凋亡,并呈现量效和时效关系。10、30、60和100μmol/L槲皮素作用72h引起的细胞抑制率(F=343.71,P<0.01)和凋亡率(F=234.17,P<0.01)明显高于对照组。槲皮素作用48h后,AO染色图片可见细胞膜呈泡状膨出和凋亡小体等。凋亡过程中线粒体膜电位下降。结论:槲皮素体外能抑制肝癌SMMC-7721细胞生长,诱导细胞凋亡发生,线粒体膜电位下降在细胞凋亡过程中可能起到重要作用。     

腔内治疗髂静脉压迫综合征合并急性下肢深静脉血栓形成的疗效分析

目的探讨腔内治疗髂静脉压迫综合征(iliac vein compression syndrome,IVCS)合并急性下肢深静脉血栓形成(deep vein thrombosis,DVT)的有效性和安全性。方法回顾性收集和分析甘肃省人民医院血管外科2015年6月至2018年6月期间行支架置入与球囊扩张联合AngioJet机械血栓抽吸术治疗IVCS合并急性下肢DVT的57例患者的临床资料。通过患者术前及术后患健膝下15 cm处肢体周径差的变化和术中血栓清除率评价治疗效果。此外,术后依据改良的Villaita量表评分,患者的症状、体征和下肢静脉超声及造影检查统计血栓后综合征(postthrombotic syndrome,PTS)的发生率和髂静脉的通畅率。结果本组患者的手术均顺利,技术成功率为100%;术中及术后均无肺栓塞发生;下肢深静脉血栓清除率达Ⅲ级48例(84.2%),达Ⅱ级9例(15.8%);术后患健侧膝下15 cm处肢体周径差从(5.8±1.7)cm降至(3.7±1.0)cm(P<0.001)。术后随访1年结果:髂静脉狭窄置入支架术后12个月的通畅率为86.0%(49/57);有8例(14.0%)患者发生PTS(Villalta评分>5分)。结论支架置入与球囊扩张联合AngioJet机械血栓抽吸术治疗IVCS合并急性下肢DVT形成是一种安全、有效且易于进行的血管腔内治疗方法,具有高效的血栓清除率和高的通畅率。     

槲皮素联合survivin反义核苷酸对肝癌细胞凋亡协同作用的研究

目的 探讨槲皮素联合survivin反义核苷酸(ASODN)对肝癌SSMC-7721细胞株增殖、凋亡和细胞周期的影响.方法 常规培养SSMC-7721细胞,用四甲基偶氮唑盐法(MTT法)评价survivin ASODN联合槲皮素对肝癌细胞增殖的影响;流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡率和细胞周期;荧光染色观察细胞形态学变化;并通过RT-PCR和免疫组化方法检测survivin基因表达变化.结果 survivin反义寡核苷酸转染SSMC-7721细胞后,可以显著抑制细胞增殖,其抑制作用具有剂量依赖性,且能诱导肝癌细胞凋亡;联合槲皮索和survivin反义寡核苷酸抑制作用更为显著(t=4.317,P<0.01);RT-PCR及免疫组化显示ASODN和槲皮素均使survivin mRNA和蛋白表达下降.结论 survivin基因反义寡核苷酸联合槲皮素能明显抑制肝癌SSMC-7721细胞增殖、诱导细胞凋亡和下调survivin基因表达;两者具有协同作用.     

反义抑制Survivin表达对槲皮素诱导肝癌SSMC-7721细胞凋亡的影响

目的:采用Survivin反义寡核苷酸(ASODN)复合物抑制survivin的表达,研究其对槲皮素诱导肝癌SSMC-7721细胞凋亡的影响.方法:体外培养人肝癌SSMC-7721细胞,取对数生长期细胞进行实验. 实验分Ⅰ,Ⅱ两部分:Ⅰ分为空白对照组(设平行组)、等量脂质体LipofectamineTM2000对照组、400 μmol/L SODN复合物组、400 μmol/L ASODN复合物组(设平行组),转染48 h;Ⅱ弃掉Ⅰ部分各组培养液,换新指定培养液,分为空白对照组、40 μmol/L槲皮素组、脂质体LipofectamineTM2000组、SODN复合物组、ASODN复合物组、ASODN复合物 40 μmol/L槲皮素组(联合组),孵育细胞24 h后检测. Ⅰ结束时采用RT-PCR、细胞免疫组化染色检测各组SSMC-7721细胞survivin表达变化;Ⅱ结束时用吖啶橙染色法观察细胞凋亡时形态变化,MTT法检测SSMC-7721细胞生长抑制率,Annexi-V/PI双染流式细胞仪检测SSMC-7721细胞凋亡率.结果:ASODN复合物作用肝癌SSMC-7721细胞48 h后能下调survivin mRNA及Survivin蛋白的表达 (P＜0.01);与其他组比较,联合组AO染色图片可观察到凋亡小体等典型的细胞凋亡形态特征变化且凋亡细胞数量明显增多,并用MTT法、Annexin-V/PI双染流式细胞仪检测显示联合组细胞的生长抑制率增高(P＜0.01)、细胞凋亡率提高(P＜0.01).结论:ASODN复合物可有效抑制肝癌SSMC-7721细胞survivin基因的表达;ASODN复合物能增强槲皮素对SSMC-7721细胞增殖抑制及诱导凋亡的作用即二者具有协同作用,该作用可能与抑制survivin基因的表达有关.     

髂静脉狭窄伴下肢静脉曲张的临床治疗

下肢静脉曲张是一种常见病,如不及时治疗约有5％的患者会出现下肢斑疹、皮肤色素沉着,甚至下肢静脉性溃疡;一般人群中的发病率约为20％,女性患者略高于男性。静脉壁薄弱、静脉瓣膜缺陷、静脉压增高以及腓肠肌泵功能都被认为是静脉曲张发生发展的重要因素,但部分左下肢静脉曲张是由于左髂总静脉狭窄引起。我科自2008年2月至2012年4月收治37例髂静脉严重狭窄伴下肢静脉曲张病例,占左下肢静脉曲张病例327例的11．3％,采取曲张静脉点状剥脱术并髂静脉狭窄支架成形术,取得较好临床疗效,现报道如下。     

Trivex旋切术治疗下肢血栓性浅表静脉炎疗效观察

目的探讨Trivex旋切术治疗下肢血栓性浅表静脉炎的临床疗效。方法回顾性分析67例下肢血栓性浅表静脉炎病例的临床资料。患者术前给予丹参治疗、下肢静脉造影等术前准备;然后行大隐静脉主干内膜剥脱、用Trivex旋切系统剖吸曲张静脉和静脉丛内的血栓;术后给予低分子肝素抗凝、早期下床活动等处理。结果全部患者的手术均顺利,术中及术后无肺栓塞发生。术后2例切口Ⅱ期愈合,65例切VII期愈合。所有病例术后3d均出院,住院时间（5±1）d。15例术后患肢有瘀斑者随访2周均消失;7例出现内踝部麻木感,随访6个月消失;本组患者均获随访6个月,未见复发者。结论下肢血栓性静脉炎早期行以Trivex旋切术为主的综合治疗,其临床疗效好、住院时间短、创伤小及美容效果好,并可有效防止病情反复、深静脉血栓及肺栓塞的发生,是治疗下肢血栓性静脉炎的有效手段。     

瑞舒伐他汀防治颈动脉支架术后再狭窄的临床疗效评价

目的观察瑞舒伐他汀防治颈动脉支架植入(CAS)后再狭窄的疗效。方法分析2014年3月至2015年8月我院收住的69例CAS后患者,随机分为对照组(34例)和治疗组(35例),对照组口服拜阿司匹林100 mg/d,治疗组口服拜阿司匹林100 mg/d、瑞舒伐他汀10 mg/d,连续治疗12个月,对两组的疗效进行评价分析。根据数据类型分别采用t检验、方差分析或X~2检验进行组间比较。结果颈动脉支架置入后12个月时复查颈动脉CT血管成像发现,治疗组支架光滑度、支架内径、支架近端和远端血管情况均优于对照组(P0.01),支架内管腔密度值、支架内再狭窄率均低于对照组(P0.01);治疗组血浆总胆固醇(TC)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)较治疗前显著降低(P0.01)、血浆脂联素(APN)较治疗前显著升高(P0.01),对照组TC、LDL-C、APN较治疗前差异无统计学意义(P0.05)。结论颈动脉支架置入后口服瑞舒伐他汀对于预防支架后再狭窄闭塞效果显著,可降低再狭窄率。     

Trivex 微创旋切术治疗下肢静脉曲张合并急性血栓性浅表静脉炎

目的：探讨Trivex微创旋切术治疗下肢静脉曲张合并急性血栓性浅表静脉炎的疗效。方法2010年3月～2012年11月对62例血栓性浅静脉炎发病2周内的下肢静脉曲张,在大隐静脉高位结扎和主干剥脱基础上,用Trivex微创旋切系统创吸曲张静脉和静脉丛内的血栓,同时配合加压包扎、术后抗凝等治疗。结果手术均顺利,术中和术后无深静脉血栓及肺栓塞发生。术后局部红肿疼痛于3 d内消退,切口全部甲级愈合。住院时间3～8 d,平均5 d。62例随访2～12个月,平均6个月,大隐静脉曲张、血栓性浅静脉炎治愈无复发,无深静脉血栓形成患者,无死亡。结论 Trivex微创旋切术治疗合并急性血栓性浅静脉炎的下肢静脉曲张安全、有效。     

槲皮素对人肝癌SMMC-7721细胞生长的抑制及细胞凋亡的诱导作用

目的探讨槲皮素体外对人肝癌SMMC-7721细胞的生长抑制作用及诱导细胞凋亡的作用机制。方法以10、30、60、100#mol／L槲皮素作用于体外培养的SMMC-7721细胞,MTT法检测细胞生长抑制率,Annexi—V／PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡情况,免疫组化染色法检测bcl-2、bax蛋白表达的变化。结果30、60、100umol／L槲皮素可显著地抑制SMMC-7721细胞的生长（P〈0．01）,诱导细胞发生凋亡（P〈0．01）,并呈现量墩和时-效关系;槲皮素作用48h后,免疫组化染色法检测显示bcl-2蛋白表达降低和bax蛋白表达上调。结论槲皮素体外通过引起人肝癌SMMC-7721细胞bcl-2蛋白表达下调和bax蛋白表达上调诱导细胞发生凋亡,抑制细胞生长,槲皮素可能成为一种潜在的抗肝癌药物。