人α1,2岩藻糖苷转移酶基因在猪动脉内皮细胞的表达

目的通过基因工程技术使人α1,2岩藻糖苷转移酶(HT)基因在猪动脉内皮细胞(PAEC)表达,削减异种抗原αGal的表达。方法构建pcDNA3HTcDNA重组质粒,体外培养PAEC,脂质体转染法将pcDNA3HTcDNA转染PAEC,新霉素(G418)筛选具有抗性的细胞克隆,对其用PCR检测重组质粒的整合,流式细胞术(FCM)检测转染细胞H抗原和异种抗原αGal的表达。分别以未转染的PAEC和人脐静脉内皮细胞(HUVEC)作为对照。结果重组质粒转染PAEC经筛选得到抗性细胞克隆,PCR扩增出人HT基因片段,FCM检测转染细胞H抗原表达升高,αGal表达明显降低。结论成功构建了pcD NA3HTcDNA重组质粒,并使人HT基因在PAEC表达,抑制了αGal的合成。     

前列腺腺癌伴发肾肿瘤1例

患者男 ,76岁。因排尿困难 6月伴肉眼血尿 2周就诊。体检 :双肾区无隆起 ,无明显扣击痛。指检 :前列腺Ⅱ度大 ,质硬 ,表面不光滑。血PSA为88.0 μg/L。B超示右肾有一直径4.5cm占位性病变 ,前列腺体积增大 ,内部回声不均匀。双肾CT示右肾上极见一 5cm× 4cm占位性病变 ,密度不均 ,CT值 2 6.2Hu ,可被强化。前列腺穿刺活检证实为前列腺低分化腺癌 ,Gleason评分 9分。全身骨扫描见骨盆、腰椎、肋骨有多处核素浓集影 ,提示 :多发性骨转移。诊断为前列腺癌并发右肾肿瘤并骨转移 ,予内分泌及生物治疗。目前患者已存活2月。讨论　前列腺肿瘤及…     

血红素氧合酶-1对大鼠肾缺血再灌注损伤的保护作用

目的　探讨钴卟啉 (CoPP)诱导的血红素氧合酶 (HO) 1高表达对大鼠肾缺血再灌注损伤 (IRI)的保护作用。方法　建立大鼠肾缺血再灌注损伤模型 ,随机将动物分为假手术组 ,对照组和实验组。动态检测血尿素氮 (BUN)、肌酐 (Cr)、超氧化物岐化酶 (SOD)、丙二醛 (MDA)的含量以及进行肾组织光镜形态学观察和酶联免疫吸附试验 (ELISA)和Westernblot分析HO 1。结果　对照组BUN、Cr升高 ,SOD下降 ,MDA升高 ,HO 1中度提高 (14 4.5± 13 .6) ,肾组织结构紊乱。实验组除HO 1含量大幅提高外 (62 9.4± 78.9) ,尚能显著逆转上述改变 ,两组间差异具有统计学意义 (P <0 .0 5 )。结论　CoPP预处理诱导HO 1在肾缺血之前高表达可通过清除氧自由基 (OFRs)而减轻大鼠肾IRI。     

携带人α1,2-岩藻苷转移酶基因转基因小鼠的建立

目的：建立携带人α1，2-岩藻苷转移酶[alpha（1，2）-fucosyltransferase，HT]基因的转基因小鼠模型。方法：采用受精卯显微注射法，将人HT转基因构件导入昆明白小鼠受精卵的雄原核内，然后将注射后仍健康的受精卵植入假孕母管内，等其自然分娩。对G0代小鼠，应用聚合酶链反应（PCR）和Southern杂交检测人HT基因的整合情况、应用逆转录PCR（RT—PCR）检测人HT基因mRNA水平的表达，应用流式细胞计数（FCM）检测H抗原及α—Gal抗原在小鼠外周血单核细胞（PBMCs）表面的表达。结果：注射后卵的存活率和幼鼠出生率分别为84．9％（968／1140）和10．8％（105／968），外源基因的整合率为7．6％（8／105），基因整合阳性小鼠中有7只的心、肝、肾及骨骼肌组织均有人HT mRNA表达，并且PBMCs表面H抗原表达阳性，表达强度为人PBMCs的95％-150％，同时α—Gal抗原表达减少，为正常小鼠的5％-10％。转基因小鼠已经稳定传3代。结论：携带人α1，2-岩藻糖苷转移酶基因的转基因小鼠模型已制备成功。     

中医为主治疗重症咳喘32例临床观察

<正> 慢性支气管炎,支气管哮喘、阻塞性肺气肿及肺源性心脏病,统属祖国医学咳喘的范畴。近3年来,我们共收治有典型哮喘发作症状,伴有明显缺氧与合并感染的重症咳喘患者32例,现总结如下。一、临床资料 32例中,男26例,女6例。50～60岁10例,61～70岁16例,71岁以上6例。年龄最小52岁,最大76岁。喘息性支气管炎31例,支气管哮喘1例,合并肺气肿9例,肺心病5例。所有病例均因感染致症状加重而急诊入院。中医分型:痰热壅肺型16例,痰浊阻肺型11例,风热犯肺型2例,气阴两虚型3例。     

中药灌肠为主治疗慢性结肠炎25例

<正> 近两年来,我院应用中药保留灌肠配合内服治疗慢性结肠炎,取得了显著疗效,现将治疗的25例报告如下。临床资料 1、一般资料:本组25例中,男15例,女10例。年龄为20～70岁,其中20～30岁9例,31～40岁3例,41～50岁7例,51～60岁5例。60岁以上1例。病程最长25年,最短3个月。 2、临床表现:本组25例中,慢性非特异性结肠炎24例,过敏性结肠炎1例,其中合并急性菌痢1例,肠息肉4例。全部病例均有持续性或反复发作性腹泻,3～6次/     

人类α-1,2-岩藻糖苷转移酶在猪血管内皮细胞的表达及作用

目的：探讨人类α-1，2-岩藻糖苷转移酶（HT）基因在猪血管内皮细胞（PIECs）的表达及意义。方法：将人HT基因重组质粒通过脂质体转染进猪血管内皮细胞，经G418筛选（500mg／L），用流式细胞仪检测HT的表达，表达阳性细胞与人血清共同孵育检测细胞的生存率。结果：流式细胞仪检测结果显示，未经转染HT基因的PIECS的H抗原表达率是13．80％，平均荧光强度很低是32．39，α-Gal表达率是99．98％，平均荧光强度是1347．09；转HT基因的PIECS其H抗原表达率是40．17％，平均荧光强度是143．66，α-Gal表达率是41．15％，平均荧光强度是158．72。转HT基因的细胞在人血清的作用下生存率明显高于未转染的细胞。结论：转染HT基因的PIECs明显提高了H抗原的表达。同时降低了α-Gal的表达．为转基因动物实验探讨克服异种移植超急性排斥反应（HAR）提供理论依据。     

前列腺穿刺活检术中不同麻醉方法有效性和安全性比较

目的 比较3种麻醉方法 在经直肠超声引导下前列腺穿刺活检过程中的有效性和安全性.方法 2006年7月至2008年10月,120名因前列腺特异抗原和(或)直肠指检异常接受前列腺12针穿刺活检的患者随机分为4组,每组30例.A组为对照组,未接受任何麻醉;B组在超声引导下于左、右两侧精囊与前列腺交接处分别注射1%利多卡因5ml行前列腺神经阻滞术(PNB);C组在PNB之前5 min直肠内涂抹复方利多卡因凝胶;D组在PNB之前于前列腺两侧叶内分别注射1%利多卡因2 ml.穿刺结束后对患者进行疼痛视觉模拟评分(VAS),并随访7 d了解并发症情况.结果 超声探头进入直肠时C组患者的VAS为(2.7±1.1)分,低于其他3组,差异有统计学意义(P＜0.05),其他3组之间差异无统计学意义(P＞0.05).穿刺过程中D组患者的VAS为(3.9±1.3)分低于其他3组,差异有统计学意义(P＜0.05),其他3组之间差异无统计学意义(P＞0.05).各组患者并发症的发生率差异无统计学意义(P＞0.05).结论 PNB及直肠内利多卡因凝胶局部麻醉不能明显减轻前列腺穿刺过程中的痛苦,PNB联合前列腺内局部麻醉是安全有效的.     

前列腺癌组织中前列腺癌抗原-1的表达及临床意义

目的：探讨PCa组织中前列腺癌抗原-1（PCA-1）的表达及其临床意义。方法：采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）技术,检测45例PCa组织、30例前列腺高分级上皮样内瘤样病变组织（HG-PIN）、43例BPH组织和39例其他肿瘤组织标本中PCA-1 mRNA的表达。免疫组织化学检测不同前列腺组织中PCA-1蛋白的表达。结果：PCa与HG-PIN组织标本中PCA-1 mRNA的阳性表达率分别为80.0%（36/45）和60.0%（18/30）,BPH组织及其他肿瘤组织中均未见PCA-1 mRNA的表达。PCA-1 mRNA表达与PCa的临床病理参数之间无明显相关性,差异均无统计学意义（P〉0.05）。PCa与HG-PIN组织标本中PCA-1蛋白的阳性表达率分别为75.6%（34/45）和50.0%（15/30）,BPH组织及其他肿瘤组织中未见PCA-1蛋白阳性表达。结论：PCA-1仅在PCa组织中表达,且与PCa的临床病理参数无关,有可能作为特异性的肿瘤标志物对PCa进行早期诊断。     

转人α1,2岩藻糖苷转移酶基因猪动脉内皮细胞抗人血清溶破实验

目的研究转入α1,2岩藻糖苷转移酶(HT)基因克服异种移植超急排斥反应(HAR)的作用。方法构建pcDNA3-HTcDNA重组质粒,体外培养猪动脉内皮细胞(PAEC),脂质体转染法将pcDNA3-HTcDNA转染PAEC,新霉素(G418)筛选具有抗性的细胞克隆,PCR检测重组基因的整合,流式细胞术(FCM)检测转染细胞H抗原和异种抗原α—Gal表达。分别以未转染的PAEC和人脐静脉内皮细胞(HUVEC)作对照。将转染细胞和正常细胞分别以20％、40％和60％人血清孵育2 h,比较溶破细胞百分数。结果重组质粒转染PAEC经筛选得到抗性细胞克隆,PCR扩增出人HT基因片段,FCM检测正常PAEC与转染PAEC,α-Gal平均荧光强度由1346．81降至194．44,H抗原平均荧光强度由9．10增至215．93;α—Gal M2区由99．98％降至37．180A,H抗原M2区由13．80％升至78．54％。转染细胞以人血清孵育后溶破细胞百分数较正常细胞降低,分别由(32．32±2．37)％、(59．54±4．56)％和(71．46±5．94)％降至(15．78±2．69)％、(30．16±1．46)％和(40．48±3．77)％,差异均有统计学意义(P值均<0．05)。结论转人HT基因PAECα—Gal表达明显降低,H抗原表达升高,对人血清溶破的耐受性增强。转人HT基因可以一定程度抑制HAR。